| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-31页 |
| 1 文昌鱼—研究脊椎动物起源和进化的模式动物 | 第12-17页 |
| ·文昌鱼概述 | 第12-14页 |
| ·文昌鱼的形体结构 | 第14页 |
| ·文昌鱼的胚胎发育特点 | 第14-15页 |
| ·分子生物学在文昌鱼发育进化研究中的应用 | 第15-17页 |
| ·文昌鱼的研究意义 | 第17页 |
| 2 丝氨酸蛋白酶的研究进展 | 第17-29页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的概述 | 第17-20页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的级联反应 | 第20-24页 |
| ·生殖系统中的丝氨酸蛋白酶 | 第24-29页 |
| 3 本文的研究目的以及采用的技术路线 | 第29-31页 |
| ·研究目的 | 第29页 |
| ·技术路线 | 第29-31页 |
| 第二章 BbOvc基因的克隆及序列分析 | 第31-50页 |
| 1 前言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-39页 |
| ·文昌鱼ovochymase基因全长cDNA序列的克隆 | 第31-39页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-50页 |
| ·全长cDNA序列的克隆 | 第39-42页 |
| ·序列分析 | 第42-50页 |
| 第三章 BbOvc基因的组织和时空表达模式 | 第50-72页 |
| 1 前言 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-64页 |
| ·Northern blot | 第50-56页 |
| ·实时定量PCR | 第56-58页 |
| ·切片原位杂交 | 第58-62页 |
| ·胚胎原位杂交 | 第62-64页 |
| 3 结果与讨论 | 第64-72页 |
| ·探针的合成 | 第64-65页 |
| ·Northern blot | 第65页 |
| ·实时定量PCR | 第65-68页 |
| ·文昌鱼成体的切片原位杂交 | 第68-69页 |
| ·整体原位杂交 | 第69-72页 |
| 第四章 重组BbOvc的原核表达及其功能分析 | 第72-93页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-85页 |
| ·重组蛋白pET32a/BbOvc原核表达载体的构建 | 第72-76页 |
| ·重组BbOvc基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第76页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第76-77页 |
| ·Western blotting鉴定 | 第77-79页 |
| ·包涵体复性 | 第79-83页 |
| ·重组蛋白的抑菌活性 | 第83-84页 |
| ·重组蛋白的酶活分析 | 第84-85页 |
| 3 结果与讨论 | 第85-93页 |
| ·重组表达载体pET32a/BbOvc的构建 | 第85-86页 |
| ·重组pET32a/BbOvc在大肠杆菌中的表达 | 第86-87页 |
| ·包涵体的纯化及Western blot检测 | 第87-88页 |
| ·包涵体复性 | 第88-89页 |
| ·复性后重组蛋白的抑菌实验和酶的活性分析 | 第89-93页 |
| 总结与展望 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |