| 1 英文缩略词 | 第1-9页 |
| 2 中文摘要 | 第9-14页 |
| 3 英文摘要 | 第14-20页 |
| 4 前言 | 第20-21页 |
| 5 材料与方法 | 第21-38页 |
| ·药品与试剂 | 第21页 |
| ·动物、手术和药物引入 | 第21-22页 |
| ·后肢运动功能测定 | 第22页 |
| ·痛敏行为观察 | 第22页 |
| ·热辐射甩尾潜伏期(TFL)和缩腿潜伏期(FFL)测定 | 第22-23页 |
| ·大鼠Formalin致痛模型 | 第23页 |
| ·脊髓原代细胞培养 | 第23-25页 |
| ·孕鼠胎龄判定 | 第23页 |
| ·鼠尾胶原制备 | 第23页 |
| ·鼠尾胶原和多聚赖氨酸双层铺板 | 第23页 |
| ·培养方法 | 第23-25页 |
| ·培养神经细胞的损伤程度判定 | 第25页 |
| ·形态观察 | 第25页 |
| ·LDH测定 | 第25页 |
| ·细胞死亡率 | 第25页 |
| ·NO测定(Griess法) | 第25页 |
| ·显微荧光光度技术测定脊髓神经元单细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i) | 第25-26页 |
| ·cNOS和iNOS活性测定 | 第26-27页 |
| ·取材与冻存 | 第26页 |
| ·~3H-L-Arg转化实验 | 第26-27页 |
| ·脊髓膜制备与~3H-MK801结合实验 | 第27页 |
| ·神经形态学研究方法 | 第27-31页 |
| ·灌注固定、取材与切片 | 第27-28页 |
| ·尼氏体染色 | 第28页 |
| ·NADPH-d组化染色 | 第28页 |
| ·免疫组织(细胞)化学ABC反应法 | 第28-31页 |
| ·分子生物学方法 | 第31-37页 |
| ·bcNOS、iNOS和c-fos质粒cDNA的扩增和提取 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·质粒转化、克隆与扩增 | 第31页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA中量提取与纯化 | 第32页 |
| ·酶切鉴定 | 第32页 |
| ·bcNOS、iNOS和c-fos探针制备与特异性鉴定 | 第32-34页 |
| ·bcNOS、iNOS和c-fos相互独立(特异)的探针选择 | 第32-34页 |
| ·探针的回收 | 第34页 |
| ·探针标记与检测 | 第34-35页 |
| ·斑点杂交 | 第35页 |
| ·原位杂交 | 第35-37页 |
| ·主要溶液配制 | 第35-36页 |
| ·漂浮法原位杂交基本程序 | 第36-37页 |
| ·实验对照与条件控制 | 第37页 |
| ·半定量分析 | 第37页 |
| ·统计学方法 | 第37-38页 |
| 6 结果 | 第38-97页 |
| ·Dyn致瘫后cNOS和iNOS活性与mRNA表达。 | 第38-59页 |
| ·不同剂量Dyn对大鼠脊髓功能和病理的影响。 | 第38-40页 |
| ·Dyn致瘫后不同时间背侧与腹侧脊髓cNOS和iNOS活性变化。 | 第40页 |
| ·Dyn致瘫后NADPH-d变化 | 第40-44页 |
| ·Dyn致瘫后bcNOS和iNOS免疫活性变化 | 第44-46页 |
| ·bcNOS-IR与NADPH-d活性变化的比较 | 第46-51页 |
| ·致瘫剂量Dyn对bcNOS和iNOS mRNA表达的影响 | 第51-59页 |
| ·方法鉴定 | 第51-54页 |
| ·bcNOSmRNA表达的细胞定位与损伤反应 | 第54页 |
| ·iNOSmRNA表达的细胞定位和损伤反应 | 第54-59页 |
| ·小结 | 第59页 |
| ·NOS抑制剂L-NAME,7-NI和AG对Dyn致瘫和镇痛作用的影响 | 第59-67页 |
| ·功能对抗与病理改善 | 第59-61页 |
| ·对ecNOS和bcNOS无选择性的cNOS抑制剂L-NAME | 第59-61页 |
| ·iNOS选择性抑制剂AG | 第61页 |
| ·bcNOS选择性抑制7-NI | 第61页 |
| ·背侧与腹侧脊髓cNOS和iNOS活性变化 | 第61-64页 |
| ·NADPH-d活性与bcNOS免疫活性变化 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-67页 |
| ·NOS底物L-Arg和NO供体Sper／NO对Dyn致瘫和镇痛作用的影响 | 第67-72页 |
| ·功能与病理变化 | 第67-69页 |
| ·L-Arg低剂量镇痛和高剂量致痛 | 第67页 |
| ·Sper／NO低剂量对抗Dyn致瘫和加强镇痛,高剂量本身致瘫和致痛 | 第67-69页 |
| ·背侧与腹侧脊髓cNOS和iNOS活性和MK801结合的变化 | 第69页 |
| ·小结 | 第69-72页 |
| ·Dyn致瘫和镇痛时NOS表达与NMDA和_κ受体的相互关系) | 第72-76页 |
| ·Dyn致瘫和镇痛时NMDA受体活性与NOS表达的相互关系 | 第72页 |
| ·_κ受体参与Dyn致瘫引起的NOS表达增强 | 第72-76页 |
| ·小结 | 第76页 |
| ·Dyn致瘫和镇痛时NOS与c-fos表达的相互关系 | 第76-87页 |
| ·c-Fos免疫组化的最佳条件与正常分布 | 第76页 |
| ·Dyn致瘫早期c-Fos-IR表达明显落后于bcNOS-IR,但后期c-Fos-IR和bcNOS-IR均持续性表达,并与病理损害和功能障碍密切相关。 | 第76-77页 |
| ·镇痛剂量Dyn可明显抑制Formalin诱发的c-Fos-IR和bcNOS-IR表达,并被Nor-BNI所对抗 | 第77-82页 |
| ·镇痛剂量Dyn可明显抑制Formalin诱发的c-fos、bcNOS和iNOSmRNA表达,并被Nor-BNI对抗 | 第82页 |
| ·NOS与c-fos之间的跨细胞信息传递 | 第82-87页 |
| ·小结 | 第87页 |
| ·Dyn通过_κ和NMDA受体影响单细胞内游离Ca~(2+)浓度 | 第87-94页 |
| ·Dyn对去极化性[Ca2+]i的抑制和促进作用 | 第87-90页 |
| ·NMDA和_κ受体机制 | 第90页 |
| ·小结 | 第90-94页 |
| ·离体培养脊髓神经元的NMDA和Dyn毒性 | 第94-97页 |
| ·离体培养脊髓神经元NMDA的毒性和NO介导机制 | 第94页 |
| ·DynA(1-17)对培养脊髓神经元的影响 | 第94页 |
| ·小结 | 第94-97页 |
| 7 讨论 | 第97-108页 |
| ·腹侧和背侧脊髓NOS变化与Dyn致瘫和镇痛作用 | 第97页 |
| ·bcNOS与iNOS在Dyn致脊髓损伤中的不同作用 | 第97-99页 |
| ·Dyn致脊髓损伤后bcNOS和iNOS的细胞来源 | 第99页 |
| ·bcNOS和iNOS引起神经损伤的机制 | 第99-100页 |
| ·Dyn诱发腹侧脊髓bcNOS和iNOS高表达的机制 | 第100-101页 |
| ·NMDA-NOS／NO与Dyn镇痛(痛调制) | 第101-102页 |
| ·NO的血管作用与细胞作用 | 第102-104页 |
| ·Dyn致瘫的缺血机制与细胞毒性机制 | 第104-105页 |
| ·脊髓表达多种基因的共性分析与意义 | 第105-106页 |
| ·Dyn致脊髓损伤后iNOSmRNA表达而iNOS-IR阴性的原因分析 | 第106-107页 |
| ·bcNOS神经元的自身保护与自身灭亡 | 第107-108页 |
| 8 结论 | 第108-111页 |
| 9 致谢 | 第111-112页 |
| 10 参考文献 | 第112-120页 |
| 11 综述一：NO在神经损伤中的保护与毒性作用 | 第120-137页 |
| ·NO简况 | 第120-124页 |
| ·NO的神经毒性与保护作用 | 第124-126页 |
| ·NO的神经保护机制 | 第126-129页 |
| ·NO的神经毒性机制 | 第129-132页 |
| ·参考文献 | 第132-137页 |
| 12 综述二：强啡肽痛调制和致神经损伤作用的研究进展 | 第137-147页 |
| ·Dyn镇痛与致痛作用及其机制 | 第137-140页 |
| ·Dyn致神经损伤作用及其机制 | 第140-143页 |
| ·参考文献 | 第143-147页 |
| 13 攻读博士学位期间发表的论文 | 第147-148页 |
| 14 个人简历 | 第148-149页 |
| 15 导师组成员 | 第149页 |
