| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第11-27页 |
| ·PRRSV 的起源和分类 | 第11-12页 |
| ·PRRSV 的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·病毒的形态特征及其侵入和释放机制 | 第12页 |
| ·病毒的抵抗力及培养特性 | 第12-13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究 | 第13-17页 |
| ·病毒基因组的结构与特点 | 第13页 |
| ·病毒基因组编码蛋白的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·病毒的复制特点及分子遗传变异 | 第15-17页 |
| ·PRRS 的流行病学研究 | 第17-19页 |
| ·宿主因素 | 第18页 |
| ·病毒因素 | 第18页 |
| ·免疫因素 | 第18页 |
| ·饲养管理与环境因素的影响 | 第18-19页 |
| ·PRRS 的临床症状 | 第19-20页 |
| ·PRRSV 感染猪的病理变化 | 第20页 |
| ·胎儿、新生仔猪及哺乳仔猪 | 第20页 |
| ·母猪 | 第20页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机制 | 第20-21页 |
| ·诊断技术研究 | 第21-23页 |
| ·抗原检测 | 第21-22页 |
| ·抗体检测 | 第22-23页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第23页 |
| ·免疫学研究 | 第23-25页 |
| ·体液免疫 | 第23-24页 |
| ·细胞免疫 | 第24-25页 |
| ·抗体依赖性增强作用(ADE) | 第25页 |
| ·防制策略与疫苗免疫 | 第25-27页 |
| 第二章 广东省猪群中PRRSV 的调查与其流行毒株的分离 | 第27-33页 |
| ·试验材料 | 第27-28页 |
| ·主要试验仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第27-28页 |
| ·细胞与阳性对照病毒株 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-30页 |
| ·培养基的配制 | 第28页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·病例与猪群的调查 | 第29页 |
| ·病料的采集及处理 | 第29页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·病毒分离 | 第29页 |
| ·PRRSV 的检测 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-31页 |
| ·病料样品中PRRSV RT-PCR 结果 | 第30页 |
| ·病毒分离 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·结论 | 第32-33页 |
| 第三章 广东省PRRSV 流行株NSP2、ORF3、ORF5 基因的序列分析 | 第33-48页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌种和质粒 | 第33页 |
| ·试剂和耗材 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·引物设计及特异性RT-PCR 的建立 | 第34页 |
| ·病毒的增殖 | 第34页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34页 |
| ·RT-PCR 产物的鉴定 | 第34-35页 |
| ·纯化回收DNA 片段 | 第35页 |
| ·纯化产物与pMD 18-T Vector 连接 | 第35页 |
| ·感受态细胞的制备（CaCl2 法） | 第35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的提取 | 第36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的序列分析 | 第37页 |
| ·分离毒株ORF3、ORF5、Nsp2 基因的序列分析 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-45页 |
| ·RT-PCR 检测方法的建立 | 第37页 |
| ·病毒分离的与初步鉴定 | 第37-38页 |
| ·Nsp2、ORF3 和ORF5 基因的克隆测序 | 第38页 |
| ·Nsp2 基因变异缺失区序列分析 | 第38-40页 |
| ·分离毒株ORF3 的序列分析 | 第40-42页 |
| ·分离毒株ORF5 的序列分析 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 第四章 广东省PRRSV 流行株GDYF 的全基因组序列分析 | 第48-67页 |
| ·试验材料 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·试剂和耗材 | 第48页 |
| ·毒株、菌种和质粒 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·培养基的配制 | 第49页 |
| ·引物设计 | 第49-50页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第50页 |
| ·各段基因的扩增 | 第50页 |
| ·RT-PCR 产物的鉴定 | 第50页 |
| ·纯化回收DNA 片段 | 第50页 |
| ·纯化产物与pMD 18-T Vector 连接 | 第50-51页 |
| ·感受态细胞的制备（CaCl2 法） | 第51页 |
| ·连接产物的转化 | 第51页 |
| ·重组质粒的提取 | 第51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第51页 |
| ·本研究分离毒株全基因组序列变异分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-65页 |
| ·全基因组多个片断的扩增及阳性克隆鉴定 | 第51-53页 |
| ·5′NCR 的扩增结果及其序列分析 | 第53-55页 |
| ·非结构蛋白的结果分析 | 第55-59页 |
| ·结构蛋白的序列分析 | 第59-63页 |
| ·3′ UTR 的扩增结果及其序列分析 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65页 |
| ·结论 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 英文缩略词及中英文对照 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
