基于SSH技术研究茶树被茶尺蠖取食诱导的基因差异表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 图表清单 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·植物对害虫诱导防御途径的研究进展 | 第11-15页 |
| ·基因表达差异谱的研究方法 | 第15-18页 |
| 2 引言 | 第18-21页 |
| ·研究意义及目的 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·材料处理 | 第21页 |
| ·仪器与试剂 | 第21-22页 |
| ·主要实验仪器 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·茶树叶片总RNA 的提取和检测 | 第22-23页 |
| ·mRNA 分离纯化与质检 | 第23页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第23-24页 |
| ·cDNA 第二链合成 | 第24页 |
| ·cDNA 纯化 | 第24-25页 |
| ·cDNA RsaI 酶切 | 第25页 |
| ·接头连接 | 第25-26页 |
| ·差减杂交 | 第26-27页 |
| ·两轮差减PCR | 第27-28页 |
| ·两次差减PCR 扩增产物的纯化 | 第28页 |
| ·差减文库的克隆 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·PCR 鉴定差减文库的克隆插入片断大小 | 第29-30页 |
| ·定量PCR 验证差异表达基因的表达变化 | 第30-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-45页 |
| ·RNA 的提取与质量检测 | 第32页 |
| ·mRNA 的纯化与质量检测 | 第32-33页 |
| ·Rsa I 酶切质量的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
| ·接头连接质量的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33-34页 |
| ·差减质量的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第34页 |
| ·菌液 PCR 验证 | 第34页 |
| ·序列测定和同源性分析统计 | 第34-40页 |
| ·定量 PCR 验证差异片段的表达量变化 | 第40-45页 |
| 5 讨论 | 第45-53页 |
| ·SSH | 第45页 |
| ·定量 PCR | 第45-46页 |
| ·茶树被茶尺蠖取食诱导可能所涉及的防御机制 | 第46-53页 |
| 6 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录A | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
| 成果清单 | 第63页 |