| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-79页 |
| 第一章 杆状病毒的分子生物学 | 第17-65页 |
| 1.杆状病毒的分子结构 | 第17-21页 |
| 2.杆状病毒对宿主的侵染 | 第21-28页 |
| ·侵染历程 | 第21-22页 |
| ·病毒粒子侵入宿主细胞 | 第22-28页 |
| 3.杆状病毒DNA的复制 | 第28-40页 |
| ·杆状病毒DNA的复制起始点(ori) | 第28-35页 |
| ·杆状病毒DNA的复制方式 | 第35页 |
| ·杆状病毒DNA的复制起始 | 第35-37页 |
| ·杆状病毒DNA复制的有关基因及功能 | 第37-40页 |
| 4.杆状病毒基因的表达与调控 | 第40-59页 |
| ·杆状病毒基因表达的时序性 | 第40-41页 |
| ·杆状病毒基因表达的顺／反式调控 | 第41-59页 |
| 5.杆状病毒宿主特异性 | 第59-65页 |
| ·限制宿主域的一般因素 | 第59页 |
| ·宿主域有关的病毒基因 | 第59-65页 |
| 第二章 杆状病毒的表达系统 | 第65-72页 |
| 1.杆状病毒表达载体系统的特征 | 第65-66页 |
| ·杆状病毒表达载体系统的优势 | 第65-66页 |
| ·杆状病毒表达载体系统的不足 | 第66页 |
| 2 杆状病毒表达系统的策略 | 第66-68页 |
| 3.杆状病毒表面展示系统 | 第68-70页 |
| 4.杆状病毒表达系统的进一步发展 | 第70-72页 |
| 第三章 杆状病毒杀虫剂研究进展 | 第72-77页 |
| 1.杆状病毒杀虫剂和重组杆状病毒杀虫剂 | 第72页 |
| 2.重组杆状病毒杀虫剂安全性 | 第72-73页 |
| 3.重组杆状病毒杀虫剂构建策略 | 第73-77页 |
| ·插入外源基因 | 第73-75页 |
| ·缺肝状病毒基因 | 第75页 |
| ·宿主域改造 | 第75-77页 |
| 本研究的背景、目的和意义 | 第77-79页 |
| 第二部分 研究工作 | 第79-162页 |
| 第一章 研究方法与技术 | 第79-99页 |
| 1.分子生物学实验技术 | 第79-88页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第79-81页 |
| ·限制性酶消化 | 第81页 |
| ·DNA片段回收 | 第81-83页 |
| ·DNA片段和载体的连接 | 第83-84页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第84页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第84-85页 |
| ·菌种的保存 | 第85页 |
| ·PCR | 第85-87页 |
| ·SDS-PAGE | 第87-88页 |
| ·Western blot | 第88页 |
| 2.昆虫细胞培养实验技术 | 第88-91页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第88-89页 |
| ·细胞传代培养 | 第89页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第89-90页 |
| ·细胞转染 | 第90-91页 |
| 3.杆状病毒学实验技术 | 第91-99页 |
| ·杆状病毒在昆虫中的增殖、分离和提纯 | 第91-93页 |
| ·杆状病毒在细胞中的增殖、纯化和空斑滴定 | 第93-96页 |
| ·Bac to Bac实验技术 | 第96-99页 |
| 第二章 杆状病毒新型Bac to Bac系统的构建 | 第99-114页 |
| ·引言 | 第99-100页 |
| ·实验材料 | 第100-101页 |
| ·质粒、菌株、酶、试剂 | 第100-101页 |
| ·血清、培养基、细胞和病毒 | 第101页 |
| ·PCR引物 | 第101页 |
| ·实验方法 | 第101-104页 |
| ·质粒的提取分离 | 第101页 |
| ·共转染与同源重组 | 第101-102页 |
| ·空斑纯化 | 第102页 |
| ·转化E.coli DHIOB感受态细胞 | 第102页 |
| ·转座与转染 | 第102-103页 |
| ·绿色荧光蛋白(EGFP)表达及包涵体形成的检测 | 第103页 |
| ·免疫细胞化学分析 | 第103-104页 |
| ·免疫荧光激光共聚焦 | 第104页 |
| ·研究结果 | 第104-110页 |
| ·转座助手质粒pMon7124的分离鉴定 | 第104页 |
| ·新型Bacmid-egfp的鉴定 | 第104-107页 |
| ·E.coli DHIOBac-egfp菌株的鉴定 | 第107页 |
| ·Bacmid-egfp对Sf-9细胞感染性的检测 | 第107页 |
| ·新型Bacmid-egfp的进一步改进 | 第107页 |
| ·新型Bac to Bac系统的应用 | 第107-110页 |
| ·讨论 | 第110-114页 |
| 第三章 杆状病毒包涵体表面展示系统的研究 | 第114-126页 |
| ·引言 | 第114-115页 |
| ·实验材料 | 第115-116页 |
| ·质粒、菌株、酶、试剂 | 第115页 |
| ·血清、培养基、细胞 | 第115页 |
| ·PCR引物 | 第115-116页 |
| ·实验方法 | 第116-119页 |
| ·重组质粒的构建 | 第116页 |
| ·转染与病毒包装 | 第116-117页 |
| ·SDS-PAGE | 第117-118页 |
| ·组织切片及电镜检测 | 第118-119页 |
| ·研究结果 | 第119-122页 |
| ·重组病毒vAc-pol／gfp的鉴定 | 第119-120页 |
| ·EGFP在重组病毒包涵体表面的展示 | 第120-122页 |
| ·讨论 | 第122-126页 |
| 第四章 囊膜蛋白P74是杆状病毒感染宿主的特异性因子 | 第126-147页 |
| ·引言 | 第126-129页 |
| ·实验材料 | 第129-130页 |
| ·质粒、菌株、酶、试剂 | 第129页 |
| ·细胞与病毒 | 第129-130页 |
| ·PCR引物 | 第130页 |
| ·实验方法 | 第130-133页 |
| ·重组病毒的构建 | 第130-131页 |
| ·病毒包装 | 第131页 |
| ·ODV的提取纯化及ODV囊膜蛋白的提取分离 | 第131页 |
| ·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第131-132页 |
| ·SDS-PAGE与WesternBlot | 第132页 |
| ·生物测定 | 第132-133页 |
| ·研究结果 | 第133-143页 |
| ·重组病毒的构建及包装 | 第133-137页 |
| ·重组病毒中p74基因的表达检测 | 第137-139页 |
| ·重组病毒中p74基因的转录检测 | 第139页 |
| ·P74蛋白在重组病毒ODV囊膜上的异源装配 | 第139-140页 |
| ·p74基因的宿主特异性 | 第140-143页 |
| ·讨论 | 第143-147页 |
| 第五章 重组杆状病毒杀虫剂的环境释放试验研究 | 第147-162页 |
| ·引言 | 第147-149页 |
| ·实验材料 | 第149-150页 |
| ·供试病毒杀虫剂 | 第149页 |
| ·溶液、试剂及PCR引物 | 第149-150页 |
| ·实验方法 | 第150-152页 |
| ·田间试验地点： | 第150页 |
| ·重组病毒杀虫剂对昆虫群落影响的调查方法 | 第150页 |
| ·重组病毒对转田间昆虫群落影响的统汁方法 | 第150-151页 |
| ·重组病毒杀虫剂对田间害虫防治效果的调查统计方法 | 第151页 |
| ·重组病毒杀虫剂的后效性生物测定方法 | 第151页 |
| ·重组病毒杀虫剂在环境中适应性的检测方法 | 第151页 |
| ·田间样本的PCR检测方法 | 第151-152页 |
| ·重组病毒杀虫剂对蔬菜品质影响的检测 | 第152页 |
| ·研究结果 | 第152-160页 |
| ·重组病毒杀虫剂对田间害虫防治效果 | 第152-153页 |
| ·重组病毒杀虫剂对田间害虫天敌种群的影响 | 第153-155页 |
| ·重组病毒杀虫剂对田间昆虫群落影响 | 第155-157页 |
| ·重组病毒杀虫剂在田间的残效 | 第157页 |
| ·重组病毒杀虫剂在环境中的适应性 | 第157-159页 |
| ·重组病毒杀虫剂对蔬菜产量的影响 | 第159页 |
| ·重组病毒杀虫剂对蔬菜品质的影响 | 第159-160页 |
| ·讨论 | 第160-162页 |
| 研究总结 | 第162-164页 |
| 创新点 | 第164-165页 |
| 参考文献 | 第165-184页 |
| 博士期间已发表和待发表论文 | 第184-185页 |
| 致谢 | 第185-187页 |
| 农业部食品质量监督检验测试中心检验结果报告书 | 第187页 |
