| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| 1．1 问题的提出 | 第9-10页 |
| 1．2 前人研究进展 | 第10-15页 |
| 1．2．1 原生质体非对称融合研究 | 第10-11页 |
| 1．2．2 细胞同步化技术 | 第11-14页 |
| 1．2．2．1 物理方法 | 第11-12页 |
| 1．2．2．2 化学方法 | 第12-14页 |
| 1．2．3 微核技术 | 第14-15页 |
| 1．2．3．1 微核技术的基本原理 | 第14页 |
| 1．2．3．2 微原生质体的分离及检测 | 第14页 |
| 1．2．3．3 微核技术的应用 | 第14-15页 |
| 1．3 本研究的目的和内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-20页 |
| 2．1 材料 | 第16页 |
| 2．2 方法 | 第16-20页 |
| 2．2．1 悬浮系的建立 | 第16页 |
| 2．2．2 柑橘胚性愈伤组织生长曲线制作 | 第16页 |
| 2．2．3 柑橘胚性愈伤组织有丝分裂指数曲线制作 | 第16-17页 |
| 2．2．4 柑橘材料各细胞周期指数测定 | 第17页 |
| 2．2．5 细胞学检测有丝分裂指数 | 第17页 |
| 2．2．6 同步化处理试验设计 | 第17-18页 |
| 2．2．6．1 羟基脲(HU) | 第17页 |
| 2．2．6．2 甲基氨草磷(APM) | 第17-18页 |
| 2．2．6．3 羟基脲(HU)和甲基氨草磷(APM)双阻断法 | 第18页 |
| 2．2．7 原生质体分离和纯化 | 第18页 |
| 2．2．7．1 悬浮系原生质体的分离 | 第18页 |
| 2．2．7．2 原生质体纯化 | 第18页 |
| 2．2．8 原生质体活力的鉴定 | 第18-19页 |
| 2．2．9 微原生质体的分离 | 第19页 |
| 2．2．10 染色程序(DAPI法) | 第19页 |
| 2．2．11 微原生质体直径测定 | 第19-20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-42页 |
| 3．1 胚性愈伤组织悬浮系的建立 | 第20-24页 |
| 3．1．1 胚性愈伤悬浮系细胞周期的测定 | 第20-22页 |
| 3．1．1．1 默科特橘橙胚性愈伤悬浮细胞周期 | 第20页 |
| 3．1．1．2 国庆1号胚性愈伤悬浮细胞周期 | 第20-22页 |
| 3．1．1．3 锦橙胚性愈伤悬浮细胞周期 | 第22页 |
| 3．1．2 胚性愈伤悬浮系生长曲线 | 第22-23页 |
| 3．1．3 小结 | 第23-24页 |
| 3．2 同步化处理胚性愈伤组织悬浮系的建立 | 第24-35页 |
| 3．2．1 羟基脲(HU)处理胚性悬浮系 | 第24-27页 |
| 3．2．1．1 HU处理胚性悬浮系的细胞周期 | 第24-26页 |
| 3．2．1．2 HU处理胚性悬浮系的有丝分裂指数(Mitotic Index,MI) | 第26页 |
| 3．2．1．3 小结 | 第26-27页 |
| 3．2．2 甲基氨草磷(APM)处理胚性悬浮系 | 第27-30页 |
| 3．2．2．1 APM处理胚性悬浮系的细胞周期 | 第27-29页 |
| 3．2．2．2 APM处理胚性悬浮系的有丝分裂指数(MI) | 第29页 |
| 3．2．2．3 小结 | 第29-30页 |
| 3．2．3 HU和APM双阻断法处理胚性悬浮系 | 第30-35页 |
| 3．2．3．1 4mM HU处理24h后再用APM处理胚性悬浮系 | 第30-32页 |
| 3．2．3．2 10mM HU处理24h后再用APM处理胚性悬浮系 | 第32-35页 |
| 3．2．3．3 不同品种双阻断法处理后胚性悬浮系的细胞周期 | 第35页 |
| 3．2．3．4 小结 | 第35页 |
| 3．3 同步化处理后细胞学检测 | 第35-37页 |
| 3．3．1 同步化细胞学检测 | 第35-37页 |
| 3．3．2 同步化细胞的微核化现象 | 第37页 |
| 3．4 同步化处理后微核的分离 | 第37-42页 |
| 3．4．1 同步化处理后原生质体活力测定 | 第37-38页 |
| 3．4．2 同步化处理后原生质体微核化观察 | 第38-40页 |
| 3．4．3 微核原生质体的分离 | 第40-42页 |
| 3．4．3．1 微核的大小和比例 | 第40-41页 |
| 3．4．3．2 微核原生质体的观察 | 第41-42页 |
| 4． 讨论 | 第42-46页 |
| 4．1 同步化悬浮系的建立与分析 | 第42-43页 |
| 4．1．1 同步化处理材料细胞周期的选择 | 第42页 |
| 4．1．2 化学试剂在同步化处理中的应用 | 第42页 |
| 4．1．3 同步化程度的测定方法 | 第42-43页 |
| 4．2 HU和APM在诱导同步化悬浮系上的应用 | 第43页 |
| 4．3 纺锤体毒素型化学试剂对细胞的微核化作用 | 第43-44页 |
| 4．4 微核技术与作物遗传改良 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
