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转gaga1基因大豆的培育及初步鉴定

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
缩略表第8-9页
第一部分 文献综述第9-27页
 第一章 获得转基因作物的策略第9-20页
  一、 载体转化系统第9-11页
   (一) 农杆菌介导法的原理与方法第10页
   (二) 农杆菌介导法的特点第10-11页
   (三) 农杆菌介导法的研究进展第11页
  二、 直接转化系统第11-12页
   (一) 基因枪法的原理第12页
   (二) 基因枪技术的特点第12页
   (三) 基因枪技术的应用第12页
  三、 种质转化系统第12-15页
   (一) 花粉管通道法第13-15页
    1 、 花粉管通道法的原理第13页
    2 、 花粉管通道法转化体系的特点第13-14页
    3 、 花粉管通道法技术的应用第14-15页
   (二) 种胚浸泡法第15页
    1 、 种胚浸泡原理第15页
    2 、 种胚浸泡后引起性状与分子变异的研究第15页
  四、 转基因植物中外源基因的整合、遗传与表达第15-18页
   (一) 外源基因在植物基因组中的整合特性第15-16页
    1 、 不同遗传转化方法对外源基因整合的影响第15-16页
    2 、 外源基因整合到植物基因组的定向、定点整合第16页
   (二) 外源基因在植物基因组中的遗传特性第16-18页
    1 、 外源基因在后代的遗传方式呈多样性第16-17页
    2 、 外源基因在转基因植物中的遗传稳定性第17-18页
   (三) 外源基因在植物基因组中的表达特性第18页
  五、 转基因植株的鉴定第18-20页
   (一) 利用标记基因进行鉴定第18-19页
    1 、 选择标记基因第18-19页
    2 、 报告基因第19页
   (二) 分子检测第19-20页
    1 、 分子标记第19页
    2 、 分子杂交第19-20页
 第二章 植物花器官发育调节基因工程第20-22页
  一、 植物花器官ABC模型第20-21页
  二、 非洲菊花器官发育调节基因第21-22页
 第三章 植物贮藏蛋白的调节与表达第22-26页
  一、 大豆种子蛋白组成第22-24页
   (一) 大豆球蛋白(11S)和伴球蛋白(7S)组成第22页
   (二) 大豆种子贮藏蛋白(11S和7S)的基因表达第22-23页
   (三) 大豆种子氨基酸组成及11S/7S值第23-24页
  二、 外源转基因引起大豆蛋白组成变化第24-26页
 第四章 研究目的与意义第26-27页
第二部分 研究报告第27-53页
 第一章 研究材料第27-29页
  一、 受体材料第27页
  二、 菌种材料及基因第27-28页
  三、 试剂、引物、探针及仪器设备第28-29页
 第二章 研究方法第29-36页
  一、 大豆DNA与质粒DNA大量提取及纯化第29-30页
  二、 大豆蛋白质凝胶电泳第30-32页
  三、 大豆蛋白质氨基酸盐酸水解法及测定第32页
   (一) 大豆蛋白质氨基酸盐酸水解法第32页
   (二) 大豆蛋白氨基酸测定第32页
  四、 大豆遗传转化方法第32-33页
  五、 苗床筛选第33页
  六、 转基因大豆的分子生物学鉴定方法第33-36页
   (一) PCR检测第33-34页
   (二) Southern杂交分析第34-36页
 第三章 结果与分析第36-48页
  一、 转化载体中外源基因gaga1的确证第36-37页
  二、 花粉管通道法转化大豆第37-38页
  三、 种胚浸泡法转化大豆第38页
  四、 转gaga1大豆的鉴定第38-48页
   (一) 转基因大豆的分子鉴定第38-40页
    1 、 卡那霉素筛选第38页
    2 、 PCR检测第38-40页
    3 、 Southern杂交验证第40页
   (二) 转基因大豆农艺性状鉴定第40-41页
   (三) 转基因大豆种子蛋白的SDS-PAGE鉴定第41-46页
   (四) 大豆种子蛋白氨基酸含量测定第46-48页
 第四章 讨论第48-52页
  一、 gaga1转入后促使植株矮化等农艺性状变化第48-49页
  二、 转gaga1基因影响种子贮藏蛋白的组成第49-50页
  三、 关于gaga1调节基因对大豆花器官影响的探讨第50-52页
 第五章 进一步工作展望第52-53页
全文结论第53-54页
参考文献第54-63页
致谢第63页

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