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东亚飞蝗海藻糖合成酶基因的克隆与功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
1 绪论第12-20页
   ·引言第12页
   ·研究背景及进展第12-18页
     ·海藻糖研究进展第12-15页
     ·海藻糖合成途径及其相关基因第15-16页
     ·海藻糖合成酶研究进展第16-18页
   ·研究目的第18页
   ·研究内容及技术路线第18-20页
     ·研究内容第18页
     ·技术路线第18-20页
2 材料与方法第20-42页
   ·材料第20-24页
     ·供试昆虫第20页
     ·菌株和载体第20-21页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·主要溶液配制第23-24页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的克隆及序列分析第24-31页
     ·东亚飞蝗TPS 基因同源片段的PCR 扩增、克隆及序列测定第24-27页
     ·3’RACE 扩增东亚飞蝗TPS 基因3’端第27-29页
     ·5’RACE 扩增东亚飞蝗TPS 基因5’端第29-31页
     ·Lm Tps 的扩增序列的拼接与分析第31页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的组织表达分析第31-32页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的RNAi 研究第32-34页
   ·LmTps 基因的酿酒酵母突变株功能互补研究第34-38页
     ·酿酒酵母重组表达质粒PFL61/LmTps 的构建第34-36页
     ·Saccharomyces cerevisiae/ PFL61-LmTps 工程菌株的构建第36-37页
     ·酿酒酵母转化子的表型研究第37-38页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶酶(LmTps)基因在毕赤酵母中的表达第38-42页
     ·pPIC9K-LmTps 重组表达质粒的构建第38-39页
     ·Pichia pastoris/ pPIC9K-LmTps 工程菌株的构建与筛选第39-40页
     ·Pichia pastoris/ pPIC9K-LmTps 在KM71 中的诱导表达第40-42页
3 结果与分析第42-55页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶基因(LmTps)的克隆与分析第42-49页
     ·东亚飞蝗TPS 基因同源片段扩增结果第42页
     ·东亚飞蝗TPS 基因3’RACE 扩增结果第42-43页
     ·东亚飞蝗TPS 基因5’RACE 扩增结果第43-44页
     ·东亚飞蝗扩增序列拼接结果及分析第44-49页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的组织表达分析第49-50页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的RNAi 研究第50页
   ·LmTps 基因的酿酒酵母突变株互补研究第50-53页
     ·酿酒酵母重组表达质粒PFL61/LmTps 的构建第50-51页
     ·Saccharomyces cerevisiae/ PFL61-LmTps 工程菌株的构建第51-52页
     ·酿酒酵母转化子的表型研究第52-53页
   ·LmTps 在毕赤酵母中的表达第53-55页
     ·pPIC9K-LmTps 重组表达质粒的构建第53页
     ·Pichia pastoris/ pPIC9K-LmTps 工程菌株的构建与筛选第53-54页
     ·Pichia pastoris/ pPIC9K-LmTps 在KM71 中的诱导表达第54-55页
4 讨论第55-57页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因克隆第55页
   ·东亚飞蝗海藻糖合成酶(LmTps)基因的组织表达分析第55页
   ·东亚飞蝗中肠海藻糖合成酶(LmTps)基因的功能研究第55-56页
   ·小结第56-57页
5 结论及后续工作建议第57-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-67页
附录第67-69页
 A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录第67页
 B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目第67-69页

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