中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
文献综述 | 第9-27页 |
1.1 药用植物资源的地位、我国中药资源现状 | 第9页 |
1.1.1 药用植物资源的地位 | 第9页 |
1.1.2 中药基础性研究现状 | 第9页 |
1.1.3 中药研究发展趋势 | 第9页 |
1.2 生物技术在传统药材基础研究中的应用 | 第9-11页 |
1.2.1 传统药材的植物组织和细胞培养 | 第9-10页 |
1.2.2 药用植物的细胞大规模培养 | 第10页 |
1.2.3 生物转化 | 第10页 |
1.2.4 药用植物的发根培养 | 第10-11页 |
1.3 雪莲的种属、生境、药用、生理特点、濒危现状及主要药用成分研究进展 | 第11-17页 |
1.3.1 雪莲的种属及种类 | 第11-13页 |
1.3.2 雪莲的自然生长环境 | 第13页 |
1.3.3 雪莲的生长特点 | 第13-14页 |
1.3.4 雪莲的药用价值 | 第14页 |
1.3.5 雪莲的主要化学成分 | 第14-16页 |
1.3.6 雪莲开采现状 | 第16页 |
1.3.7 水母雪莲的研究现状 | 第16-17页 |
1.4 植物次生代谢物径的研究概况 | 第17-18页 |
1.4.1 植物的次生代谢 | 第17页 |
1.4.2 次生代谢物的种类 | 第17页 |
1.4.3 植物次生代谢物与微生物 | 第17页 |
1.4.4 次生代谢物与植物信号传递 | 第17-18页 |
1.4.5 次生代谢物与环境的适应关系 | 第18页 |
1.4.6 植物次生代谢的基因工程 | 第18页 |
1.5 类黄酮代谢的合成途径 | 第18-21页 |
1.5.1 苯丙氨酸代谢途径 | 第18-19页 |
1.5.2 类黄酮的合成 | 第19-20页 |
1.5.3 黄酮合成途径关键酶的转录调控因子 | 第20-21页 |
1.6 毛状根在植物遗传转化研究中的应用 | 第21-27页 |
1.6.1 发根农杆菌的生物学特征 | 第21页 |
1.6.2 发根农杆菌的分类 | 第21页 |
1.6.3 Ri质粒转化体的遗传特征 | 第21-22页 |
1.6.4 Ri质粒的结构、基因的功能 | 第22-23页 |
1.6.5 发根农杆菌的遗传转化操作方法及影响因素 | 第23-24页 |
1.6.6 Ri质粒转化发状根的检测 | 第24页 |
1.6.7 发根农杆菌遗传转化的应用 | 第24-25页 |
1.6.8 Ri质粒遗传转化现状 | 第25-27页 |
引言 | 第27-28页 |
材料与方法 | 第28-36页 |
3.1 材料 | 第28-30页 |
3.1.1 实验材料 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂 | 第28-30页 |
3.1.3 主要设备与仪器 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-36页 |
3.2.1 水母雪莲的高频再生体系的建立 | 第30-31页 |
3.2.2 发根农杆菌介导的水母雪莲高频转化体系的建立 | 第31-32页 |
3.2.3 转基因根系的检测 | 第32-34页 |
3.2.4 总黄酮的分光光度法检测 | 第34页 |
3.2.5 转基因毛状根的培养条件优化 | 第34-36页 |
结果与分析 | 第36-50页 |
4.1 影响水母雪莲再生的条件 | 第36-39页 |
4.1.1 GA_3对水母雪莲的种子的预处理 | 第36页 |
4.1.2 2,4-D适于诱导水母雪莲愈伤组织 | 第36页 |
4.1.3 通过体细胞胚胎发生成丛生苗 | 第36-37页 |
4.1.4 子叶、叶片的器官发生成丛生苗 | 第37-38页 |
4.1.5 两种再生系统的比较 | 第38页 |
4.1.6 不定芽的诱导生根和移栽 | 第38-39页 |
4.2 影响发根农杆菌遗传转化的条件 | 第39-43页 |
4.2.1 发根农杆菌的活化 | 第39-40页 |
4.2.2 卡那霉素对水母雪莲不同外植体的致死作用不同 | 第40-41页 |
4.2.3 水母雪莲外植体预培养时间对感染率的作用 | 第41页 |
4.2.4 蔗糖预处理感染外植体对转化率的影响 | 第41-43页 |
4.3 转基因发状根的检测 | 第43-44页 |
4.3.1 甘露碱(mannopine)组织化学检测 | 第43-44页 |
4.3.2 PCR分子检测 | 第44页 |
4.4 发状根中的类黄酮含量的测定 | 第44-50页 |
4.4.1 水母雪莲毛状根乙醇提取物的紫外波长扫描 | 第44-45页 |
4.4.2 水母雪莲阳性毛状根中的类黄酮含量及增殖倍数测定 | 第45-46页 |
4.4.3 水母雪莲发状根中黄酮合成的调节 | 第46-50页 |
讨论 | 第50-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
缩略词表 | 第61-62页 |