| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第11-12页 |
| ·植物多基因转化研究综述 | 第12-16页 |
| ·毛白杨多基因转化研究进展 | 第16-17页 |
| ·研究的主要内容和技术路线 | 第17-19页 |
| 2. 植物多基因表达载体PYL1305-rolB-GA-Bt-BADH-CBF的构建 | 第19-25页 |
| ·材料与方法 | 第19-21页 |
| ·基因、载体、质粒、重组酶和菌株 | 第19页 |
| ·植物表达载体pYL1305-Bt-BADH-GA20ox-rolB-CBF的构建策略 | 第19-20页 |
| ·PMD-nos载体构建 | 第19页 |
| ·PMD-rd29A：CBF：nos的构建 | 第19页 |
| ·供给载体PYL-d1-rd29A：CBF：nos的构建 | 第19页 |
| ·植物表达载体PYL1305-Bt-BADH-GA20ox-rolB-CBF的构建 | 第19-20页 |
| ·NOS终止子及各基因的扩增引物 | 第20页 |
| ·接受载体PYL1305-rolB-GA-Bt-BADH与供给载体PYL-d1-rd29A：CBF：nos的重组 | 第20页 |
| ·多基因表达载体转化农杆菌LB4404 | 第20页 |
| ·农杆菌LB4404感受态的制备 | 第20页 |
| ·液氮冻融法直接转化农杆菌 | 第20页 |
| ·PCR检测目的基因及测序 | 第20-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-24页 |
| ·PMD-nos载体构建 | 第21页 |
| ·PMD-rd29A：CBF：nos载体构建 | 第21-22页 |
| ·PYL-d1-rd29A：CBF：nos的构建 | 第22页 |
| ·植物表达载体pYL1305-Bt-BADH-GA20ox-rolB-CBF的构建 | 第22-23页 |
| ·植物多基因表达载体导入根癌农杆菌LB4404及鉴定 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 3. 农杆菌介导表达载体的遗传转化 | 第25-31页 |
| ·材料与方法 | 第25-27页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·农杆菌与质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·烟草及毛白杨遗传转化培养基 | 第25-26页 |
| ·毛白杨对潮霉素的敏感性试验 | 第26页 |
| ·潮霉素对毛白杨叶片不定芽再生的影响 | 第26页 |
| ·潮霉素对毛白杨植株生长的影响 | 第26页 |
| ·农杆菌介导的叶盘转化程序 | 第26页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增检测目的片段 | 第26页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-30页 |
| ·潮霉素对毛白杨叶片分化的影响 | 第27页 |
| ·潮霉素对毛白杨生长的影响 | 第27-28页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第28-29页 |
| ·转化植株的Southern检测 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 4 多基因在转化烟草及毛白杨中表达分析 | 第31-45页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·转多基因植株生根及形态分析 | 第31页 |
| ·转基因植株的耐盐性及PEG诱导处理分析 | 第31-32页 |
| ·转多基因的耐盐性试验 | 第31页 |
| ·PEG诱导处理试验 | 第31-32页 |
| ·转多基因植株Bt毒蛋白含量测定 | 第32页 |
| ·转多基因烟草在温室中的生长测定 | 第32页 |
| ·转多基因植株的荧光定量表达分析 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-44页 |
| ·转多基因植株生根及形态分析 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的耐盐性及PEG诱导处理分析 | 第34-37页 |
| ·转多基因植株Bt毒蛋白含量分析 | 第37-38页 |
| ·转多基因烟草的温室生长情况 | 第38-39页 |
| ·转多基因植株的荧光定量表达分析 | 第39-44页 |
| ·转基因植株组培苗正常生长多基因表达量的分析 | 第39-41页 |
| ·转基因植株逆境诱导下多基因表达量分析 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-49页 |
| ·高容量重组载体的构建与重组 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的抗性筛选及分子检测 | 第45页 |
| ·转化植株的逆境胁迫生长分析 | 第45-46页 |
| ·转化植株的定量表达分析 | 第46页 |
| ·转化植株的形态变化分析 | 第46-47页 |
| ·转基因生物安全问题 | 第47-49页 |
| 6 展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 图版 | 第57-61页 |
| 个人简介 | 第61-63页 |
| 导师简介 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
