| 主要英文缩写 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 第一章 卵巢恶性肿瘤蛋白组学研究现况(文献综述) | 第16-76页 |
| 1.卵巢恶性肿瘤概述 | 第16-35页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的发病率和可能的致病因素 | 第17-19页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的发病率 | 第17-18页 |
| ·卵巢恶性肿瘤可能的致病因素 | 第18-19页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的诊断 | 第19-29页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的诊断模式: | 第19-27页 |
| ·影像学诊断 | 第19-20页 |
| ·肿瘤标记物检测 | 第20-26页 |
| ·肿瘤胚胎抗原性标志物 | 第20-21页 |
| ·糖类标志物 | 第21-23页 |
| ·激素类标志物 | 第23页 |
| ·酶和同工酶类标志物 | 第23-24页 |
| ·蛋白质类标志物 | 第24页 |
| ·癌基因产物类标志物 | 第24-26页 |
| ·细胞学检查 | 第26页 |
| ·腹腔镜检查 | 第26-27页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的鉴别诊断模式: | 第27页 |
| ·卵巢恶性肿瘤诊断与鉴别诊断模式存在的问题: | 第27-29页 |
| ·卵巢恶性肿瘤治疗的模式及存在的问题 | 第29-35页 |
| ·手术治疗 | 第29-31页 |
| ·全面确定分期探查手术 | 第29页 |
| ·再分期手术 | 第29-30页 |
| ·肿瘤细胞减灭术 | 第30页 |
| ·中间性或间隔性肿瘤细胞减灭 | 第30页 |
| ·二次探查手术 | 第30-31页 |
| ·二次肿瘤细胞减灭术 | 第31页 |
| ·化疗 | 第31-34页 |
| ·早期卵巢癌的化疗 | 第31-32页 |
| ·晚期卵巢癌的化疗 | 第32页 |
| ·复发卵巢癌的化疗 | 第32-33页 |
| ·腹腔化疗 | 第33页 |
| ·新辅助化疗 | 第33页 |
| ·超大剂量化疗和外周血干细胞移植 | 第33-34页 |
| ·卵巢恶性肿瘤基因治疗 | 第34页 |
| ·卵巢恶性肿瘤治疗存在的问题 | 第34-35页 |
| 2.蛋白组学的概念及主要研究方法 | 第35-54页 |
| ·蛋白组学的概念 | 第35-37页 |
| ·蛋白质组学的研究内容及主要的技术路线 | 第37-40页 |
| ·蛋白质组学的研究内容 | 第37-38页 |
| ·蛋白质鉴定 | 第37页 |
| ·翻译后修饰 | 第37页 |
| ·蛋白质功能确定 | 第37-38页 |
| ·蛋白质组学研究的技术路线 | 第38-40页 |
| ·蛋白组学的常用技术及原理 | 第40-54页 |
| ·2-DE技术 | 第40-42页 |
| ·MS技术 | 第42-44页 |
| ·微阵列技术 | 第44-47页 |
| ·生物信息学技术 | 第47-49页 |
| ·其它技术 | 第49-54页 |
| ·质谱显像技术 | 第49-50页 |
| ·多维液相色谱 | 第50-51页 |
| ·核素标签色谱 | 第51页 |
| ·蛋白质芯片技术 | 第51-52页 |
| ·化学喷墨印迹 | 第52-53页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第53-54页 |
| 3.蛋白组学在卵巢肿瘤研究中的应用 | 第54-61页 |
| ·在卵巢癌诊断标记物筛选和鉴定中的应用现况 | 第54-56页 |
| ·在卵巢癌治疗靶点筛选鉴定和药物开发中的应用现况 | 第56-57页 |
| ·在卵巢癌发病机理研究中的应用现况 | 第57-60页 |
| ·探讨信号传导通路机理 | 第58-59页 |
| ·探讨浸润转移机制 | 第59-60页 |
| ·探讨多药耐药机理 | 第60页 |
| ·蛋白质组学的现状和展望 | 第60-61页 |
| 4.CXCL1与卵巢肿瘤相关性研究 | 第61-67页 |
| ·CXCL1的发现、分子结构和主要的生物学功能 | 第62-65页 |
| ·CXCL1的发现 | 第62页 |
| ·CXCL1的分子结构 | 第62-63页 |
| ·CXCL1的生物学功能 | 第63-65页 |
| ·刺激细胞生长和迁移 | 第63-64页 |
| ·促进伤口愈合和促血管生成 | 第64页 |
| ·CXCL1与病毒感染 | 第64-65页 |
| ·CXCL1与恶性肿瘤的关糸研究现况 | 第65-66页 |
| ·CXCL1与卵巢恶性肿瘤的关系及分子机理 | 第66-67页 |
| 5.IL-8及亚型与卵巢肿瘤相关性研究 | 第67-76页 |
| ·IL-8的分子结构、各亚型间的区别和主要的生物学功能 | 第67-71页 |
| ·IL-8的分子结构 | 第67-68页 |
| ·IL-8各亚型间的区别 | 第68-70页 |
| ·IL-8主要的生物学功能 | 第70-71页 |
| ·抑制凋亡 | 第70页 |
| ·调节细胞外基质 | 第70页 |
| ·自分泌作用 | 第70-71页 |
| ·参与肿瘤血管形成 | 第71页 |
| ·调节基质金属蛋白酶 | 第71页 |
| ·IL-8及亚型与恶性肿瘤的关糸研究现况 | 第71-72页 |
| ·IL-8及亚型与卵巢恶性肿瘤的关糸及分子机理 | 第72-76页 |
| 第二章 CXCL1和不同亚型IL-8的原核表达 | 第76-121页 |
| 1.前言 | 第76页 |
| 2.材料与方法 | 第76-106页 |
| ·材料 | 第76-83页 |
| ·标本 | 第76页 |
| ·质粒与菌株 | 第76-78页 |
| ·主要试剂及配制 | 第78-82页 |
| ·试剂 | 第78-79页 |
| ·试剂的配制方法 | 第79-82页 |
| ·仪器 | 第82页 |
| ·器具处理 | 第82-83页 |
| ·引物设计与合成 | 第83-85页 |
| ·实验方法 | 第85-106页 |
| ·卵巢癌组织总RNA提取 | 第85-87页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第87-89页 |
| ·基因全长的扩增 | 第89-90页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第90-91页 |
| ·连接反应 | 第91-92页 |
| ·转化Mach1~(TM)-T1~R感受态细胞 | 第92-93页 |
| ·挑取阳性克隆 | 第93页 |
| ·质粒DNA的快速提取 | 第93-94页 |
| ·转化子鉴定 | 第94-95页 |
| ·菌液的长期保存 | 第95页 |
| ·表达重组子 | 第95-98页 |
| ·转化BL21(DE3)One Shot(?)感受态细胞 | 第95页 |
| ·IPTG诱导蛋白表达 | 第95-97页 |
| ·SDS-PAGE分析表达产物 | 第97-98页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第98-100页 |
| ·扩大蛋白表达量 | 第98页 |
| ·融合蛋白提取 | 第98-99页 |
| ·镍螯合柱亲和层析法纯化表达菌中的融合蛋白 | 第99-100页 |
| ·SDS-PAGE检测纯化效果 | 第100页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定融合蛋白 | 第100-103页 |
| ·SUMO酶切融合蛋白 | 第103-104页 |
| ·除盐 | 第103页 |
| ·Lowry法(微孔板法)测蛋白浓度: | 第103-104页 |
| ·SUMO酶解 | 第104页 |
| ·纯化酶解后蛋白 | 第104页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定酶解后CXCL1和不同亚型IL-8成熟蛋白 | 第104-106页 |
| 3.结果 | 第106-119页 |
| ·卵巢癌组织总RNA1%琼脂糖凝胶电泳结果 | 第106页 |
| ·cDNA质量检测 | 第106-107页 |
| ·目的基因扩增结果 | 第107页 |
| ·PCR鉴定连接产物 | 第107-108页 |
| ·重组子测序结果 | 第108-112页 |
| ·SDS-PAGE鉴定融合蛋白表达纯化 | 第112页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定融合蛋白 | 第112-117页 |
| ·Lowry法测定蛋白浓度 | 第117页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定原核表达终产物的获得 | 第117-119页 |
| 4.讨论 | 第119-121页 |
| 第三章 激光显微捕获联合免疫磁珠的技术在质谱检测中的应用及CXCL1和不同亚型IL-8蛋白在恶性卵巢肿瘤组织中的表达研究 | 第121-156页 |
| 1.前言 | 第121-122页 |
| 2.材料与方法 | 第122-133页 |
| ·材料 | 第122-126页 |
| ·主要试剂及配制 | 第122-123页 |
| ·试剂 | 第122-123页 |
| ·试剂的配制方法 | 第123页 |
| ·仪器 | 第123-124页 |
| ·器具 | 第124页 |
| ·器具处理 | 第124页 |
| ·组织标本 | 第124-126页 |
| ·方法 | 第126-133页 |
| ·冰冻组织切片 | 第126页 |
| ·TBO染色 | 第126-127页 |
| ·激光显微捕获 | 第127-128页 |
| ·裂解LCM捕获细胞 | 第128页 |
| ·免疫磁珠与LCM捕获细胞蛋白裂解液结合 | 第128-131页 |
| ·微量层析柱的应用 | 第131页 |
| ·MALDI-TOF-MS建立检测用标准曲线及样品检测 | 第131-133页 |
| 3.结果 | 第133-151页 |
| ·激光显微捕获卵巢上皮细胞 | 第133-134页 |
| ·CXCL1、不同亚型IL-8蛋白的标准曲线建立 | 第134-141页 |
| ·CXCL1、不同亚型IL-8蛋白的表达研究 | 第141-151页 |
| ·CXCL1的表达 | 第141-146页 |
| ·质谱检测免疫磁珠结合样品中的CXCL1 | 第141-145页 |
| ·CXCL1在卵巢恶性肿瘤中的表达分析 | 第145-146页 |
| ·不同亚型IL-8的表达 | 第146-151页 |
| ·质谱检测免疫磁珠结合样品中的不同亚型的IL-8 | 第146-149页 |
| ·不同亚型IL-8在卵巢恶性肿瘤中的表达分析 | 第149-151页 |
| 4.讨论 | 第151-156页 |
| ·建立质谱联合激光显微捕获和免疫磁珠检测CXCL1及不同亚型IL-8(1-77aa)、IL-8(6-77aa)和IL-8(9-77aa)在卵巢恶性肿瘤上皮细胞中表达的技术方法 | 第151-152页 |
| ·CXCL1蛋白在卵巢恶性肿瘤组织中的表达研究 | 第152-153页 |
| ·不同亚型IL-8(1-77aa)、IL-8(6-77aa)和IL-8(9-77aa)在卵巢恶性肿瘤组织中的表达研究 | 第153-156页 |
| 全文小节 | 第156-157页 |
| 参考文献 | 第157-174页 |
| 致谢 | 第174页 |
