| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第10-20页 |
| 第一章 猪链球菌2型基因工程亚单位疫苗研究进展 | 第10-20页 |
| 1 猪链球菌2型疫苗概述 | 第10-11页 |
| 2 猪链球菌2型亚单位疫苗研究进展 | 第11-15页 |
| ·溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein,MRP) | 第11-12页 |
| ·胞外因子(Extracellular protein facter,EF) | 第12页 |
| ·溶血素(SLY) | 第12-13页 |
| ·38kDa蛋白 | 第13页 |
| ·SS2其他具免疫保护作用的蛋白 | 第13-14页 |
| ·SS2重组亚单位二联苗的研究 | 第14-15页 |
| 3 展望 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-20页 |
| 第二篇 试验研究 | 第20-64页 |
| 第二章 猪链球菌2型江苏分离株MRP、HM6、GAPDH基因片段的克隆表达及免疫反应性鉴定 | 第20-38页 |
| 1 材料和方法 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·目的基因扩增 | 第22-24页 |
| ·质粒pET-28a(+)的提取及双酶切 | 第24-25页 |
| ·原核表达载体mrp-pET28a、hm6-pET28a、gapdh-pET28a的构建 | 第25-26页 |
| ·MRP、HM6、GAPDH融合蛋白的诱导表达 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE检测融合蛋白的表达 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白的纯化及免疫转印 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-33页 |
| ·原核表达载体mrp-pET28a、hm6-pET28a、gapdh-pET28a的构建 | 第28页 |
| ·MRP、HM6、GAPDH融合蛋白的诱导表达、纯化及免疫转印 | 第28-33页 |
| ·测序结果分析 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 第三章 猪链球菌2型江苏分离株MRP、HM6、GAPDH基因片段串联表达载体的构建及其表达 | 第38-52页 |
| 1 材料和方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·目的基因扩增 | 第39-40页 |
| ·串联表达载体mrp-hm6-pET28a的构建及鉴定 | 第40页 |
| ·串联表达载体gapdh-mrp-hm6-pET28a的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| 2 结果 | 第42-47页 |
| ·串联表达载体mrp-hm6-pET28a以及gapdh-mrp-hm6-pET28a的构建 | 第42页 |
| ·融合蛋白MRP-HM6、GAPDH-MRP-HM6的诱导表达、纯化及免疫原性分析 | 第42-45页 |
| ·串联表达质粒测序结果及分析 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 第四章 猪链球菌2型HA9801株重组表达蛋白对斑马鱼的免疫保护力评价 | 第52-64页 |
| 1 材料和方法 | 第53-55页 |
| ·菌株、试剂及仪器 | 第53页 |
| ·试验动物 | 第53页 |
| ·免疫原制备 | 第53-54页 |
| ·SS2苏分离株HA9801的斑马鱼毒力试验 | 第54页 |
| ·斑马鱼的主动免疫保护试验 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-57页 |
| ·菌株复壮 | 第55页 |
| ·毒力试验 | 第55-57页 |
| ·安全性试验 | 第57页 |
| ·斑马鱼主动免疫保护试验 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 全文总结 | 第64-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
