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MAPK在用初级精母细胞核取代生发泡的重构卵成熟和原核形成中的调控作用

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-17页
1 前言第17-39页
   ·体细胞单倍体化第17-24页
     ·体细胞染色体不能正确分离第19-20页
     ·重构卵中细胞周期检验点不够完善第20-21页
     ·重构卵中胞质分裂出现异常第21-22页
     ·重构卵中染色体完全凝集、微管组装双极纺锤体的能力较差第22页
     ·重构卵激活能力较差第22-23页
     ·重构卵中第一极体不发生退化第23页
     ·重构卵中MPF 和MAPK 活性的变化第23-24页
   ·蛋白激酶在哺乳动物卵母细胞成熟和受精过程中的作用第24-39页
     ·卵母细胞成熟与激活第24-28页
     ·MAPK 在哺乳动物卵母细胞成熟中的作用第28-36页
     ·MAPK 在受精后的作用第36-39页
2 材料与方法第39-46页
   ·实验小鼠和试剂第39页
   ·卵母细胞、初级精母细胞以及卵丘细胞的获取第39-40页
     ·GV 期卵母细胞第39页
     ·Pro-MI 卵母细胞的获取第39页
     ·卵丘细胞的获取第39页
     ·初级精母细胞获取第39-40页
   ·GV 互换第40-41页
     ·显微操作第40页
     ·GV-胞质体复合体的融合第40-41页
   ·初级精母细胞或卵丘细胞胞质内直接注射第41页
   ·卵母细胞成熟、大极体形成以及凝集染色体的分布第41页
   ·成熟期间卵母细胞核进程的判定第41-42页
   ·第一极体形态学观察第42页
   ·OA 和U0126 处理第42页
   ·卵母细胞激活第42页
   ·ICSI第42-43页
     ·精子的准备第42页
     ·ICSI 程序第42-43页
   ·IVF第43页
   ·原核形成的判定第43页
   ·免疫细胞化学第43-44页
     ·微管、微丝、染色体三重染色第43-44页
     ·核纤层、染色体双重染色第44页
   ·MAPK 活性检测第44-45页
   ·MPF 活性检测第45页
   ·数据分析第45-46页
3 结果第46-62页
   ·不同成熟阶段的胞质受体、不同类型的供核细胞以及供核细胞胞质对重构卵成熟率、极体形成以及染色体凝集的影响第46页
   ·含有不同类型第一极体的成熟重构卵中凝集染色体分布第46-48页
   ·重构卵(GV+PS)体外成熟期间的核进程第48页
   ·不同类型的重构卵中第一极体排出时间第48-49页
   ·重构卵(GV+PS)在成熟期间添加OA 和U0126 对第一极体形成以及染色体凝集情况的影响第49-50页
   ·成熟重构卵中形成双极纺锤体的能力第50页
   ·重构卵成熟期间以及激活前添加OA和/或U0126对第一极体退化的影响第50-51页
   ·重构卵在成熟期间微丝、微管的分布第51-52页
   ·不同的激活方案对成熟重构卵第二极体和原核形成的影响第52页
   ·不同成熟阶段的胞质受体、不同类型的供核细胞对成熟的重构卵激活率的影响第52-53页
   ·重构卵(GV+PS)成熟期间以及激活前分别添加OA 和U0126 对激活率的影响第53-54页
   ·在重构卵成熟期间和激活前使用OA 和U0126 处理对形成原核的重构卵中核纤层蛋白表达量的影响第54-55页
   ·不同类型的成熟重构卵中MAPK 和MPF 的活性第55-56页
   ·重构卵(GV+PS)在成熟期间添加OA 和U0126 后对MAPK 和MPF 活性的影响第56-57页
   ·重构卵(GV+PS)在成熟期间以及激活前分别添加OA 和U0126 后MAPK和MPF 的活性第57-58页
   ·不同类型的成熟重构卵中在成熟、激活前后 MAPK 和 MPF 的活性变化第58-59页
   ·不同受体胞质和供核细胞对重构卵发育能力的影响第59-60页
   ·去核与注核的时间间隔、成熟期间和激活前添加OA 和U0126 对重构卵发育能力的影响第60-62页
4 讨论第62-75页
   ·重构卵能够排出第一极体第62-63页
   ·大极体的形成第63-65页
   ·第一极体排出的速度加快第65-66页
   ·重构卵中纺锤体组装、微丝富集及染色体凝集第66-68页
   ·重构卵中极体不退化第68-69页
   ·重构卵的激活第69-72页
   ·MPF 和MAPK 在重构卵中的变化第72-75页
5 结论第75-77页
6 参考文献第77-90页
7 图版及图版说明第90-97页
8 致谢第97-98页
9 作者简介及发表论文情况第98-99页

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