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芸薹属植物花青素生物合成代谢途径调控机制的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-15页
缩略词表第15-16页
1 绪论第16-30页
   ·花青素的功能第16-17页
     ·花青素在植物中的生理功能第16页
     ·花青素对人体健康的功效第16-17页
   ·花青素的生物合成途径第17页
   ·花青素生物合成的结构基因第17-20页
     ·苯丙氨酸裂解酶(PAL)第17页
     ·查尔酮合成酶(CHS)第17-19页
     ·黄烷酮-3-羟化酶(F3H)第19页
     ·二氢黄酮醇还原酶(DFR)第19-20页
     ·花青素合成酶(ANS)第20页
     ·类黄酮-葡萄糖基转移酶(UFGT)第20页
   ·花青素合成的调节因子第20-24页
     ·MYB 类转录因子第22-23页
     ·bHLH 类转录因子第23页
     ·WD40 类转录因子第23-24页
   ·环境因子对植物中花青素合成的影响第24-25页
     ·光对花青素生物合成的影响第24-25页
     ·温度对花青素生物合成的影响第25页
     ·其它因素对花青素生物合成的影响第25页
   ·植物中的花青素天然突变体第25-26页
   ·研究的目的与意义第26-27页
   ·本文研究的主要内容第27-28页
   ·本文研究的技术路线第28-30页
2 芸薹属植物调控花青素合成途径关键转录因子的克隆第30-50页
   ·材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·质粒载体与菌株第30页
     ·主要仪器设备第30页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第30-31页
     ·各种试剂及缓冲液的配方第31页
   ·实验方法第31-36页
     ·RNA 的提取及cDNA 一链的合成第31-32页
     ·目的基因的扩增、纯化回收和连接第32-34页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备—CaC1_2 法第34-35页
     ·PCR 产物的转化及阳性转化子的鉴定第35页
     ·质粒DNA 的提取第35-36页
   ·结果与分析第36-48页
     ·CRY1 全长cDNA 的克隆和分析第36-38页
     ·COP1 全长cDNA 的克隆和分析第38-40页
     ·HY5 全长cDNA 的克隆和分析第40-41页
     ·PAP1 全长cDNA 的克隆和分析第41-44页
     ·PAP2 全长cDNA 的克隆和分析第44-45页
     ·MYB114 全长 cDNA 的克隆和分析第45-48页
   ·小结第48-50页
3 羽衣甘蓝花青素合成代谢调控机制的研究第50-64页
   ·材料第50-51页
     ·植物材料第50页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第50页
     ·主要仪器设备第50-51页
   ·实验方法第51-54页
     ·花青素含量的测定第51页
     ·RNA 的提取第51页
     ·总RNA 中基因组DNA 的酶解第51-52页
     ·半定量RT-PCR 分析第52-53页
     ·定量PCR 分析第53-54页
   ·结果与分析第54-61页
     ·基因型对羽衣甘蓝花青素合成的影响第54-55页
     ·花青素含量的测定第55-56页
     ·半定量RT-PCR 分析羽衣甘蓝红鸽和白鸽中花青素生物合成结构基因的表达第56-57页
     ·定量PCR 分析羽衣甘蓝红鸽和白鸽中花青素生物合成结构基因和转录因子的表达第57-58页
     ·温度对羽衣甘蓝红鸽中花青素合成的影响第58-59页
     ·定量PCR 分析低温对羽衣甘蓝中花青素合成结构基因和转录因子表达的影响第59-61页
   ·讨论第61-62页
     ·羽衣甘蓝红鸽和羽衣甘蓝白鸽表型差异的研究第61-62页
     ·低温对羽衣甘蓝红鸽中花青素合成的诱导作用第62页
   ·小结第62-64页
4 紫甘蓝花青素合成代谢调控机制的研究第64-74页
   ·材料第64页
     ·植物材料第64页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第64页
     ·主要仪器设备第64页
   ·实验方法第64-65页
     ·花青素含量的测定第64页
     ·RNA 的提取、cDNA 第一链的合成第64页
     ·半定量RT-PCR 分析第64-65页
     ·定量PCR 分析第65页
   ·结果与分析第65-70页
     ·光对紫甘蓝和青甘蓝幼苗形态及花青素积累的影响第65-66页
     ·花青素含量的测定第66-67页
     ·半定量RT-PCR 分析紫甘蓝和青甘蓝中花青素合成结构基因的表达第67-68页
     ·定量PCR 检测紫甘蓝和青甘蓝花青素生物合成结构基因的表达第68-69页
     ·定量PCR 检测紫甘蓝和青甘蓝花青素合成相关转录因子的表达第69-70页
   ·讨论第70-72页
   ·小结第72-74页
5 红菜薹花青素合成代谢调控机制的研究第74-84页
   ·材料第74页
     ·植物材料第74页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第74页
     ·主要仪器设备第74页
   ·实验方法第74-76页
     ·花青素含量的测定第74页
     ·RNA 的提取、cDNA 第一链的合成第74-75页
     ·半定量RT-PCR 分析第75页
     ·定量PCR 分析第75-76页
   ·结果与分析第76-82页
     ·光对红菜薹和小白菜幼苗形态及花青素积累的影响第76-77页
     ·半定量RT-PCR 分析红菜薹和小白菜花青素合成结构基因的表达第77-78页
     ·定量PCR 检测光照对红菜薹和小白菜花青素生物合成结构基因和转录因子表达的影响第78-80页
     ·定量PCR 检测红菜薹和小白菜茎表皮和茎肉中花青素生物合成结构基因和转录因子的表达第80-82页
   ·讨论第82-83页
   ·小结第83-84页
6 红菜薹 BrMYB1p 基因的克隆和功能研究第84-96页
   ·材料第84-86页
     ·植物材料第84页
     ·质粒载体与菌株第84页
     ·主要分子生物学试剂和试剂盒第84页
     ·主要仪器设备第84页
     ·各种试剂的配方第84-86页
   ·实验方法第86-89页
     ·红菜薹和小白菜中MYB1 基因全长cDNA 的克隆第86页
     ·MYB1 基因在红菜薹和小白菜中的表达模式分析第86页
     ·红菜薹BrMYB1p 沉默载体构建第86-87页
     ·红菜薹BrMYB1p 沉默载体转化农杆菌LBA4404第87页
     ·农杆菌介导的红菜薹转化第87-88页
     ·再生植株的PCR 鉴定第88-89页
   ·结果与分析第89-94页
     ·红菜薹和小白菜MYB1 基因全长cDNA 的克隆和分析第89-90页
     ·定量PCR 分析红菜薹和小白菜中MYB1 基因的表达情况第90-91页
     ·红菜薹BrMYB1pi 沉默片段的克隆第91页
     ·红菜薹BrMYB1p 基因RNAi 载体的构建第91-92页
     ·抗性再生植株的获得第92-93页
     ·再生苗的PCR 鉴定第93页
     ·转化植株性状的初步调查第93-94页
   ·小结第94-96页
7 结论第96-100页
   ·主要结论第96-98页
   ·后续工作及展望第98-100页
致谢第100-102页
参考文献第102-110页
附录第110页
 作者在攻读博士学位期间发表的论文目录第110页

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