摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-26页 |
·珙桐的概况 | 第9-13页 |
·珙桐的生物学特征 | 第9-10页 |
·珙桐的天然分布及濒危原因 | 第10-12页 |
·珙桐的国内外研究进展 | 第12-13页 |
·cDNA文库概况 | 第13-24页 |
·构建cDNA文库的新方法 | 第13-18页 |
·cDNA文库的分类 | 第18-21页 |
·cDNA文库的应用 | 第21-23页 |
·构建理想cDNA文库考虑的因素 | 第23-24页 |
·本研究的立题依据 | 第24-26页 |
·目的意义 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-41页 |
·实验材料与试剂 | 第26-30页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌株和载体 | 第26页 |
·试剂 | 第26-27页 |
·溶液及培养基配制 | 第27-29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-41页 |
·珙桐叶片总RNA的提取 | 第30-32页 |
·cDNA的合成 | 第32-36页 |
·连接反应 | 第36页 |
·包装反应 | 第36-37页 |
·文库质量鉴定 | 第37-41页 |
3 结果与分析 | 第41-50页 |
·珙桐总RNA的浓度和质量检测 | 第41-43页 |
·采用Trizol法提取珙桐总RNA的浓度和质量检测 | 第41-42页 |
·采用Rneasy Plant Mini Kit法提取珙桐总RNA的浓度和质量检测 | 第42-43页 |
·cDNA文库构建及质量检测 | 第43-50页 |
·双链cDNA的合成和鉴定 | 第43-45页 |
·cDNA的分级分离 | 第45-46页 |
·cDNA与载体连接效率及未扩增文库滴度测定 | 第46-47页 |
·文库的重组率 | 第47-48页 |
·扩增文库滴度和库容量测定 | 第48页 |
·文库的PCR鉴定 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-60页 |
·关于珙桐叶片总RNA提取 | 第50-52页 |
·总RNA提取过程应注意的问题 | 第51页 |
·利用总RNA为起始材料构建cDNA文库 | 第51-52页 |
·关于cDNA文库的构建 | 第52-58页 |
·关于cDNA的合成 | 第52-55页 |
·关于cDNA的分级分离 | 第55页 |
·关于噬菌体颗粒构建 | 第55-57页 |
·λ噬菌体平板培养 | 第57-58页 |
·关于cDNA文库的质量 | 第58-59页 |
·cDNA文库质量评价 | 第58-59页 |
·cDNA文库构建技术的优化 | 第59页 |
·cDNA文库构建后续工作 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68页 |