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猪肠道硬壁菌门和拟杆菌门数量的检测及其相对丰度与脂肪沉积的相关性研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-18页
本文缩略语表第18-19页
引言第19-20页
第一部分 文献综述第20-35页
 1 主要的肠道细菌第20-22页
   ·肠道硬壁菌门第21-22页
   ·肠道拟杆菌门第22页
 2 检测肠道细菌丰度的方法第22-25页
   ·对16S rRNA基因文库中的序列计数第23-24页
   ·16S rRNA寡聚核苷酸探针原位杂交法第24页
   ·定量PCR检测细菌群体的16S rRNA基因丰度第24-25页
   ·其它方法第25页
 3 肠道细菌影响脂肪沉积第25-30页
   ·肠道硬壁菌门和拟杆菌门对脂肪沉积的贡献第25-26页
   ·细菌影响脂质代谢的机制第26-30页
 4 脂肪沉积影响肠道菌群第30-34页
   ·不同基因型动物的脂肪沉积与肠道微生物第30-32页
   ·不同生长阶段动物的脂肪沉积与肠道微生物第32页
   ·采食不同日粮的动物的脂肪沉积与肠道微生物第32-34页
 5 存在问题第34-35页
第二部分 研究目的、意义、内容及路线第35-36页
 1 研究目的及意义第35页
 2 研究内容第35页
 3 研究路线第35-36页
第三部分 试验研究第36-113页
 试验一 建立定量PCR检测肠道硬壁菌门和拟杆菌门16S rRNA基因的方法第36-59页
  1 前言第36页
  2 材料与方法第36-46页
   ·材料第36-38页
   ·方法第38-46页
     ·菌株的培养及DNA提取第38页
     ·寻找拟杆菌门和硬壁菌门的特异位点第38页
     ·设计拟杆菌门和硬壁菌门引物第38-42页
     ·引物的特异性检验第42-44页
     ·质粒标准的制备和标准曲线第44-46页
  3 结果与分析第46-57页
   ·拟杆菌门和硬壁菌门的特异位点及引物第46-47页
   ·菌株的DNA提取第47-48页
   ·引物的特异性检验第48-50页
   ·质粒标准的测序结果第50-54页
   ·标准曲线第54-57页
  4 讨论第57-58页
  5 小结第58-59页
 试验二 肥胖和瘦的版纳微型近交系猪肠道硬壁菌门、拟杆菌门及拟杆菌属的差异 #41.第59-73页
  1 前言第59页
  2 材料与方法第59-62页
   ·材料第59-60页
   ·方法第60-62页
     ·粪便DNA的提取第60页
     ·实时荧光定量PCR检测第60-62页
     ·数据处理和统计分析第62页
  3 结果与分析第62-70页
   ·粪便DNA的提取第62页
   ·标准曲线第62-66页
   ·胖猪和瘦猪各类细菌拷贝数第66-68页
   ·胖猪和瘦猪各类细菌的比例第68-70页
  4 讨论第70-72页
  5 小结第72-73页
 试验三 梅山和长白猪肠道硬壁菌门、拟杆菌门和拟杆菌属丰度与脂肪沉积的相关关系第73-84页
  1 前言第73页
  2 材料与方法第73-77页
   ·材料第73-75页
   ·方法第75-77页
     ·饲养管理第75页
     ·屠宰取样第75页
     ·胴体指标的测定第75页
     ·肉质指标的测定第75-76页
     ·脂肪细胞直径和面积测量第76-77页
     ·盲肠内容物DNA的提取第77页
     ·盲肠内容物中各类细菌拷贝数的检测第77页
     ·数据处理和统计分析第77页
  3 结果与分析第77-81页
   ·胴体指标及脂肪细胞大小第77-78页
   ·肉质指标第78页
   ·盲肠内容物DNA的提取第78页
   ·梅山和长白猪各类细菌拷贝数第78-80页
   ·梅山和长白猪各类细菌的比例第80-81页
  4 讨论第81-83页
  5 小结第83-84页
 试验四 脂肪型和瘦肉型猪在不同日龄肠道的硬壁菌门、拟杆菌门和拟杆菌属的变化第84-94页
  1 前言第84页
  2 材料与方法第84-86页
   ·材料第84-85页
   ·方法第85-86页
     ·饲养管理第85页
     ·粪便的采集第85-86页
     ·粪便DNA的提取第86页
     ·实时荧光定量PCR检测第86页
     ·数据处理和统计分析第86页
  3 结果与分析第86-92页
   ·试猪各阶段的体重第86页
   ·粪便DNA的提取第86页
   ·标准曲线第86-89页
   ·试猪在各日龄阶段的细菌拷贝数第89-91页
   ·试猪各阶段肠道各类细菌的比例第91-92页
  4 讨论第92-93页
  5 小结第93-94页
 试验五 日粮碳水化合物和蛋白质比例对猪脂肪沉积、肠道微生物及相关基因表达的影响第94-113页
  1 前言第94页
  2 材料与方法第94-100页
   ·材料第94-96页
   ·方法第96-100页
     ·饲养管理第96页
     ·粪便的采集第96页
     ·屠宰取样第96页
     ·胴体指标的测定第96-97页
     ·肉质指标的测定第97页
     ·粪便和盲肠内容物DNA的提取第97页
     ·粪便和盲肠内容物中各类细菌拷贝数的检测第97页
     ·回肠、脂肪和肌肉组织脂肪沉积相关基因表达的检测第97-100页
     ·数据处理和统计分析第100页
  3 结果与分析第100-109页
   ·胴体性状结果第100-101页
   ·粪便或盲肠内容物DNA和组织总RNA的检测第101页
   ·各类细菌拷贝数第101-104页
   ·回肠、肌肉和脂肪中相关基因的表达第104-109页
  4 讨论第109-112页
  5 小结第112-113页
第四部分 本研究的总体讨论和结论第113-116页
 1 总体讨论第113-115页
 2 总体结论第115页
 3 本研究的创新点第115页
 4 有待进一步研究的问题第115-116页
参考文献第116-125页
致谢第125-126页
攻读博士学位期间发表的学术论文第126页

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