项目资助 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Summary | 第5-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-20页 |
1 孕酮受体(PGR)基因 | 第9-13页 |
·PGR 基因概述 | 第9页 |
·PGR 基因的亚型和作用机理 | 第9-10页 |
·PGR 基因与人类疾病 | 第10-11页 |
·PGR 基因与动物繁殖机能 | 第11-13页 |
2 甲状腺转录因子-1(TTF-1) | 第13-15页 |
·甲状腺转录因子-1 概述 | 第13页 |
·甲状腺转录因子-1 的结构 | 第13-14页 |
·甲状腺转录因子-1 的生物学作用 | 第14-15页 |
·甲状腺转录因子-1 的多态性 | 第15页 |
3 实时荧光定量 PCR | 第15-18页 |
·实时荧光定量 PCR 的原理 | 第16-17页 |
·实时荧光定量 PCR 的分类 I | 第17页 |
·实时荧光定量 PCR 的分类 II | 第17-18页 |
4 研究目的和意义 | 第18-20页 |
第二部分 材料与方法 | 第20-34页 |
1 试验材料 | 第20-21页 |
·试验动物 | 第20页 |
·试验主要试剂 | 第20-21页 |
·溶液的配制 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
2 试验方法 | 第21-31页 |
·绵羊血样的采集 | 第21页 |
·绵羊组织样的采集保存 | 第21页 |
·绵羊血液基因组 DNA 的提取 | 第21-22页 |
·DNA 检测 | 第22-24页 |
·PCR 引物的设计 | 第24-25页 |
·PCR 反应体系和反应程序 | 第25-26页 |
·PCR 产物的纯化回收 | 第26页 |
·PCR 产物测序 | 第26页 |
·PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR-SSCP)分析 | 第26-27页 |
·图像分析 | 第27页 |
·PCR 产物测序 | 第27-28页 |
·绵羊总 RNA 提取方法 | 第28-29页 |
·RNA 的纯化 | 第29-30页 |
·RT 反应 | 第30页 |
·Real Time PCR 条件的优化 | 第30-31页 |
·实时荧光定量 PCR(Real Time PCR)检测 | 第31页 |
3 数据统计分析及使用的软件 | 第31-34页 |
·基因频率和基因型频率的计算 | 第31-32页 |
·遗传多态性分析 | 第32-33页 |
·Hardy-Weinberg 平衡的检测 | 第33页 |
·基因表达量相对定量计算 | 第33页 |
·主要采用的统计分析工具软件 | 第33-34页 |
第三部分 试验结果 | 第34-46页 |
1 绵羊基因组 DNA 的提取及检测结果 | 第34页 |
2 PCR-SSCP 检测和遗传特性分析 | 第34-43页 |
·PGR 基因多态性检测与遗传特性分析 | 第34-38页 |
·TTF-1 基因 CDS 序列测序 | 第38-40页 |
·TTF-1 基因 TS1 引物扩增片段多态性检测与遗传特性分析 | 第40-43页 |
3 TTF-1 基因表达实时荧光定量 PCR 结果 | 第43-46页 |
·总 RNA 提取结果 | 第43-44页 |
·常规 PCR 反应扩增结果 | 第44页 |
·实时荧光定量 PCR 结果 | 第44-45页 |
·目的基因的表达量 | 第45-46页 |
第四部分 分析与讨论 | 第46-53页 |
1 PGR 基因的多态性 | 第46-47页 |
2 TTF-1 基因的多态性 | 第47-48页 |
3 TTF-1 基因的表达 | 第48页 |
4 关于实验方法等 | 第48-53页 |
·血样的采集及 DNA 的提取 | 第48-49页 |
·实时荧光定量 PCR 引物二聚体荧光值的消除 | 第49-51页 |
·部分试验工具的制作 | 第51-53页 |
第五部分 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录一 本试验所涉及的溶液的配制方法 | 第60-62页 |
附录二 本试验中用到的主要仪器设备 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
个人简介 | 第64-65页 |
导师简介 | 第65-66页 |