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芸薹属种间关系及其人工合成甘蓝型油菜早期世代蛋白质组学的研究

符号及缩略语说明(Abbreviations)第1-10页
中文摘要第10-13页
ABSTRACT第13-17页
第一章 文献综述第17-59页
 1 芸薹属基因组研究进展第17-22页
   ·芸薹属植物基因组间亲缘关系第17-18页
   ·芸薹属A、B 和C 基因组之间的关系第18-19页
   ·芸薹属基因组结构和起源进化研究第19-22页
 2 分子原位杂交技术及其发展第22-28页
   ·DNA 分子杂交技术的概念第22页
   ·原位杂交技术的发展第22-26页
     ·研究概况第22-23页
     ·原位杂交技术的进展及应用第23-26页
   ·FISH 在物理作图中的应用第26-28页
     ·单拷贝或寡拷贝DNA 序列的FISH 物理作图第26页
     ·重复序列和多基因家族的FISH 物理作图第26-28页
 3 核糖体基因在芸薹属中的研究应用第28-32页
   ·核rDNA 序列的同步进化第28-30页
   ·植物核rDNA-FISH 在芸薹属中的物理定位第30-32页
 4 甘蓝型油菜人工合成种的研究第32-34页
   ·甘蓝型油菜的起源与进化第32-33页
   ·人工合成甘蓝型油菜的研究第33页
   ·研究甘蓝型油菜人工合成种的目的与意义第33-34页
 5 植物异源多倍体形成过程中的基因组变异和表观遗传变异第34-39页
   ·亲本序列消除第34-36页
     ·基因组序列丢失发生的时间第34-35页
     ·基因组序列丢失的非随机性第35页
     ·影响序列消除的因素第35-36页
   ·表观遗传变异第36-39页
     ·核仁显性(nucleolar dominance)第37页
     ·基因沉默(Gene silencing)第37-38页
     ·转座元件激活第38-39页
     ·DNA 甲基化与亲本印迹第39页
 6 蛋白质组学的研究第39-47页
   ·蛋白质组学的历史背景第39-41页
   ·植物蛋白质组学研究概况第41-45页
   ·蛋白质组学研究必要性与意义第45-47页
 参考文献第47-59页
第二章 芸薹属基本种 45S rDNA 重复序列的有丝分裂与减 数分裂的 FISH 定位分析第59-68页
 前言第59-60页
 1 材料与方法第60-61页
   ·植物材料第60页
   ·染色体制片第60页
   ·探针的标记第60页
   ·原位杂交第60-61页
   ·信号检测和图像处理第61页
 2 结果与分析第61-62页
 3 讨论第62-65页
 参考文献第65-68页
第三章 着丝粒重复序列原位杂交及CAPS 标记分析芸薹属A、B 和C 基因组间的关系第68-77页
 前言第68-69页
 1 材料和方法第69-70页
   ·植物材料第69页
   ·试验方法第69-70页
     ·染色体制片第69页
     ·基因组DNA 的提取第69页
     ·探针的制备第69-70页
     ·原位杂交第70页
     ·信号检测和图像处理第70页
     ·FAE1 基因的克隆和CAPS 分析第70页
 2 结果与分析第70-73页
   ·原位杂交分析第70-71页
   ·FAE1 基因的克隆和CAPS 分析第71-73页
 3 讨论第73-74页
 4 结论第74-75页
 参考文献第75-77页
第四章 芸薹属种子贮藏蛋白质组分的比较研究第77-86页
 前言第77-78页
 1 材料与方法第78-79页
   ·植物材料第78页
   ·方法第78-79页
     ·种子贮藏蛋白质样品的提取第78页
     ·SDS-PAGE 电泳第78-79页
     ·染色和脱色第79页
     ·Rf 值及统计蛋白质亚基条带数第79页
 2 结果与分析第79-84页
   ·油菜种子贮藏蛋白质亚基分析第79-82页
   ·6 个种蛋白质亚基相似度及亲缘关系第82-83页
   ·种间的遗传距离和聚类分析第83-84页
 参考文献第84-86页
第五章 芸薹属A、C 基因组间比较蛋白质组学的分析及PCR 分子标记的开发第86-115页
 前言第86-87页
 1 材料与方法第87-88页
   ·材料第87页
   ·仪器与试剂第87-88页
 2 实验方法第88-96页
   ·油菜叶片可溶性蛋白2-DE 样品的提取与溶解第88页
     ·油菜叶片全蛋白的提取——三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法第88页
     ·蛋白质的溶解第88页
   ·采用Bradford 法测定样品溶液中蛋白质含量第88-90页
     ·溶液的配置第89页
     ·标准曲线的制作第89-90页
   ·双向凝胶电泳第90-94页
     ·溶液的配置第90-91页
     ·水化加样及第一向等电聚焦电泳(IEF)第91-92页
     ·胶条的平衡第92页
     ·第二向SDS-PAGE 电泳第92页
     ·凝胶染色第92-93页
     ·凝胶成像及软件分析第93页
     ·差异表达蛋白肽质量指纹谱的质谱测定第93-94页
     ·质谱数据的数据库搜索第94页
   ·根据差异蛋白的核酸序列合成引物进行PCR 反应第94-96页
     ·试验材料第94页
     ·油菜基因组DNA 的提取第94-95页
     ·引物合成第95-96页
 3 结果与分析第96-112页
   ·PDQuest 软件分析油菜二倍体芸薹与甘蓝叶片可溶性蛋白的差异第96-98页
   ·差异表达蛋白的MALDI-TOF-MS 分析及数据库检索第98-104页
   ·PCR 鉴定第104-108页
   ·讨论与结论第108-112页
     ·基于PMF 数据的蛋白质鉴定的评价第108-109页
     ·白菜与甘蓝比较蛋白质组学的分析与讨论第109-110页
     ·白菜与甘蓝间标记的开发第110-112页
 参考文献第112-115页
第六章 利用差异蛋白质组对人工合成甘蓝型油菜F1及早期世代蛋白质变化的研究第115-164页
 第一节 人工合成甘蓝型油菜F1及其亲本叶片比较蛋白质组学研究第115-136页
  1 材料与方法第116页
   ·实验材料第116页
  2 实验方法第116页
   ·叶片可溶性蛋白的提取(参见第五章)第116页
   ·叶片可溶性蛋白双向电泳实验(参见第五章)第116页
  3 结果与分析第116-136页
   ·人工合成甘蓝型油菜F1 代及其亲本二倍体叶片可溶性蛋白2-DE 蛋白质组的比较分析第116-122页
   ·人工合成甘蓝型油菜F1 中新出现蛋白点的数据库搜索结果第122-125页
   ·新合成甘蓝型油菜F1 中新蛋白的功能分析第125-130页
     ·与物质和能量的代谢相关蛋白第125-129页
     ·转录相关蛋白第129页
     ·抗病相关蛋白第129-130页
   ·双向电泳分析油菜叶片蛋白质组的复杂性第130-132页
     ·同一个蛋白质出现在凝胶的多个位置第130-131页
     ·差异蛋白质的鉴定率第131页
     ·功能未知蛋白第131页
     ·质谱鉴定结果与图谱中蛋白点的偏差第131-132页
   ·杂种F1 代与双亲叶片蛋白质组的比较分析第132-136页
 第二节 人工合成甘蓝型油菜早期世代蛋白质组的变化第136-155页
  1 材料与方法第136-137页
   ·实验材料第136-137页
  2 实验方法第137页
   ·花粉活性观察第137页
   ·叶片可溶性蛋白的提取(参见第五章)第137页
   ·叶片可溶性蛋白双向电泳实验(参见第五章)第137页
  3 结果与分析第137-151页
   ·人工合成甘蓝型油菜F1~F4 代叶片可溶性蛋白的2-DE 电泳第137-151页
     ·差异蛋白点的统计分析第137-138页
     ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS 分析与鉴定第138-143页
     ·鉴定蛋白质的功能分类第143-144页
     ·差异蛋白点的功能推测第144-151页
  4 人工合成甘蓝型油菜后代表观遗传变化的分析第151-155页
 参考文献第155-164页
致谢第164-165页
博士期间发表的论文第165页

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