中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
材料与方法 | 第13-28页 |
一、材料 | 第13-15页 |
1、胃癌细胞株 | 第13页 |
2、主要试剂 | 第13页 |
3、主要仪器 | 第13-14页 |
4、主要溶液配制 | 第14-15页 |
二、方法 | 第15-28页 |
1、细胞培养 | 第15-18页 |
·细胞传代 | 第15-16页 |
·细胞的冻存 | 第16页 |
·细胞的复苏 | 第16-17页 |
·细胞计数 | 第17-18页 |
2、配药 | 第18页 |
·塞来昔布 | 第18页 |
·PGE_2 | 第18页 |
3、实时荧光定量RT-PCR实验 | 第18-24页 |
·实验原理 | 第18-19页 |
·引物设计与合成 | 第19-20页 |
·实验分组 | 第20页 |
·细胞处理 | 第20-21页 |
·RNA的提取 | 第21-22页 |
·cDNA的合成 | 第22-23页 |
·实时荧光定量RT-PCR反应 | 第23-24页 |
·实验结果分析 | 第24页 |
4、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜实验 | 第24-25页 |
5、肿瘤细胞体外侵袭力实验(Transwell法) | 第25-27页 |
·MTT法计算肿瘤细胞存活率 | 第25-26页 |
·肿瘤细胞体外侵袭实验原理 | 第26页 |
·肿瘤细胞体外侵袭实验方法 | 第26-27页 |
6、肿瘤细胞体外迁移实验(Transwell法) | 第27页 |
7、统计学处理 | 第27-28页 |
结果 | 第28-43页 |
一、MTT法确定塞来昔布及PGE_2的作用浓度 | 第28-31页 |
1、塞来昔布干预组 | 第28-29页 |
2、PGE_2干预组 | 第29-31页 |
二、塞来昔布对SGC-7901细胞E-cadherin、MMP-2表达量及细胞侵袭迁移能力的影响 | 第31-37页 |
1、实时荧光定量RT-PCR检测COX-2、E-cadherin、MMP-2的表达量 | 第31-36页 |
·实时荧光定量RT-PCR扩增曲线并引物特异性验证 | 第31-32页 |
·塞来昔布干预组E-cadherin mRNA剂量依赖性检测 | 第32页 |
·塞来昔布干预组E-cadherin mRNA时间依赖性检测 | 第32-33页 |
·塞来昔布干预组MMP-2 mRNA剂量依赖性检测 | 第33-34页 |
·塞来昔布干预组MMP-2 mRNA时间依赖性检测 | 第34-35页 |
·塞来昔布干预组COX-2 mRNA表达量与E-cadherin、MMP-2 mRNA表达量的关系 | 第35-36页 |
2、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜检测肿瘤细胞膜E-cadherin蛋白的表达量 | 第36-37页 |
3、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外侵袭力 | 第37页 |
4、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外迁移能力 | 第37页 |
三、PGE_2对SGC-7901细胞E-cadherin、MMP-2表达量及细胞侵袭迁移能力的影响 | 第37-43页 |
1、实时荧光定量RT-PCR检测E-cadherin、MMP-2的表达量 | 第37-40页 |
·实时荧光定量RT-PCR扩增曲线并引物特异性验证 | 第38页 |
·PGE_2干预组E-cadherin mRNA剂量依赖性检测 | 第38-39页 |
·PGE_2干预组E-cadherin mRNA时间依赖性检测 | 第39页 |
·PGE_2干预组MMP-2 mRNA剂量依赖性检测 | 第39-40页 |
·PGE_2干预组MMP-2 mRNA时间依赖性检测 | 第40页 |
2、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜检测肿瘤细胞膜E-cadherin的表达量 | 第40-41页 |
3、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外侵袭力 | 第41-42页 |
4、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外迁移能力 | 第42-43页 |
讨论 | 第43-48页 |
一、塞来昔布及PGE_2通过COX-2途径影响SGC-7901细胞E-cadherin表达 | 第43-45页 |
二、塞来昔布及PGE_2通过COX-2途径影响SGC-7901细胞MMP-2的表达 | 第45-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
缩略词表 | 第52-53页 |
攻读学位论文期间撰写的学位论文 | 第53-54页 |
综述 | 第54-64页 |
致谢 | 第64页 |