| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-38页 |
| ·研究的目的和意义 | 第14页 |
| ·文献综述 | 第14-38页 |
| ·植物基因分离方法及选择策略 | 第14-19页 |
| ·改良作物品质基因工程的研究进展 | 第19-22页 |
| ·磷酸蔗糖合成酶(SPS)基因工程的研究进展 | 第22-24页 |
| ·甜菜遗传转化研究进展 | 第24-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-53页 |
| ·试验材料 | 第38-40页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·菌种和质粒 | 第38页 |
| ·分子生物学及生化试剂 | 第38页 |
| ·RT-PCR引物 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-53页 |
| ·玉米蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的克隆 | 第40-42页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第42-45页 |
| ·农杆菌介导的甜菜遗传转化 | 第45-48页 |
| ·基因枪法对丛生芽的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的检测 | 第49-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-81页 |
| ·玉米蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的克隆 | 第53-66页 |
| ·PCR反应Mg~(2+)浓度的确定 | 第53页 |
| ·PCR反应条件的确定 | 第53页 |
| ·SPS基因的克隆 | 第53-66页 |
| ·玉米蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因植物表达载体的构建 | 第66-70页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第66-69页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·甜菜再生体系的建立 | 第70-75页 |
| ·不同的灭菌方式对种子污染率的影响 | 第70页 |
| ·诱导丛生芽外植体的确定 | 第70页 |
| ·预培养的幼苗形态变化 | 第70-71页 |
| ·不同基因型的甜菜叶柄丛生芽的诱导频率 | 第71-74页 |
| ·经过预培养的甜菜叶柄丛生芽诱导培养基中激素水平的确定 | 第74-75页 |
| ·农杆菌介导的甜菜经过预培养的叶柄遗传转化 | 第75-78页 |
| ·不同浓度的农杆菌及侵染时间对经过预培养的叶柄侵染的影响 | 第75页 |
| ·共培养温度对农杆菌侵染力的影响 | 第75-76页 |
| ·卡那霉素(Km)筛选浓度的确定 | 第76-78页 |
| ·基因枪法对丛生芽的遗传转化 | 第78页 |
| ·转基因植株的检测 | 第78-81页 |
| ·PCR扩增 | 第78页 |
| ·PCR-Southern杂交 | 第78-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| ·改良甜菜产品质量的基因工程策略 | 第81-82页 |
| ·建立高效的再生系统是遗传转化的基础 | 第82页 |
| ·RT-PCR引物的设计及反应条件的优化 | 第82-83页 |
| ·阳性植株PCR检测引物设计和PCR-Southern杂交探针选择 | 第83页 |
| ·农杆菌介导法与基因枪法的比较 | 第83-85页 |
| 5 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 附录 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 作者简介 | 第99-100页 |
| 图版 | 第100-102页 |
