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COX-2调控胃癌细胞侵袭迁移分子机制的实验研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-13页
材料与方法第13-28页
 一、材料第13-15页
  1、胃癌细胞株第13页
  2、主要试剂第13页
  3、主要仪器第13-14页
  4、主要溶液配制第14-15页
 二、方法第15-28页
  1、细胞培养第15-18页
   ·细胞传代第15-16页
   ·细胞的冻存第16页
   ·细胞的复苏第16-17页
   ·细胞计数第17-18页
  2、配药第18页
   ·塞来昔布第18页
   ·PGE_2第18页
  3、实时荧光定量RT-PCR实验第18-24页
   ·实验原理第18-19页
   ·引物设计与合成第19-20页
   ·实验分组第20页
   ·细胞处理第20-21页
   ·RNA的提取第21-22页
   ·cDNA的合成第22-23页
   ·实时荧光定量RT-PCR反应第23-24页
   ·实验结果分析第24页
  4、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜实验第24-25页
  5、肿瘤细胞体外侵袭力实验(Transwell法)第25-27页
   ·MTT法计算肿瘤细胞存活率第25-26页
   ·肿瘤细胞体外侵袭实验原理第26页
   ·肿瘤细胞体外侵袭实验方法第26-27页
  6、肿瘤细胞体外迁移实验(Transwell法)第27页
  7、统计学处理第27-28页
结果第28-43页
 一、MTT法确定塞来昔布及PGE_2的作用浓度第28-31页
  1、塞来昔布干预组第28-29页
  2、PGE_2干预组第29-31页
 二、塞来昔布对SGC-7901细胞E-cadherin、MMP-2表达量及细胞侵袭迁移能力的影响第31-37页
  1、实时荧光定量RT-PCR检测COX-2、E-cadherin、MMP-2的表达量第31-36页
   ·实时荧光定量RT-PCR扩增曲线并引物特异性验证第31-32页
   ·塞来昔布干预组E-cadherin mRNA剂量依赖性检测第32页
   ·塞来昔布干预组E-cadherin mRNA时间依赖性检测第32-33页
   ·塞来昔布干预组MMP-2 mRNA剂量依赖性检测第33-34页
   ·塞来昔布干预组MMP-2 mRNA时间依赖性检测第34-35页
   ·塞来昔布干预组COX-2 mRNA表达量与E-cadherin、MMP-2 mRNA表达量的关系第35-36页
  2、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜检测肿瘤细胞膜E-cadherin蛋白的表达量第36-37页
  3、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外侵袭力第37页
  4、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外迁移能力第37页
 三、PGE_2对SGC-7901细胞E-cadherin、MMP-2表达量及细胞侵袭迁移能力的影响第37-43页
  1、实时荧光定量RT-PCR检测E-cadherin、MMP-2的表达量第37-40页
   ·实时荧光定量RT-PCR扩增曲线并引物特异性验证第38页
   ·PGE_2干预组E-cadherin mRNA剂量依赖性检测第38-39页
   ·PGE_2干预组E-cadherin mRNA时间依赖性检测第39页
   ·PGE_2干预组MMP-2 mRNA剂量依赖性检测第39-40页
   ·PGE_2干预组MMP-2 mRNA时间依赖性检测第40页
  2、免疫荧光标记法结合激光共聚焦荧光显微镜检测肿瘤细胞膜E-cadherin的表达量第40-41页
  3、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外侵袭力第41-42页
  4、Transwell小室法检测肿瘤细胞体外迁移能力第42-43页
讨论第43-48页
 一、塞来昔布及PGE_2通过COX-2途径影响SGC-7901细胞E-cadherin表达第43-45页
 二、塞来昔布及PGE_2通过COX-2途径影响SGC-7901细胞MMP-2的表达第45-48页
结论第48-49页
参考文献第49-52页
缩略词表第52-53页
攻读学位论文期间撰写的学位论文第53-54页
综述第54-64页
致谢第64页

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