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Cofilin信号通路在骨性关节炎发病机制中的作用研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
英文缩略语第10-11页
前言第11-12页
文献综述第12-21页
 1 骨性关节炎第12-18页
   ·骨性关节炎的概念第12页
   ·骨性关节炎流行病学调查研究第12页
   ·骨性关节炎的病因第12-13页
   ·骨性关节炎的发病机制研究进展第13-18页
     ·生物力学对骨性关节炎的作用第13-14页
     ·基质金属蛋白酶对骨关节炎的降解作用第14页
     ·自由基与一氧化氮第14-15页
     ·细胞因子第15-16页
     ·细胞凋亡第16-17页
     ·软骨修复第17-18页
 2 Cofilin的相关研究第18-21页
   ·国内外研究现状第18页
   ·Cofilin 的结构和表达第18页
   ·Cofilin 的功能第18-19页
   ·Cofilin 的调控机制第19-20页
   ·Cofilin 信号通路对骨性关节炎的作用第20页
   ·持续压应力对肌动蛋白的调整作用第20-21页
实验研究第21-40页
 一 家兔骨性关节炎模型的建立与软骨细胞培养及其特征研究第21-25页
  1 材料与设备第21-22页
   ·实验动物第21页
   ·试剂第21页
   ·主要仪器及设备第21-22页
  2 实验方法第22页
   ·软骨细胞分离第22页
  3 指标检测第22-23页
   ·细胞一般生物学指标第22-23页
     ·软骨外观形态观察及消化特性第22-23页
     ·贴壁细胞第23页
     ·MTT 测定软骨细胞增殖第23页
     ·软骨细胞表型鉴定及标志物分析第23页
  4 实验结果第23-25页
     ·软骨细胞形态及消化过程第23-24页
     ·细胞贴壁第24页
     ·细胞增殖实验结果第24页
     ·软骨细胞鉴定及标志物分析第24-25页
  5 讨论与小结第25页
 二 成功构建机械力诱导骨性关节炎发生早期软骨细胞模型第25-30页
  1 材料及仪器第25-26页
   ·实验动物第25页
   ·试剂第25-26页
   ·主要仪器第26页
  2 实验方法第26-27页
   ·细胞培养第26-27页
   ·静压力法模型构建第27页
  3 指标检测第27-28页
   ·细胞一般生物学指标第27页
   ·形态学特性第27页
   ·软骨细胞表型鉴定及标志物分析第27-28页
   ·细胞周期的测定第28页
   ·早期凋亡测定第28页
  4 统计学分析第28-29页
  5 实验结果第29-30页
   ·形态学分析第29页
   ·甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化法第29页
   ·细胞周期检测结果及凋亡分析第29-30页
  6 讨论与小结第30页
 三 RT-PCR 及 Western blot 对 Cofilin 基因及蛋白表达的检测第30-36页
  1 实验材料第30-33页
   ·试剂第30-32页
   ·主要仪器第32-33页
  2 实验方法第33-34页
   ·细胞培养第33页
   ·细胞总 RNA 提取第33页
   ·RT-PCI 逆转录-聚合酶链反应第33-34页
   ·PCR 扩增第34页
  3 数据处理第34-35页
  4 实验结果第35-36页
 四 Western blot 检测 cofilin 蛋白表达第36-40页
  1 细胞培养第36页
  2 蛋白样品制备第36页
  3 蛋白含量的测定第36-37页
  4 Western blot第37-39页
  5 实验结果第39-40页
讨论第40-41页
结语第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-47页
附图第47-50页

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