中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·禽流感概述 | 第11-17页 |
·禽流感流行现状 | 第11-12页 |
·禽流感病毒分子生物学特征 | 第12页 |
·基因组的结构及其编码蛋白的功能 | 第12-15页 |
·禽流感疫苗 | 第15-17页 |
·干扰素概述 | 第17-20页 |
·IFN 分类及性质 | 第17页 |
·IFN-γ产生及诱导剂 | 第17-18页 |
·IFN-γ生物学活性 | 第18-19页 |
·IFN-γ的应用 | 第19-20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
·试验材料 | 第21-22页 |
·试验动物 | 第21页 |
·病毒株 | 第21页 |
·细胞株、菌株及载体 | 第21页 |
·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第21页 |
·主要生化试剂 | 第21-22页 |
·主要实验仪器设备 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-34页 |
·鸡脾淋巴细胞总RNA 分离 | 第22页 |
·鸡IFN-γ基因RT-PCR 扩增 | 第22-23页 |
·PCR 扩增片段克隆 | 第23-25页 |
·重组质粒鉴定 | 第25-26页 |
·鸡IFN-γ基因重组表达载体构建 | 第26-27页 |
·重组表达质粒鉴定 | 第27-28页 |
·重组鸡IFN-γ在大肠杆菌表达系统中诱导表达 | 第28-29页 |
·融合蛋白纯化 | 第29页 |
·免疫印记分析 | 第29页 |
·重组蛋白对VSV 感染细胞细胞病变的抑制 | 第29-30页 |
·多克隆抗体制备 | 第30页 |
·多克隆抗体鉴定 | 第30-31页 |
·重组鸡γ干扰素对禽流感灭活苗的免疫增强效应 | 第31-34页 |
·数据处理 | 第34-35页 |
3 试验结果 | 第35-53页 |
·鸡 IFN-γ 基因克隆与序列测定 | 第35-37页 |
·鸡脾淋巴细胞总RNA 分离 | 第35页 |
·RT-PCR 法扩增鸡IFN-γ基因序列 | 第35-36页 |
·重组质粒pMD18-T-ChIFN-γ的鉴定 | 第36-37页 |
·ChIFN-γ序列测定及分析 | 第37页 |
·鸡 IFN-γ 基因在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体制备 | 第37-42页 |
·重组表达质粒鉴定 | 第37-38页 |
·融合蛋白表达、鉴定与纯化 | 第38-40页 |
·重组蛋白生物活性检测 | 第40-41页 |
·多抗血清效价及特异性鉴定 | 第41-42页 |
·禽流感HI 抗体水平测定 | 第42页 |
·雏鸡免疫器官及血液T、B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第42-46页 |
·雏鸡胸腺T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第42-43页 |
·雏鸡脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第43-44页 |
·雏鸡血液T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第44页 |
·雏鸡脾脏B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第44-45页 |
·雏鸡血液B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第45-46页 |
·雏鸡免疫器官及血液不同亚型T 淋巴细胞数量动态变化 | 第46-50页 |
·雏鸡免疫器官及血液CD4~+ T 淋巴细胞动态变化 | 第46-48页 |
·雏鸡免疫器官及血液CD8~+ T 淋巴细胞动态变化 | 第48-50页 |
·雏鸡体重增长测定 | 第50页 |
·免疫器官指数测定 | 第50-52页 |
·禽流感病毒感染雏鸡病理学观察 | 第52页 |
·免疫攻毒保护率 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
·鸡 IFN-γ 基因克隆与表达 | 第53-54页 |
·鸡IFN-γ基因克隆与序列 | 第53页 |
·鸡IFN-γ基因表达、纯化与生物活性 | 第53页 |
·多克隆抗体制备及鉴定 | 第53-54页 |
·ChIFN-γ 对禽流感灭活苗免疫增强效应 | 第54-56页 |
·雏鸡免疫后HI 抗体水平变化 | 第54页 |
·雏鸡免疫后T、B 淋巴细胞增殖功能变化 | 第54页 |
·雏鸡免疫后不同亚型T 细胞数量动态变化 | 第54-55页 |
·雏鸡增重及免疫器官指数变化 | 第55页 |
·禽流感病毒攻击雏鸡病理学变化及免疫保护率 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |