摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第8-13页 |
·多发性骨髓瘤的研究现状 | 第8页 |
·三氧化二砷抗癌机理的研究进展 | 第8-9页 |
·蛋白质组学的研究进展 | 第9-13页 |
·蛋白质组学概述 | 第9页 |
·蛋白质组学研究技术 | 第9-11页 |
·差异蛋白质组学 | 第11-13页 |
第二章 技术路线 | 第13-14页 |
第三章 材料与方法 | 第14-33页 |
·主要材料 | 第14页 |
·细胞系 | 第14页 |
·质粒和菌种 | 第14页 |
·三氧化二砷 | 第14页 |
·14-3-3ζ siRNA | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-16页 |
·细胞培养 | 第14页 |
·双向电泳试剂 | 第14-15页 |
·质谱鉴定试剂 | 第15-16页 |
·Western-blot试剂 | 第16页 |
·其他试剂及材料 | 第16页 |
·生物信息学软件 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·试剂配制 | 第17-22页 |
·双向电泳试剂配制 | 第17-20页 |
·银染染色液 | 第20页 |
·蛋白质酶解及质谱溶液 | 第20-21页 |
·Western blot试剂配方 | 第21-22页 |
·蛋白酶体检测试剂 | 第22页 |
·细胞凋亡检测试剂 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-33页 |
·细胞培养 | 第22页 |
·细胞收集 | 第22-23页 |
·细胞总蛋白裂解和提取 | 第23页 |
·Bradford法蛋白浓度测定 | 第23-24页 |
·2DE步骤 | 第24-25页 |
·图像扫描与分析 | 第25-26页 |
·差异表达蛋白质酶解 | 第26页 |
·质谱鉴定 | 第26-27页 |
·差异表达蛋白质的功能分类和蛋白质相互作用网络图 | 第27页 |
·ATO处理前后U266细胞14-3-3ζ变化的Western Blot验证 | 第27-28页 |
·14-3-3ζ的RNA干扰 | 第28-30页 |
·14-3-3ζ在U266细胞中的过表达 | 第30-31页 |
·ATO对热激蛋白和泛素-蛋白酶体系统(UPS)的影响 | 第31-32页 |
·统计学处理 | 第32-33页 |
第四章 结果 | 第33-51页 |
·Bradford法测蛋白浓度 | 第33页 |
·ATO处理前后骨髓瘤细胞U266 2-DE结果 | 第33-36页 |
·差异蛋白质的质谱鉴定 | 第36-37页 |
·差异蛋白的功能分类 | 第37-41页 |
·鉴定的差异蛋白质的网络关系图 | 第41-42页 |
·14-3-3ζ 2DE及Western-blot验证结果 | 第42-43页 |
·RNAi结果 | 第43-44页 |
·14-3-3ζ RNAi挑选结果 | 第43-44页 |
·流式细胞术测转染效率 | 第44页 |
·14-3-3ζ是ATO细胞毒性的主要作用靶标 | 第44-49页 |
·ATO激活了U266细胞的应激蛋白而抑制泛素-蛋白酶体系统 | 第49-51页 |
第五章 讨论与结论 | 第51-54页 |
第六章 总结 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-64页 |
在学期间发表文章 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |