| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-27页 |
| 1 白藜芦醇合酶的研究进展 | 第8-19页 |
| ·Res的结构及性质 | 第9页 |
| ·Res的存在与分布 | 第9-10页 |
| ·Res的制备 | 第10-11页 |
| ·Res的药理活性 | 第11-14页 |
| ·RS的诱导 | 第14-16页 |
| ·RS基因的分子生物学研究 | 第16-19页 |
| 2 酵母基因表达系统 | 第19-21页 |
| ·酵母基因表达系统概况 | 第19页 |
| ·酵母表达的优点 | 第19页 |
| ·酵母菌的宿主系统 | 第19-20页 |
| ·酵母菌的载体系统 | 第20页 |
| ·酵母菌的转化方法 | 第20页 |
| ·酵母的表达系统 | 第20-21页 |
| 3 甘蔗遗传转化研究 | 第21-25页 |
| ·甘蔗的遗传转化方法 | 第22-24页 |
| ·影响甘蔗遗传转化的因素 | 第24-25页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第一章 RS基因表达载体的构建 | 第27-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-39页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第28-36页 |
| ·菌种的活化 | 第28-29页 |
| ·pMD-18-T-RS质粒的提取、酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·pMD-18-T-RS连接质粒的小量提取 | 第29页 |
| ·酶切检测 | 第29-30页 |
| ·pBIL-1质粒提取、酶切检测 | 第30-31页 |
| ·目的片段和载体片段的回收与纯化 | 第31-32页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第31-32页 |
| ·pBIL-1质粒的酶切、补平和大片段的回收纯化 | 第32页 |
| ·目的片段和载体大片段的连接反应及转化大肠杆菌 | 第32-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·筛选重组子 | 第34-35页 |
| ·重组质粒PCR检测 | 第34-35页 |
| ·酶切鉴定 | 第35页 |
| ·质粒的大量提取 | 第35-36页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第36-39页 |
| ·引物的设计 | 第36页 |
| ·表达质粒pVT102U/a-RS的构建 | 第36-37页 |
| ·pMD18T-RS~+和pVT102U／a质粒的小量提取、酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·载体片段的回收纯化 | 第37页 |
| ·连接反应及重组子的鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒转化酵母 | 第37-38页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·酵母转化 | 第38页 |
| ·酵母转化子的PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-47页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第39-44页 |
| ·pMD-18T-RS、pBIL-1质粒酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·目的片段和载体大片段的回收及纯化 | 第41页 |
| ·重组质粒PCR、酶切鉴定 | 第41-44页 |
| ·酵母表达载体构建的结果 | 第44-47页 |
| ·DMD18T-RS~+、pVT102U／a酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·载体片段的回收与目的片段的连接 | 第45-46页 |
| ·酵母转化子的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47页 |
| 5 小结 | 第47-48页 |
| 第二章 果蔗遗传转化体系的初步研究 | 第48-58页 |
| 1 材料与试剂 | 第48页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·仪器和试剂 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-51页 |
| ·果蔗再生体系的优化 | 第48-49页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·培养方法 | 第48-49页 |
| ·试验处理 | 第49页 |
| ·基因枪法转化果蔗 | 第49-51页 |
| ·转化材料的抗性筛选预试验 | 第49页 |
| ·转化材料的预处理 | 第49-50页 |
| ·微弹的制备 | 第50页 |
| ·转化材料的轰击 | 第50-51页 |
| ·转化材料的过渡培养和选择培养 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-56页 |
| ·果蔗再生体系的优化 | 第51-53页 |
| ·2，4-D对愈伤组织诱导的影响 | 第51页 |
| ·BA对愈伤组织分化的影响 | 第51-53页 |
| ·NAA对生根培养的影响 | 第53页 |
| ·抗性筛选预试验的结果 | 第53-55页 |
| ·基因枪法转化果蔗的结果 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 关于后续工作 | 第57页 |
| 6 小结 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第66-68页 |
| 附录2 主要溶液的配制 | 第68-69页 |
| 附录3 培养基的配制 | 第69-70页 |
| 附录4 白藜芦醇合酶基因序列 | 第70页 |