摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-17页 |
1. 实验材料和方法 | 第17-27页 |
1.1 材料 | 第17页 |
1.2 试剂与配制 | 第17-18页 |
1.3 仪器 | 第18页 |
1.4 方法 | 第18-27页 |
1.4.1 质粒提取 | 第18页 |
1.4.2 组织 RNA提取与反转录 | 第18-21页 |
1.4.3 外源片段回收,连接和转化 | 第21-22页 |
1.4.4 猪 SREBP-2,CREB-1基因的克隆 | 第22-23页 |
1.4.4.1 引物设计 | 第22-23页 |
1.4.4.2 PCR条件 | 第23页 |
1.4.5 猪 SREBP-1,2基因的染色体定位 | 第23-24页 |
1.4.5.1 猪 SREBP-1,2内含子扩增引物的设计 | 第23-24页 |
1.4.5.2 染色体定位引物的设计 | 第24页 |
1.4.5.3 染色体定位结果分析 | 第24页 |
1.4.6 猪 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱 | 第24-25页 |
1.4.6.1 各组织总 RNA的提取 | 第24页 |
1.4.6.2 RNA浓度测定和cDNA制备 | 第24页 |
1.4.6.3 半定量 PCR指数期的确定 | 第24-25页 |
1.4.6.4 各基因的扩增检测 | 第25页 |
1.4.7 β兴奋剂对 SREBPs基因表达的影响 | 第25页 |
1.4.7.1 盐酸克伦特罗刺激293细胞系 | 第25页 |
1.4.7.2 细胞总 RNA的提取 | 第25页 |
1.4.7.3 半定量检测 SREBPs,CREB-1表达量变化 | 第25页 |
1.4.8 CREB-2对 SREBPs基因表达的影响 | 第25-27页 |
1.4.8.1 CREB-2转染 COS7细胞系 | 第25-27页 |
2. 结果与分析 | 第27-39页 |
2.1 猪 SREBP-2,CREB-1基因的克隆 | 第27-30页 |
2.2 猪 SREBP-1,2基因的染色体定位 | 第30-33页 |
2.2.1 猪 SREBP-1,2基因内含子的扩增 | 第30-31页 |
2.2.2 染色体定位 | 第31-33页 |
2.3 猪 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱 | 第33-36页 |
2.3.1 各组织的RNA的浓度测定 | 第33-34页 |
2.3.2 半定量 PCR检测 SREBPs和 CREB-1的组织分布 | 第34-36页 |
2.4 β兴奋剂对 SREBPs基因表达的影响 | 第36-37页 |
2.5 CREB-2对 SREBPs基因表达的影响 | 第37-39页 |
2.5.1 重组真核表达载体pEGFP-CREB2的构建 | 第37页 |
2.5.2 转染 | 第37-39页 |
3. 讨论 | 第39-42页 |
3.1 SREBP-2,CREB-1基因具有极高的物种同源性 | 第39-40页 |
3.2 SREBP-2基因的染色体精细定位 | 第40页 |
3.3 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱 | 第40页 |
3.4 ATF家族对 SREBPs具有调控作用 | 第40-42页 |
结论与创新 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-57页 |
致谢 | 第57-58页 |