缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-26页 |
·肌腱的发育与结构 | 第12-18页 |
·肌腱细胞的发生和形态 | 第12-13页 |
·肌腱细胞外基质 | 第13-14页 |
·胶原纤维的合成和组装 | 第14-16页 |
·肌腱发育与疾病密切相关的分子 | 第16-18页 |
·TGF-β信号同路与肌腱发育与疾病 | 第18-22页 |
·TGF-β与肌腱发育 | 第19-20页 |
·TGF-β与肌腱愈合 | 第20-21页 |
·TGF-β与肌腱的粘连 | 第21-22页 |
·基因打靶技术简介 | 第22-25页 |
·研究目的意义和手段 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-34页 |
·材料与试剂 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第26页 |
·质粒与菌种 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·仪器 | 第26页 |
·引物合成 | 第26-27页 |
·载体的制备 | 第27-28页 |
·载体构建 | 第27页 |
·载体线性化 | 第27-28页 |
·受精卵的显微注射 | 第28页 |
·转基因小鼠的基因型鉴定 | 第28-29页 |
·小鼠基因组 DNA 的制备 | 第28页 |
·转基因小鼠的 PCR 鉴定 | 第28-29页 |
·Real-time PCR 检测 | 第29-30页 |
·转基因小鼠组织 RNA 的提取 | 第29-30页 |
·反转录RNA 得到组织cDNA | 第30页 |
·Realtime-PCR 鉴定 | 第30页 |
·LacZ 染色 | 第30-31页 |
·COl1a1-Cre 和ROSA26 双转基因胚胎的获得 | 第30页 |
·LacZ 染色 | 第30-31页 |
·石蜡包埋、切片及复染 | 第31页 |
·BrdU 掺入法检测细胞增殖 | 第31页 |
·苏木素-伊红(H&E)染色 | 第31-32页 |
·透射电镜 | 第32页 |
·免疫印记(Western Blotting) | 第32-33页 |
·肌腱细胞体外培养 | 第33-34页 |
第三章 结果 | 第34-47页 |
·肌腱细胞特异性Cre 重组酶转基因小鼠的构建 | 第34-39页 |
·COl1a1-Cre 转基因载体的构建 | 第34页 |
·转基因首建者小鼠的获得 | 第34-35页 |
·COl1a1-Cre 转基因小鼠在肌腱和成骨细胞中表达Cre 重组酶 | 第35-36页 |
·COl1a1-Cre 在肌腱和成骨细胞中表达 | 第36-39页 |
·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除小鼠表型的初步分析 | 第39-43页 |
·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除导致小鼠全身瘫痪 | 第39-40页 |
·肌腱细胞 TGF-βRII 基因敲除导致肌腱结构紊乱和胞外基质减少 | 第40-42页 |
·TGF-βRII 基因敲除小鼠肌腱细胞增殖增加 | 第42-43页 |
·TGF-βRII 基因敲除后肌腱的标记分子和胞外基质主要成分明显下降 | 第43页 |
·肌腱细胞 Smad4 基因敲除小鼠表型的初步分析 | 第43-47页 |
·肌腱细胞特异性Smad4 基因敲除导致小鼠后肢瘫痪 | 第43-45页 |
·肌腱细胞 Smad4 基因敲除没有引起肌腱细胞分布和形态紊乱 | 第45-47页 |
第四章 讨论 | 第47-50页 |
·Col1a1-Cre 转基因小鼠的研制及 Cre 重组酶的表达情况检测 | 第47-48页 |
·肌腱中剔除 TGF-βRII 基因导致小鼠全身瘫痪及肌腱细胞外基质分泌下降 | 第48页 |
·肌腱中剔除 Smad4 基因导致小鼠运动能力下降,胶原纤维直径大小异常 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
文献综述 | 第55-62页 |
在读期间发表研究论文全文 | 第62-73页 |
个人简历 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |