| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一部分 前言 | 第7-15页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第15-39页 |
| ·主要试剂和材料 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-39页 |
| ·人E2F3基因的克隆 | 第17-28页 |
| ·E2F3原核表达载体的构建、表达诱导和Western检测 | 第28-36页 |
| ·真核表达载体pEGFP-N1-E2F3的构建 | 第36-39页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第39-53页 |
| ·基因的克隆 | 第39-44页 |
| ·RT-PCR | 第39页 |
| ·两轮PCR | 第39-40页 |
| ·降落PCR(Touch-down PCR) | 第40页 |
| ·巢式PCR(nested-PCR) | 第40-41页 |
| ·TA克隆测序 | 第41-43页 |
| ·桥联PCR(overlap-PCR) | 第43-44页 |
| ·E2F3原核表达载体的构建及原核表达 | 第44-49页 |
| ·原核表达载体pET28a-E2F3和pET32a-E2F3质粒构建 | 第44-45页 |
| ·原核表达载体pQE30-E2F3的构建 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体pGEX-4T-E2F3的构建 | 第46-47页 |
| ·原核蛋白表达诱导 | 第47-49页 |
| ·重组蛋白的Western检测 | 第49页 |
| ·真核表达载体的构建及其细胞学实验 | 第49-53页 |
| ·真核细胞表达载体pEGFP-N1-E2F3的构建 | 第49-51页 |
| ·E2F3在真核细胞中的表达 | 第51-53页 |
| 第四部分 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附图 | 第59-81页 |
