中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
第一章 SON-PCR 扩增抗禾谷孢囊线虫基因LRR 区及序列分析 | 第9-26页 |
引言 | 第9-10页 |
1. 材料与试剂 | 第10-11页 |
·材料 | 第10页 |
·试剂 | 第10页 |
·培养基和溶液 | 第10-11页 |
2. 方法 | 第11-17页 |
·基因组总DNA 提取 | 第11-12页 |
·PCR 扩增与电泳 | 第12页 |
·PCR 产物的回收 | 第12-13页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第13-14页 |
·氯化钙制备法 | 第13-14页 |
·高频转化制备法 | 第14页 |
·目的产物与T-载体连接 | 第14-15页 |
·大肠杆菌高效转化 | 第15页 |
·质粒DNA 小量提取 | 第15-16页 |
·限制性内切酶酶切鉴定重组子 | 第16页 |
·序列的测定与分析 | 第16-17页 |
3. 结果与分析 | 第17-24页 |
·抗禾谷孢囊线虫基因LRR 区的扩增与克隆 | 第17-18页 |
·扩增序列的分析 | 第18-24页 |
4. 讨论 | 第24-25页 |
5. 小结 | 第25-26页 |
第二章 抗禾谷孢囊线虫基因中核苷酸结合位点区(NBS)-亮氨酸重复序列区(LRR)的克隆与序列分析 | 第26-44页 |
引言 | 第26页 |
1. 材料与试剂 | 第26-27页 |
·材料 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·培养基和溶液 | 第26-27页 |
2. 方法 | 第27-33页 |
·基因组总DNA 提取 | 第27-28页 |
·PCR 扩增与电泳 | 第28-29页 |
·PCR 产物的回收 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-31页 |
·氯化钙制备法 | 第29-30页 |
·高频转化制备法 | 第30-31页 |
·目的产物与T-载体连接 | 第31页 |
·大肠杆菌高效转化 | 第31页 |
·质粒DNA 小量提取 | 第31-32页 |
·限制性内切酶酶切鉴定重组子 | 第32-33页 |
·序列的测定与分析 | 第33页 |
3. 结果与分析 | 第33-42页 |
·抗禾谷孢囊线虫基因的NBS 和LRR 编码区的PCR 扩增和克隆 | 第33页 |
·扩增序列的分析 | 第33-42页 |
4. 讨论 | 第42-43页 |
5. 小结 | 第43-44页 |
文献综述 旁侧序列扩增的方法与策略 | 第44-54页 |
1. 反向PCR | 第44-45页 |
·经典反向PCR | 第44-45页 |
·改良型反向PCR | 第45页 |
2. cDNA 末端快速扩增 | 第45-51页 |
·RACE 的基本原理 | 第45-47页 |
·RACE 的优、缺点及改良 | 第47页 |
·新型的RACE | 第47-51页 |
·锚定连接RACE | 第47-48页 |
·RNA 连接酶介导的RACE | 第48-49页 |
·寡聚帽法 | 第49页 |
·环化的第一链cDNA 介导的RACE | 第49-50页 |
·随机RACE 法 | 第50-51页 |
3. 热不对称交错PCR | 第51-53页 |
·TAIL-PCR 技术的原理 | 第51-52页 |
·改良型TAIL-PCR | 第52-53页 |
4. 其他的旁侧序列扩增方法 | 第53-54页 |
·接头连接PCR | 第53页 |
·染色体步移 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
发表文章目录 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |