摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 前言 | 第8-21页 |
第一节 蛋白质的磷酸化修饰与酶 | 第8-10页 |
一、蛋白质的磷酸化 | 第8页 |
二、蛋白激酶与磷酸酶 | 第8-10页 |
第二节 蛋白磷酸酶2A | 第10-21页 |
一、蛋白磷酸酶2A——PP2A概述 | 第10页 |
二、PP2A的结构 | 第10-14页 |
三、Striatin家族 | 第14-16页 |
四、Striatin家族的表达定位 | 第16页 |
五、Striatin家族功能与发育 | 第16-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-41页 |
第一节 试剂与仪器 | 第21-23页 |
一、常用试剂及配制方法 | 第21-22页 |
二、购买试剂与实验服务 | 第22页 |
三、仪器 | 第22-23页 |
第二节 实验材料准备 | 第23-26页 |
一、金鱼的购买、饲养及人工受精 | 第23-24页 |
二、金鱼胚胎材料的准备 | 第24-25页 |
三、金鱼组织材料的准备 | 第25页 |
四、金鱼与小鼠眼睛各组织的准备 | 第25-26页 |
第三节 方法 | 第26-41页 |
一、RNA提取 | 第26页 |
二、引物设计 | 第26-28页 |
三、RT-PCR | 第28页 |
四、RACE cDNA克隆 | 第28-32页 |
五、蛋白质提取与定量 | 第32-34页 |
六、Western Blot | 第34-35页 |
七、Striatin金鱼全长cDNA的获得和表达质粒的构建 | 第35-38页 |
八、人SG2NA基因shRNA干扰载体的构建 | 第38-41页 |
第三章 结果与讨论 | 第41-69页 |
第一节 结果 | 第41-63页 |
一、SG2NA的cDNA克隆 | 第41-46页 |
二、Striatin的cDNA克隆 | 第46-49页 |
三、SG2NA在金鱼成体各组织mRNA水平的表达 | 第49-50页 |
四、SG2NA在金鱼成体各组织蛋白质水平的表达 | 第50-51页 |
五、SG2NA在金鱼胚胎各发育时期mRNA水平的表达 | 第51-52页 |
六、SG2NA在金鱼胚胎各发育时期蛋白质水平的表达 | 第52-54页 |
七、SG2NA在金鱼和小鼠眼睛各组织mRNA水平的表达 | 第54-55页 |
八、SG2NA在金鱼和小鼠眼睛各组织蛋白质水平的表达 | 第55-56页 |
九、金鱼Striatin基因pEGFP-C3载体的构建结果 | 第56-59页 |
十、Striatin和SG2NA基因在培养细胞系中的表达 | 第59-60页 |
十一、人SG2NA基因shRNA干扰载体的构建结果 | 第60-63页 |
第二节 讨论 | 第63-69页 |
参考文献 | 第69-78页 |
致谢 | 第78-79页 |