| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·粘膜病的历史 | 第10页 |
| ·BVDV 的生物学特征 | 第10-11页 |
| ·BVDV 分类位置 | 第10-11页 |
| ·BVDV 形态和理化学特性 | 第11页 |
| ·BVDV 的分型 | 第11页 |
| ·BVDV 基因组结构 | 第11-13页 |
| ·BVDV 的5’-UTR 和3’-UTR | 第11-12页 |
| ·BVDV 的大开放阅读框架 | 第12-13页 |
| ·BVDV 的结构蛋白 | 第13-14页 |
| ·BVDV 疫苗研究进展 | 第14-15页 |
| ·本试验研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·病毒与细胞 | 第17页 |
| ·质粒与菌种 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·扩增引物 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·新生犊牛睾丸细胞(NBTE)的制备 | 第19页 |
| ·BVDV 的增殖 | 第19页 |
| ·BVDV 基因组RNA 的提取 | 第19页 |
| ·BVDV E0、E1、E2 基因的克隆及序列分析 | 第19-22页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因重组原核表达载体的构建 | 第22-23页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因在原核表达系统中的表达 | 第23-25页 |
| 3 试验结果 | 第25-41页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因的克隆和序列分析 | 第25-32页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因的PCR 扩增 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pMD18-T-E0、pMD18-T-E1 和pMD18-T-E2 的鉴定 | 第26-27页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因的测序结果及序列分析 | 第27-32页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因遗传变异分析 | 第32-35页 |
| ·BVDV E0 基因遗传变异分析 | 第32-33页 |
| ·BVDV E1 基因遗传变异分析 | 第33-34页 |
| ·BVDV E2 基因遗传变异分析 | 第34-35页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因重组表达载体的鉴定 | 第35-37页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-E0 的鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-E1 的鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-E2 的鉴定 | 第36-37页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因在大肠杆菌中的表达 | 第37-41页 |
| ·E0 基因表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第37页 |
| ·E1 基因表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第37-38页 |
| ·E2 基因表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第38-39页 |
| ·表达条件的优化 | 第39页 |
| ·表达产物含量测定 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因的克隆和序列分析 | 第41页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因遗传变异分析 | 第41-42页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因表达载体的选择 | 第42页 |
| ·BVDV E0、E1 和E2 基因的表达 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录 | 第49-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
