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胰岛素亲和配基的固相合成与分离应用

第一章 文献综述第1-28页
 1.1 亲和层析技术第8-12页
  1.1.1 前言第8-9页
  1.1.2 亲和层析的一般原理第9-10页
  1.1.3 亲和配基第10-11页
  1.1.4 亲和层析吸附常用载体第11-12页
 1.2 噬菌体展示技术第12-18页
  1.2.1 噬菌体展示技术的基本原理第12-13页
  1.2.2 噬菌体展示系统第13页
  1.2.3 噬菌体随机展示库的构建第13-14页
  1.2.4 噬菌体随机展示库的筛选方法第14-16页
  1.2.5 噬菌体展示技术的特点第16-17页
  1.2.6 筛选亲和分离蛋白质所需配基第17-18页
 1.3 多肽的固相合成第18-27页
  1.3.1 前言第18页
  1.3.2 多肽的合成简史第18-19页
  1.3.3 固相多肽合成原理第19-21页
   1.3.3.1 Boc 固相法(经典 Merrifield 固相法)第19-21页
   1.3.3.2 Fmoc 固相法第21页
  1.3.4 固相合成法的优点第21页
  1.3.5 固相合成中的氨基酸保护第21-22页
   1.3.5.1 α-氨基保护基第21-22页
   1.3.5.2 α-羧基保护基第22页
   1.3.5.3 侧链基团的保护方法第22页
  1.3.6 肽键的形成第22-25页
   1.3.6.1 活化酯法第23页
   1.3.6.2 DCC 法第23-24页
   1.3.6.3 酰氯法第24页
   1.3.6.4 对称酸酐法和N-羧基酸酐法第24-25页
   1.3.6.5 原位法第25页
  1.3.7 多肽固相合成的监测第25-26页
  1.3.8 产物的分析方法第26-27页
   1.3.8.1 质谱分析(Mass Spectrometry, MS)第26页
   1.3.8.2 SDS-PAGE 电泳第26-27页
 1.4 本文的研究目的和内容第27-28页
第二章 不同肽配基的固相合成第28-42页
 2.1 前言第28页
 2.2 实验材料与设备第28-29页
  2.2.1 实验试剂第28-29页
  2.2.2 主要溶液的配制第29页
  2.2.3 实验设备第29页
 2.3 实验步骤与方法第29-33页
  2.3.1 多肽的合成第30-32页
  2.3.2 茚三酮定性显色(Kaiser)法第32页
  2.3.3 多肽的分析与鉴定第32页
   2.3.3.1 RP-HPLC 分析第32页
   2.3.3.2 质谱分析(Mass Spectrometry,MS)第32页
  2.3.4 肽配基的固定和亲和柱的制备第32-33页
  2.3.5 亲和色谱操作条件第33页
 2.4 实验结果及讨论第33-41页
  2.4.1 七肽(HWWWPAS)的合成与分析第33-34页
  2.4.2 六肽的合成及分析第34-39页
  2.4.3 固定化琼脂糖六肽及七肽配基的亲和特性第39-41页
 2.5 小结第41-42页
第三章 吸附介质的制备与应用第42-55页
 3.1 前言第42页
 3.2 实验材料与设备第42-43页
  3.2.1 实验试剂第43页
  3.2.2 实验设备第43页
 3.3 实验步骤与方法第43-47页
  3.3.1 合成原理第43-44页
   3.3.1.1 自由基聚合机理第43-44页
   3.3.1.2 悬浮聚合机理第44页
  3.3.2 介质的制备第44-45页
   3.3.2.1 聚合反应第44页
   3.3.2.2 致孔剂的去除第44-45页
   3.3.2.3 功能基化反应第45页
  3.3.3 微球介质修饰密度测定第45-46页
   3.3.3.1 酸碱滴定法第46页
   3.3.3.2 滴定曲线法第46页
   3.3.3.3 沉淀滴定法第46页
  3.3.4 介质的表征第46-47页
  3.3.5 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第47页
 3.4 实验结果及讨论第47-54页
  3.4.1 介质的物理性质第48页
  3.4.2 介质表面氨基修饰密度的测定第48-49页
  3.4.3 PGE-hexapeptide 的合成第49-51页
  3.4.4 PGE-peptide 的亲和吸附特性第51-52页
  3.4.5 PGE-hexapeptide 对混合蛋白的分离第52-54页
 3.5 小结第54-55页
第四章 结论第55-56页
参考文献第56-60页
攻读硕士学位期间主要学术成果第60-61页
致谢第61页

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