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中国红豆杉紫杉醇生物合成相关基因的克隆和异源表达研究

摘要第1-4页
Abstracts第4-6页
目录第6-9页
第1章 紫杉烷类化合物生物合成途径研究进展(综述)第9-29页
   ·前言第9-12页
   ·紫杉烷化合物生物合成研究第12-26页
     ·紫杉烷化合物的结构与合成酶类的分析与确证第13-15页
     ·基因克隆的不同策略第15-24页
     ·紫杉醇生物合成途径研究及重组基因的应用前景第24-26页
   ·紫杉醇生物合成酶类基因克隆的启示第26-29页
     ·酶学研究的基础第26-27页
     ·最佳的学科组合第27页
     ·植物细胞培养技术与天然产物研究第27-29页
第2章 材料与方法(汇总)第29-48页
   ·实验材料第29-35页
     ·植物材料第29页
     ·菌株和质粒第29-35页
   ·常规分子生物学操作与方法第35-48页
     ·DNA的提取与纯化第35-38页
     ·感受态宿主菌的制备与目的质粒的转化第38页
     ·噬菌体文库的分子操作第38-43页
     ·聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆第43-45页
     ·重组质粒的筛选第45-46页
     ·蛋白质的常规操作第46-48页
第3章 中国红豆杉紫杉烯醇酰基转移酶的克隆与表达第48-69页
   ·实验方法第49-55页
     ·中国红豆杉紫杉醇生物合成相关酰基转移酶cDNA的克隆第49-52页
     ·中国红豆杉紫杉烯醇酰基转移酶在大肠杆菌中的表达和纯化第52-54页
     ·酰基转移酶的功能初步鉴定第54-55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·中国红豆杉紫杉烯醇酰基转移酶cDNA的克隆第55-62页
     ·中国红豆杉紫杉烯醇酰基转移酶在大肠杆菌中的表达和纯化第62-66页
   ·问题与讨论第66-69页
第4章 中国红豆杉紫杉烷10β羟基化酶cDNA克隆与酵母表达第69-91页
   ·实验方法第70-76页
     ·中国红豆杉紫杉烷10β-羟基化酶cDNA的克隆第70-71页
     ·中国红豆杉紫杉烷10β-羟基化酶基因组DNA的克隆第71-72页
     ·中国红豆杉紫杉烷10β羟基化酶在酿酒酵母菌中的表达第72-76页
   ·结果与分析第76-89页
     ·中国红豆杉紫杉烷10β-羟基化酶cDNA的克隆第76-85页
     ·中国红豆杉紫杉烷10β-羟基化酶在酿酒酵母中的表达第85-89页
   ·问题与讨论第89-91页
第5章 用SSP-PCR法克隆中国红豆杉羟基化酶第91-102页
   ·实验方法第91-93页
     ·制备噬菌体文库分库第91-92页
     ·单侧特异性引物PCR(SSP-PCR)反应第92页
     ·PCR扩增产物的亚克隆第92页
     ·二次SSP-PCR反应第92-93页
   ·结果与分析第93-100页
     ·羟基化酶cDNA的克隆第93-95页
     ·中国红豆杉羟基化酶TCH2蛋白的预测第95-98页
     ·同源性分析第98-100页
   ·问题与讨论第100-102页
第6章 结论第102-104页
参考文献第104-111页
综述:植物细胞色素P450研究进展第111-167页
博士期间文章发表情况第167-168页
致谢第168-169页
原创性及知识产权声明第169页

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