| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 文献综述 | 第7-17页 |
| ·非生物逆境 | 第7-8页 |
| ·非生物逆境胁迫下植物的生理生化反应 | 第7-8页 |
| ·非生物逆境胁迫下植物诱导表达的基因及其产物 | 第8页 |
| ·植物非生物逆境信号转导的分子机制 | 第8-11页 |
| ·ABA 依赖性信号途径 | 第9-10页 |
| ·ABA 非依赖性信号途径 | 第10-11页 |
| ·逆境信号通路之间的网络联系 | 第11页 |
| ·转录因子 | 第11-15页 |
| ·转录因子定义 | 第11-12页 |
| ·转录因子的基本结构 | 第12-14页 |
| ·植物转录因子的分类 | 第14页 |
| ·转录因子在抗非生物胁迫中的应用 | 第14-15页 |
| ·PHD-finger 家族转录因子 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-39页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·载体与菌株 | 第18页 |
| ·酶及试剂 | 第18页 |
| ·引物合成、DNA 测序及序列分析 | 第18-19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·OSPHD1 基因的逆境处理表达分析 | 第19-21页 |
| ·植物材料与处理 | 第19页 |
| ·RT-PCR 反应引物 | 第19-20页 |
| ·Trizol 法提取RNA | 第20页 |
| ·RT-PCR | 第20-21页 |
| ·OSPHD1 基因的获取与pCactF-OSPHD1 表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·OSPHD1 基因的获取 | 第21-22页 |
| ·pCactF-OSPHD1 表达载体的构建 | 第22页 |
| ·OSPHD1 转基因水稻的获得与检测 | 第22-24页 |
| ·转化农杆菌 | 第22页 |
| ·侵染水稻愈伤组织 | 第22-23页 |
| ·阳性转基因水稻的获得 | 第23页 |
| ·OSPHD1 阳性转基因植株的检测 | 第23页 |
| ·CTAB 法提取基因组 DNA 步骤(简单提取) | 第23-24页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株的耐逆性鉴定 | 第24-25页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐旱性鉴定 | 第24页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐盐性鉴定 | 第24页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐冷性鉴定 | 第24-25页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株的表达分析 | 第25页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代株系的Southern blot 分析 | 第25-30页 |
| ·提取植物总DNA (CTAB 法) | 第26-27页 |
| ·制备地高辛标记探针 | 第27页 |
| ·酶切 | 第27-28页 |
| ·电泳、转膜 | 第28-29页 |
| ·杂交 | 第29页 |
| ·洗膜 | 第29页 |
| ·检测 | 第29-30页 |
| ·T2 代两单拷贝纯合体株系（L4 和L6）的逆境筛选 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR 分析OSPHD1 基因在两单拷贝纯合体株系中的表达量 | 第30-31页 |
| ·核定位信号分析 | 第31-35页 |
| ·原理 | 第31-32页 |
| ·构建含功能基因的表达载体pGFP-OSPHD1 | 第32-33页 |
| ·洋葱表皮细胞的准备 | 第33页 |
| ·外源DNA 的准备及Tungstem Particles 的处理 | 第33-34页 |
| ·基因枪法（particle bombardment）转化洋葱表皮 | 第34-35页 |
| ·转录激活域验证 | 第35-39页 |
| ·原理 | 第35-36页 |
| ·构建含功能基因的表达载体pGBKT7-OSPHD1 | 第36-37页 |
| ·LiAc 法进行酵母小量转化 | 第37-38页 |
| ·OSPHD1 是否具有转录激活域验证 | 第38-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·OSPHD1 基因的逆境处理表达分析 | 第39页 |
| ·OSPHD1 阳性转基因植株的检测 | 第39-40页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株的耐逆性鉴定 | 第40-42页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐旱性鉴定 | 第40页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐盐性鉴定 | 第40-41页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株耐低温性鉴定 | 第41-42页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株的表达分析 | 第42-43页 |
| ·OSPHD1 转基因T1 代植株的Southern blot 分析 | 第43页 |
| ·T2 代两单拷贝纯合体株系的逆境筛选结果与表达量分析 | 第43-45页 |
| ·核定位信号分析 | 第45-46页 |
| ·构建含功能基因的表达载体pGFP-OSPHD1 | 第45页 |
| ·荧光显微镜观察结果 | 第45-46页 |
| ·转录激活域验证 | 第46-48页 |
| ·构建含功能基因的表达载体pGBKT7-OSPHD1 | 第46-47页 |
| ·OSPHD1 是否具有转录激活域验证 | 第47-48页 |
| 5 结论与讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
