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肌腱细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠的研制与鉴定

缩略词表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 前言第12-26页
   ·肌腱的发育与结构第12-18页
     ·肌腱细胞的发生和形态第12-13页
     ·肌腱细胞外基质第13-14页
     ·胶原纤维的合成和组装第14-16页
     ·肌腱发育与疾病密切相关的分子第16-18页
   ·TGF-β信号同路与肌腱发育与疾病第18-22页
     ·TGF-β与肌腱发育第19-20页
     ·TGF-β与肌腱愈合第20-21页
     ·TGF-β与肌腱的粘连第21-22页
   ·基因打靶技术简介第22-25页
   ·研究目的意义和手段第25-26页
第二章 材料与方法第26-34页
   ·材料与试剂第26-27页
     ·实验动物第26页
     ·质粒与菌种第26页
     ·试剂第26页
     ·仪器第26页
     ·引物合成第26-27页
   ·载体的制备第27-28页
     ·载体构建第27页
     ·载体线性化第27-28页
   ·受精卵的显微注射第28页
   ·转基因小鼠的基因型鉴定第28-29页
     ·小鼠基因组 DNA 的制备第28页
     ·转基因小鼠的 PCR 鉴定第28-29页
   ·Real-time PCR 检测第29-30页
     ·转基因小鼠组织 RNA 的提取第29-30页
     ·反转录RNA 得到组织cDNA第30页
     ·Realtime-PCR 鉴定第30页
   ·LacZ 染色第30-31页
     ·COl1a1-Cre 和ROSA26 双转基因胚胎的获得第30页
     ·LacZ 染色第30-31页
     ·石蜡包埋、切片及复染第31页
   ·BrdU 掺入法检测细胞增殖第31页
   ·苏木素-伊红(H&E)染色第31-32页
   ·透射电镜第32页
   ·免疫印记(Western Blotting)第32-33页
   ·肌腱细胞体外培养第33-34页
第三章 结果第34-47页
   ·肌腱细胞特异性Cre 重组酶转基因小鼠的构建第34-39页
     ·COl1a1-Cre 转基因载体的构建第34页
     ·转基因首建者小鼠的获得第34-35页
     ·COl1a1-Cre 转基因小鼠在肌腱和成骨细胞中表达Cre 重组酶第35-36页
     ·COl1a1-Cre 在肌腱和成骨细胞中表达第36-39页
   ·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除小鼠表型的初步分析第39-43页
     ·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除导致小鼠全身瘫痪第39-40页
     ·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除导致肌腱结构紊乱和胞外基质减少第40-42页
     ·TGF-βRII 基因敲除小鼠肌腱细胞增殖增加第42-43页
     ·TGF-βRII 基因敲除后肌腱的标记分子和胞外基质主要成分明显下降第43页
   ·肌腱细胞 Smad4 基因敲除小鼠表型的初步分析第43-47页
     ·肌腱细胞特异性Smad4 基因敲除导致小鼠后肢瘫痪第43-45页
     ·肌腱细胞 Smad4 基因敲除没有引起肌腱细胞分布和形态紊乱第45-47页
第四章 讨论第47-50页
   ·Col1a1-Cre 转基因小鼠的研制及 Cre 重组酶的表达情况检测第47-48页
   ·肌腱中剔除 TGF-βRII 基因导致小鼠全身瘫痪及肌腱细胞外基质分泌下降第48页
   ·肌腱中剔除 Smad4 基因导致小鼠运动能力下降,胶原纤维直径大小异常第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-55页
文献综述第55-62页
在读期间发表研究论文全文第62-73页
个人简历第73-74页
致谢第74页

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