| 提要 | 第1-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-11页 |
| 第2章 文献综述 | 第11-40页 |
| ·组织工程学的研究进展 | 第11页 |
| ·支架材料 | 第11-16页 |
| ·种子细胞 | 第16-20页 |
| ·细胞因子 | 第20-24页 |
| ·组织工程骨的血管化 | 第24-28页 |
| ·骨组织工程的发展前景及所面对的问题 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-40页 |
| 第3章 实验部分 | 第40-104页 |
| 第1节 大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及体外分化的研究 | 第40-54页 |
| 前言 | 第40页 |
| 1 材料和方法 | 第40-44页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| 2 实验结果 | 第44-48页 |
| ·BMSCs 分离、纯化及形态学特征 | 第44-45页 |
| ·BMSCs 的细胞周期特征 | 第45页 |
| ·BMSCs 的生长曲线 | 第45-47页 |
| ·表面标志CD34、CD44 的表达 | 第47页 |
| ·碱性磷酸酶活性测定 | 第47页 |
| ·向脂肪细胞诱导分化 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第2节 BMP-2、VEGF 及其双基因质粒的构建及鉴定 | 第54-74页 |
| 前言 | 第54页 |
| 1 材料和方法 | 第54-60页 |
| ·材料 | 第54-56页 |
| ·方法 | 第56-60页 |
| 2 结果 | 第60-69页 |
| ·RT-PCR 分别扩增VEGF、BMP2 | 第60-61页 |
| ·PCR 产物TA 克隆 | 第61-66页 |
| ·VEGF 克隆入真核表达载体pEGFP-N1 | 第66-67页 |
| ·BMP2 分别克隆入真核表达载体pEGFP-N1、pEGFP-N1/ VEGF | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第3节 重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞及其表达的检测 | 第74-93页 |
| 前言 | 第74页 |
| 1 材料和方法 | 第74-75页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| 2 实验方法 | 第75-78页 |
| ·质粒的制备 | 第75页 |
| ·BMSCs 的培养 | 第75页 |
| ·细胞的转染 | 第75-76页 |
| ·大鼠BMSCs 质粒转染后的观察 | 第76页 |
| ·MTT 法测定转染对细胞增殖情况的影响 | 第76页 |
| ·ELISA 方法检测 | 第76-77页 |
| ·RT-PCR 检测转染细胞的BMP-2、VEGF m RNA 表达水平 | 第77页 |
| ·免疫组织化学染色分析BMP-2、VEGF 表达情况 | 第77-78页 |
| ·I 型胶原、骨钙素、ALP 免疫组织化学染色 | 第78页 |
| 3 结果 | 第78-87页 |
| ·转染细胞镜下观察 | 第78-79页 |
| ·荧光显微镜下观察 | 第79-80页 |
| ·转染细胞的MTT 实验 | 第80-81页 |
| ·ELISA 方法检测BMP-2、VEGF | 第81-82页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第82-83页 |
| ·BMP-2 免疫组化染色结果 | 第83-84页 |
| ·VEGF 免疫组织化学染色结果 | 第84-85页 |
| ·ALP 免疫组化染色结果 | 第85页 |
| ·I 型胶原免疫组化染色结果 | 第85-86页 |
| ·骨钙素免疫组化染色结果 | 第86-87页 |
| 4 讨论 | 第87-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 第4节 体外构建组织工程骨 | 第93-104页 |
| 前言 | 第93页 |
| 1 材料 | 第93页 |
| ·细胞和支架准备 | 第93页 |
| ·主要试剂、仪器设备 | 第93页 |
| 2 方法 | 第93-94页 |
| ·细胞准备 | 第93-94页 |
| 3 支架材料的准备 | 第94-95页 |
| ·nano-HA/PLGA 的预湿 | 第94页 |
| ·nano-HA/PLGA 支架材料上接种细胞 | 第94-95页 |
| 4 结果 | 第95-98页 |
| ·黏附细胞计数 | 第95页 |
| ·细胞形态学观察 | 第95-96页 |
| ·扫描电镜观察支架材料上粘附细胞的情况 | 第96-98页 |
| 5 讨论 | 第98-102页 |
| 参考文献 | 第102-104页 |
| 第4章 结论 | 第104页 |
| 创新点 | 第104-105页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 中文摘要 | 第107-110页 |
| ABSTRACT | 第110-112页 |
