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猪SREBPs和CREB-1基因的克隆、染色体定位及其功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
前言第11-17页
1. 实验材料和方法第17-27页
 1.1 材料第17页
 1.2 试剂与配制第17-18页
 1.3 仪器第18页
 1.4 方法第18-27页
  1.4.1 质粒提取第18页
  1.4.2 组织 RNA提取与反转录第18-21页
  1.4.3 外源片段回收,连接和转化第21-22页
  1.4.4 猪 SREBP-2,CREB-1基因的克隆第22-23页
   1.4.4.1 引物设计第22-23页
   1.4.4.2 PCR条件第23页
  1.4.5 猪 SREBP-1,2基因的染色体定位第23-24页
   1.4.5.1 猪 SREBP-1,2内含子扩增引物的设计第23-24页
   1.4.5.2 染色体定位引物的设计第24页
   1.4.5.3 染色体定位结果分析第24页
  1.4.6 猪 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱第24-25页
   1.4.6.1 各组织总 RNA的提取第24页
   1.4.6.2 RNA浓度测定和cDNA制备第24页
   1.4.6.3 半定量 PCR指数期的确定第24-25页
   1.4.6.4 各基因的扩增检测第25页
  1.4.7 β兴奋剂对 SREBPs基因表达的影响第25页
   1.4.7.1 盐酸克伦特罗刺激293细胞系第25页
   1.4.7.2 细胞总 RNA的提取第25页
   1.4.7.3 半定量检测 SREBPs,CREB-1表达量变化第25页
  1.4.8 CREB-2对 SREBPs基因表达的影响第25-27页
   1.4.8.1 CREB-2转染 COS7细胞系第25-27页
2. 结果与分析第27-39页
 2.1 猪 SREBP-2,CREB-1基因的克隆第27-30页
 2.2 猪 SREBP-1,2基因的染色体定位第30-33页
  2.2.1 猪 SREBP-1,2基因内含子的扩增第30-31页
  2.2.2 染色体定位第31-33页
 2.3 猪 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱第33-36页
  2.3.1 各组织的RNA的浓度测定第33-34页
  2.3.2 半定量 PCR检测 SREBPs和 CREB-1的组织分布第34-36页
 2.4 β兴奋剂对 SREBPs基因表达的影响第36-37页
 2.5 CREB-2对 SREBPs基因表达的影响第37-39页
  2.5.1 重组真核表达载体pEGFP-CREB2的构建第37页
  2.5.2 转染第37-39页
3. 讨论第39-42页
 3.1 SREBP-2,CREB-1基因具有极高的物种同源性第39-40页
 3.2 SREBP-2基因的染色体精细定位第40页
 3.3 SREBPs,CREB-1基因的组织表达谱第40页
 3.4 ATF家族对 SREBPs具有调控作用第40-42页
结论与创新第42-43页
参考文献第43-57页
致谢第57-58页

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