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甘蓝型油菜EMS突变体库的构建及TILLING、EcoTILLING技术的应用研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词表第12-13页
1 前言第13-30页
   ·植物突变体库研究进展第13-19页
     ·突变体与植物突变体库第13-14页
     ·植物突变体库构建方法概述第14-18页
     ·油菜基因组特点与突变体库的构建第18-19页
   ·TILLING,EcoTILLING技术基本原理与应用第19-25页
     ·反向遗传学 TILLING技术原理第19-21页
     ·TILLING技术的应用第21-22页
     ·EcoTILLING技术原理及其应用第22-23页
     ·TILLING,EcoTILLING技术的评估和应用前景第23-25页
   ·芸苔属芥酸及其合成途径中关键基因FAE1研究进展第25-28页
     ·芥酸合成的生化途径第25-26页
     ·控制芥酸合成的关键基因FAE1的克隆及其表达模式第26-28页
     ·芸苔属高低芥酸品种的选育第28页
   ·本研究问题的提出及其研究目的和意义第28-30页
2 甘蓝型油菜 EMS突变体库的构建及对其正向遗传学的评估第30-41页
   ·材料与方法第30-33页
     ·实验材料及试剂第30页
     ·不同浓度 EMS诱变剂诱变种子第30-31页
     ·种子的诱变第31页
     ·突变体库的繁育和 DNA的抽提及编号第31-32页
     ·突变体库 M2代田间表型的调查第32页
     ·部分 M3代种子含油量的测定及数据分析第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·不同浓度 EMS诱变宁油7号种子的差异第33页
     ·突变体库的构建第33-34页
     ·突变群体中种子含油量的变异第34-35页
     ·两种不同浓度 EMS诱变群体 M2代表型调的查比较第35-37页
   ·讨论第37-41页
     ·甘蓝型油菜突变体库构建和其应用价值第37-38页
     ·EMS诱变浓度与突变体库的构建第38-39页
     ·表型评估突变体库的不足第39-41页
3 甘蓝型油菜 TILLING技术平台构建及反向遗传学技术评估突变体库第41-74页
   ·材料与方法第41-50页
     ·FAE1基因引物的设计第41-43页
     ·BAC文库的筛选及BAC克隆的分析第43-46页
     ·FAE1基因定位及芥酸 QTL检测第46页
     ·CEL.1酶的抽提第46-48页
     ·甘蓝型油菜 TILLING技术体系的建立及 FAE1突变体筛选第48-49页
     ·FAE1突变单株基因型分析和芥酸含量测定第49页
     ·利用数据库中FAE1序列分析自然 SNP位点第49-50页
     ·相关数据分析第50页
   ·结果与分析第50-67页
     ·甘蓝型油菜 FAE1拷贝数分析第50-56页
     ·FAE1定位及其甘蓝型油菜芥酸 QTL分析第56页
     ·甘蓝型油菜 TILLING技术体系的建立第56-59页
     ·FAE1突变体的筛选及其验证第59-62页
     ·FAE1突变体表型鉴定及其遗传分析第62-65页
     ·EMS突变体库的反向遗传学的评估第65-66页
     ·FAE1人工诱变产生的变异和自然变异比较分析第66-67页
   ·讨论第67-74页
     ·多倍体植物中TILLING技术的应用第67-68页
     ·甘蓝型油菜 TILLING技术体系建立第68-70页
     ·EMS诱变浓度与突变体库突变密度第70页
     ·甘蓝型油菜低芥酸种质资源的筛选第70-71页
     ·利用公共数据库中数据人工筛选 SNP可行性和缺点第71-72页
     ·一种全新基因功能验证思路:从关键性状的 QTL定位到 TILLING技术筛选突变体进行功能验证第72-74页
4 应用 ECOTILLING技术分析芸苔属3个种的FAE1基因多态性及其与种子中芥酸含量的关联性第74-93页
   ·材料与方法第74-79页
     ·品种的种植和 DNA样品获得及各品种种子中芥酸含量测定第74-76页
     ·引物设计第76页
     ·EcoTILLING分析甘蓝型油菜 FAE1多态性及其验证第76-78页
     ·单倍型和进化树的构建第78页
     ·数据分析第78-79页
   ·结果与分析第79-88页
     ·不同品种种子中芥酸含量分析第79-82页
     ·芸苔属3个种种内和种间FAE1基因多态性分析第82-84页
     ·高低芥酸与其基因型关联分析第84-86页
     ·芸苔属 A、C基因组间进化分析第86-88页
   ·讨论第88-93页
     ·EcoTILLING在植物基因组研究中的应用第88-90页
     ·芸苔属白菜、甘蓝和甘蓝型油菜自然群体中低芥酸种质资源第90-91页
     ·芸苔属 A、C基因组进化第91-93页
5 研究结论与展望第93-95页
   ·研究结论第93-94页
   ·研究展望第94-95页
参考文献第95-106页
附录1第106-108页
附录2第108-111页
致谢第111-112页
作者简介第112页
在读期间已发表或待发表SCI论文第112页

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