中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-15页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
1 绪论 | 第16-30页 |
·花青素的功能 | 第16-17页 |
·花青素在植物中的生理功能 | 第16页 |
·花青素对人体健康的功效 | 第16-17页 |
·花青素的生物合成途径 | 第17页 |
·花青素生物合成的结构基因 | 第17-20页 |
·苯丙氨酸裂解酶(PAL) | 第17页 |
·查尔酮合成酶(CHS) | 第17-19页 |
·黄烷酮-3-羟化酶(F3H) | 第19页 |
·二氢黄酮醇还原酶(DFR) | 第19-20页 |
·花青素合成酶(ANS) | 第20页 |
·类黄酮-葡萄糖基转移酶(UFGT) | 第20页 |
·花青素合成的调节因子 | 第20-24页 |
·MYB 类转录因子 | 第22-23页 |
·bHLH 类转录因子 | 第23页 |
·WD40 类转录因子 | 第23-24页 |
·环境因子对植物中花青素合成的影响 | 第24-25页 |
·光对花青素生物合成的影响 | 第24-25页 |
·温度对花青素生物合成的影响 | 第25页 |
·其它因素对花青素生物合成的影响 | 第25页 |
·植物中的花青素天然突变体 | 第25-26页 |
·研究的目的与意义 | 第26-27页 |
·本文研究的主要内容 | 第27-28页 |
·本文研究的技术路线 | 第28-30页 |
2 芸薹属植物调控花青素合成途径关键转录因子的克隆 | 第30-50页 |
·材料 | 第30-31页 |
·植物材料 | 第30页 |
·质粒载体与菌株 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第30-31页 |
·各种试剂及缓冲液的配方 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-36页 |
·RNA 的提取及cDNA 一链的合成 | 第31-32页 |
·目的基因的扩增、纯化回收和连接 | 第32-34页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备—CaC1_2 法 | 第34-35页 |
·PCR 产物的转化及阳性转化子的鉴定 | 第35页 |
·质粒DNA 的提取 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-48页 |
·CRY1 全长cDNA 的克隆和分析 | 第36-38页 |
·COP1 全长cDNA 的克隆和分析 | 第38-40页 |
·HY5 全长cDNA 的克隆和分析 | 第40-41页 |
·PAP1 全长cDNA 的克隆和分析 | 第41-44页 |
·PAP2 全长cDNA 的克隆和分析 | 第44-45页 |
·MYB114 全长 cDNA 的克隆和分析 | 第45-48页 |
·小结 | 第48-50页 |
3 羽衣甘蓝花青素合成代谢调控机制的研究 | 第50-64页 |
·材料 | 第50-51页 |
·植物材料 | 第50页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第50页 |
·主要仪器设备 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-54页 |
·花青素含量的测定 | 第51页 |
·RNA 的提取 | 第51页 |
·总RNA 中基因组DNA 的酶解 | 第51-52页 |
·半定量RT-PCR 分析 | 第52-53页 |
·定量PCR 分析 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-61页 |
·基因型对羽衣甘蓝花青素合成的影响 | 第54-55页 |
·花青素含量的测定 | 第55-56页 |
·半定量RT-PCR 分析羽衣甘蓝红鸽和白鸽中花青素生物合成结构基因的表达 | 第56-57页 |
·定量PCR 分析羽衣甘蓝红鸽和白鸽中花青素生物合成结构基因和转录因子的表达 | 第57-58页 |
·温度对羽衣甘蓝红鸽中花青素合成的影响 | 第58-59页 |
·定量PCR 分析低温对羽衣甘蓝中花青素合成结构基因和转录因子表达的影响 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
·羽衣甘蓝红鸽和羽衣甘蓝白鸽表型差异的研究 | 第61-62页 |
·低温对羽衣甘蓝红鸽中花青素合成的诱导作用 | 第62页 |
·小结 | 第62-64页 |
4 紫甘蓝花青素合成代谢调控机制的研究 | 第64-74页 |
·材料 | 第64页 |
·植物材料 | 第64页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第64页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
·实验方法 | 第64-65页 |
·花青素含量的测定 | 第64页 |
·RNA 的提取、cDNA 第一链的合成 | 第64页 |
·半定量RT-PCR 分析 | 第64-65页 |
·定量PCR 分析 | 第65页 |
·结果与分析 | 第65-70页 |
·光对紫甘蓝和青甘蓝幼苗形态及花青素积累的影响 | 第65-66页 |
·花青素含量的测定 | 第66-67页 |
·半定量RT-PCR 分析紫甘蓝和青甘蓝中花青素合成结构基因的表达 | 第67-68页 |
·定量PCR 检测紫甘蓝和青甘蓝花青素生物合成结构基因的表达 | 第68-69页 |
·定量PCR 检测紫甘蓝和青甘蓝花青素合成相关转录因子的表达 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
·小结 | 第72-74页 |
5 红菜薹花青素合成代谢调控机制的研究 | 第74-84页 |
·材料 | 第74页 |
·植物材料 | 第74页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第74页 |
·主要仪器设备 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-76页 |
·花青素含量的测定 | 第74页 |
·RNA 的提取、cDNA 第一链的合成 | 第74-75页 |
·半定量RT-PCR 分析 | 第75页 |
·定量PCR 分析 | 第75-76页 |
·结果与分析 | 第76-82页 |
·光对红菜薹和小白菜幼苗形态及花青素积累的影响 | 第76-77页 |
·半定量RT-PCR 分析红菜薹和小白菜花青素合成结构基因的表达 | 第77-78页 |
·定量PCR 检测光照对红菜薹和小白菜花青素生物合成结构基因和转录因子表达的影响 | 第78-80页 |
·定量PCR 检测红菜薹和小白菜茎表皮和茎肉中花青素生物合成结构基因和转录因子的表达 | 第80-82页 |
·讨论 | 第82-83页 |
·小结 | 第83-84页 |
6 红菜薹 BrMYB1p 基因的克隆和功能研究 | 第84-96页 |
·材料 | 第84-86页 |
·植物材料 | 第84页 |
·质粒载体与菌株 | 第84页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第84页 |
·主要仪器设备 | 第84页 |
·各种试剂的配方 | 第84-86页 |
·实验方法 | 第86-89页 |
·红菜薹和小白菜中MYB1 基因全长cDNA 的克隆 | 第86页 |
·MYB1 基因在红菜薹和小白菜中的表达模式分析 | 第86页 |
·红菜薹BrMYB1p 沉默载体构建 | 第86-87页 |
·红菜薹BrMYB1p 沉默载体转化农杆菌LBA4404 | 第87页 |
·农杆菌介导的红菜薹转化 | 第87-88页 |
·再生植株的PCR 鉴定 | 第88-89页 |
·结果与分析 | 第89-94页 |
·红菜薹和小白菜MYB1 基因全长cDNA 的克隆和分析 | 第89-90页 |
·定量PCR 分析红菜薹和小白菜中MYB1 基因的表达情况 | 第90-91页 |
·红菜薹BrMYB1pi 沉默片段的克隆 | 第91页 |
·红菜薹BrMYB1p 基因RNAi 载体的构建 | 第91-92页 |
·抗性再生植株的获得 | 第92-93页 |
·再生苗的PCR 鉴定 | 第93页 |
·转化植株性状的初步调查 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-96页 |
7 结论 | 第96-100页 |
·主要结论 | 第96-98页 |
·后续工作及展望 | 第98-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-110页 |
附录 | 第110页 |
作者在攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第110页 |