中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
缩略表 | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-27页 |
第一章 获得转基因作物的策略 | 第9-20页 |
一、 载体转化系统 | 第9-11页 |
(一) 农杆菌介导法的原理与方法 | 第10页 |
(二) 农杆菌介导法的特点 | 第10-11页 |
(三) 农杆菌介导法的研究进展 | 第11页 |
二、 直接转化系统 | 第11-12页 |
(一) 基因枪法的原理 | 第12页 |
(二) 基因枪技术的特点 | 第12页 |
(三) 基因枪技术的应用 | 第12页 |
三、 种质转化系统 | 第12-15页 |
(一) 花粉管通道法 | 第13-15页 |
1 、 花粉管通道法的原理 | 第13页 |
2 、 花粉管通道法转化体系的特点 | 第13-14页 |
3 、 花粉管通道法技术的应用 | 第14-15页 |
(二) 种胚浸泡法 | 第15页 |
1 、 种胚浸泡原理 | 第15页 |
2 、 种胚浸泡后引起性状与分子变异的研究 | 第15页 |
四、 转基因植物中外源基因的整合、遗传与表达 | 第15-18页 |
(一) 外源基因在植物基因组中的整合特性 | 第15-16页 |
1 、 不同遗传转化方法对外源基因整合的影响 | 第15-16页 |
2 、 外源基因整合到植物基因组的定向、定点整合 | 第16页 |
(二) 外源基因在植物基因组中的遗传特性 | 第16-18页 |
1 、 外源基因在后代的遗传方式呈多样性 | 第16-17页 |
2 、 外源基因在转基因植物中的遗传稳定性 | 第17-18页 |
(三) 外源基因在植物基因组中的表达特性 | 第18页 |
五、 转基因植株的鉴定 | 第18-20页 |
(一) 利用标记基因进行鉴定 | 第18-19页 |
1 、 选择标记基因 | 第18-19页 |
2 、 报告基因 | 第19页 |
(二) 分子检测 | 第19-20页 |
1 、 分子标记 | 第19页 |
2 、 分子杂交 | 第19-20页 |
第二章 植物花器官发育调节基因工程 | 第20-22页 |
一、 植物花器官ABC模型 | 第20-21页 |
二、 非洲菊花器官发育调节基因 | 第21-22页 |
第三章 植物贮藏蛋白的调节与表达 | 第22-26页 |
一、 大豆种子蛋白组成 | 第22-24页 |
(一) 大豆球蛋白(11S)和伴球蛋白(7S)组成 | 第22页 |
(二) 大豆种子贮藏蛋白(11S和7S)的基因表达 | 第22-23页 |
(三) 大豆种子氨基酸组成及11S/7S值 | 第23-24页 |
二、 外源转基因引起大豆蛋白组成变化 | 第24-26页 |
第四章 研究目的与意义 | 第26-27页 |
第二部分 研究报告 | 第27-53页 |
第一章 研究材料 | 第27-29页 |
一、 受体材料 | 第27页 |
二、 菌种材料及基因 | 第27-28页 |
三、 试剂、引物、探针及仪器设备 | 第28-29页 |
第二章 研究方法 | 第29-36页 |
一、 大豆DNA与质粒DNA大量提取及纯化 | 第29-30页 |
二、 大豆蛋白质凝胶电泳 | 第30-32页 |
三、 大豆蛋白质氨基酸盐酸水解法及测定 | 第32页 |
(一) 大豆蛋白质氨基酸盐酸水解法 | 第32页 |
(二) 大豆蛋白氨基酸测定 | 第32页 |
四、 大豆遗传转化方法 | 第32-33页 |
五、 苗床筛选 | 第33页 |
六、 转基因大豆的分子生物学鉴定方法 | 第33-36页 |
(一) PCR检测 | 第33-34页 |
(二) Southern杂交分析 | 第34-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-48页 |
一、 转化载体中外源基因gaga1的确证 | 第36-37页 |
二、 花粉管通道法转化大豆 | 第37-38页 |
三、 种胚浸泡法转化大豆 | 第38页 |
四、 转gaga1大豆的鉴定 | 第38-48页 |
(一) 转基因大豆的分子鉴定 | 第38-40页 |
1 、 卡那霉素筛选 | 第38页 |
2 、 PCR检测 | 第38-40页 |
3 、 Southern杂交验证 | 第40页 |
(二) 转基因大豆农艺性状鉴定 | 第40-41页 |
(三) 转基因大豆种子蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第41-46页 |
(四) 大豆种子蛋白氨基酸含量测定 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-52页 |
一、 gaga1转入后促使植株矮化等农艺性状变化 | 第48-49页 |
二、 转gaga1基因影响种子贮藏蛋白的组成 | 第49-50页 |
三、 关于gaga1调节基因对大豆花器官影响的探讨 | 第50-52页 |
第五章 进一步工作展望 | 第52-53页 |
全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
致谢 | 第63页 |