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三氧化二砷诱导的多发性骨髓瘤细胞凋亡的功能蛋白质组学研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-8页
第一章 前言第8-13页
   ·多发性骨髓瘤的研究现状第8页
   ·三氧化二砷抗癌机理的研究进展第8-9页
   ·蛋白质组学的研究进展第9-13页
     ·蛋白质组学概述第9页
     ·蛋白质组学研究技术第9-11页
     ·差异蛋白质组学第11-13页
第二章 技术路线第13-14页
第三章 材料与方法第14-33页
   ·主要材料第14页
     ·细胞系第14页
     ·质粒和菌种第14页
     ·三氧化二砷第14页
     ·14-3-3ζ siRNA第14页
   ·主要试剂第14-16页
     ·细胞培养第14页
     ·双向电泳试剂第14-15页
     ·质谱鉴定试剂第15-16页
     ·Western-blot试剂第16页
     ·其他试剂及材料第16页
   ·生物信息学软件第16-17页
   ·主要仪器第17页
   ·试剂配制第17-22页
     ·双向电泳试剂配制第17-20页
     ·银染染色液第20页
     ·蛋白质酶解及质谱溶液第20-21页
     ·Western blot试剂配方第21-22页
     ·蛋白酶体检测试剂第22页
     ·细胞凋亡检测试剂第22页
   ·实验方法第22-33页
     ·细胞培养第22页
     ·细胞收集第22-23页
     ·细胞总蛋白裂解和提取第23页
     ·Bradford法蛋白浓度测定第23-24页
     ·2DE步骤第24-25页
     ·图像扫描与分析第25-26页
     ·差异表达蛋白质酶解第26页
     ·质谱鉴定第26-27页
     ·差异表达蛋白质的功能分类和蛋白质相互作用网络图第27页
     ·ATO处理前后U266细胞14-3-3ζ变化的Western Blot验证第27-28页
     ·14-3-3ζ的RNA干扰第28-30页
     ·14-3-3ζ在U266细胞中的过表达第30-31页
     ·ATO对热激蛋白和泛素-蛋白酶体系统(UPS)的影响第31-32页
     ·统计学处理第32-33页
第四章 结果第33-51页
   ·Bradford法测蛋白浓度第33页
   ·ATO处理前后骨髓瘤细胞U266 2-DE结果第33-36页
   ·差异蛋白质的质谱鉴定第36-37页
   ·差异蛋白的功能分类第37-41页
   ·鉴定的差异蛋白质的网络关系图第41-42页
   ·14-3-3ζ 2DE及Western-blot验证结果第42-43页
   ·RNAi结果第43-44页
     ·14-3-3ζ RNAi挑选结果第43-44页
     ·流式细胞术测转染效率第44页
   ·14-3-3ζ是ATO细胞毒性的主要作用靶标第44-49页
   ·ATO激活了U266细胞的应激蛋白而抑制泛素-蛋白酶体系统第49-51页
第五章 讨论与结论第51-54页
第六章 总结第54-56页
参考文献第56-62页
附录第62-64页
在学期间发表文章第64-65页
致谢第65页

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