| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-7页 |
| 第一章 材料与方法 | 第7-15页 |
| ·实验材料 | 第7-8页 |
| ·细胞系及其培养所学的主要试剂 | 第7页 |
| ·实验中的主要化学药品与试剂 | 第7-8页 |
| ·实验中的主要仪器 | 第8页 |
| ·实验方法 | 第8-15页 |
| ·化疗药物的配置 | 第8-9页 |
| ·细胞培养 | 第9页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第9页 |
| ·耐药细胞系的诱导 | 第9-10页 |
| ·倒置显微镜下细胞形态 | 第10页 |
| ·细胞生长曲线的测定 | 第10页 |
| ·细胞周期分布的测定 | 第10页 |
| ·药敏实验 | 第10-11页 |
| ·实时荧光定量PCR法检测U一205、UZ一05/R,、UZ一05/RZ、UZ一05 /R3细胞株中RFC、DHFR、GST一二基因mRNA的表达 | 第11-15页 |
| ·统计学处理 | 第15页 |
| 第二章 结果 | 第15-23页 |
| ·人骨肉瘤耐MTX细胞系U2-OS/(R_1-R_3)的建立 | 第15页 |
| ·细胞形态的观察 | 第15-17页 |
| ·人骨肉瘤耐MTX细胞株U2-OS/(R_1-R_3)多药耐药表型分析 | 第17页 |
| ·生长曲线 | 第17-19页 |
| ·细胞周期分析 | 第19页 |
| ·目的基因RFC、DHFR、GST-π的mRNA的表达 | 第19-23页 |
| 第三章 讨论 | 第23-32页 |
| ·骨肉瘤的化疗 | 第23-25页 |
| ·MTX的药理作用 | 第25-26页 |
| ·MTX耐药机制 | 第26-27页 |
| ·还原叶酸载体 | 第27-28页 |
| ·二氢叶酸还原酶 | 第28-29页 |
| ·谷胱苷肽巯基转移酶 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 附图 | 第33-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 综述 | 第41-58页 |
| 综述参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
