中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
1 绪论 | 第8-17页 |
1.1 他汀类药物的研究概述 | 第8-9页 |
1.1.1 他汀类药物的药理作用 | 第8-9页 |
1.1.2 常用他汀类药物的销售概况 | 第9页 |
1.1.3 他汀类药物的常用检测方法 | 第9页 |
1.2 辛伐他汀合成的研究进展 | 第9-13页 |
1.2.1 化学合成法 | 第10-11页 |
1.2.2 生物合成法 | 第11-13页 |
1.3 固定化酶的研究进展 | 第13-16页 |
1.3.1 酶固定化的方法 | 第13-14页 |
1.3.2 固定化酶载体的概述 | 第14页 |
1.3.3 壳聚糖载体酶固定化方法的研究现状 | 第14-15页 |
1.3.4 磁性纳米颗粒酶固定化方法的研究现状 | 第15-16页 |
1.4 本课题的研究思路及研究内容 | 第16-17页 |
2 实验材料与方法 | 第17-25页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 实验试剂 | 第17-18页 |
2.1.2 实验仪器 | 第18页 |
2.1.3 实验中所用的菌种、质粒 | 第18页 |
2.1.4 实验中常用溶液的配置 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 产酶工程菌的构建 | 第19-21页 |
2.2.2 工程菌的培养与发酵 | 第21页 |
2.2.3 LovD粗酶液的制备和分离纯化 | 第21页 |
2.2.4 交联壳聚糖载体的制备 | 第21-22页 |
2.2.5 磁性纳米粒子的制备 | 第22-23页 |
2.3 检测方法 | 第23-25页 |
2.3.1 HPLC检测方法 | 第23-24页 |
2.3.2 蛋白质浓度检测 | 第24页 |
2.3.3 LovD比酶活测定 | 第24-25页 |
3 游离LovD酶催化辛伐他汀的合成研究 | 第25-29页 |
3.1 洛伐他汀的溶解度研究 | 第25-26页 |
3.2 莫纳克林J的制备 | 第26页 |
3.3 辛伐他汀的合成 | 第26-29页 |
3.3.1 粗酶液催化辛伐他汀的合成 | 第27页 |
3.3.2 LovD酶的分离纯化 | 第27页 |
3.3.3 LovD酶催化辛伐他汀的合成 | 第27-29页 |
4 固定化LovD酶催化辛伐他汀的合成 | 第29-35页 |
4.1 固定化酶载体的表征 | 第29-31页 |
4.1.1 交联壳聚糖微球固定化酶载体的表征 | 第29-30页 |
4.1.2 磁性纳米粒子固定化载体的表征 | 第30-31页 |
4.2 固定化酶催化辛伐他汀的合成研究 | 第31-32页 |
4.2.1 交联壳聚糖固定化酶催化辛伐他汀的合成 | 第31页 |
4.2.2 磁性纳米颗粒固定化酶催化辛伐他汀的合成 | 第31-32页 |
4.3 固定化酶重复利用率 | 第32-34页 |
4.3.1 壳聚糖微球固定化酶重复利用效果 | 第32-33页 |
4.3.2 磁性纳米颗粒固定化酶重复利用效果 | 第33-34页 |
4.4 游离酶和固定化酶的催化效果比较 | 第34-35页 |
5 结论与展望 | 第35-36页 |
5.1 结论 | 第35页 |
5.2 展望 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
附录 | 第40页 |