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黄瓜CsWRKY50基因的克隆与功能研究

缩略词对照表第4-9页
中文摘要第9-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 研究目的和意义第12页
    1.2 国内外研究进展第12-19页
        1.2.1 黄瓜霜霉病的研究进展第12-14页
        1.2.2 黄瓜霜霉病的抗病机制第14-16页
        1.2.3 其他物种霜霉病的抗性研究进展第16-17页
        1.2.4 WRKY转录因子研究进展第17-19页
    1.3 主要实验内容及技术路线第19-21页
2 材料与方法第21-34页
    2.1 试验材料第21-22页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 菌株及质粒第21页
        2.1.3 试验试剂及设备第21-22页
        2.1.4 PCR引物第22页
        2.1.5 黄瓜遗传转化组织培养基第22页
    2.2 试验方法第22-34页
        2.2.1 材料种植第22-23页
        2.2.2 CsWRKY50基因的生物信息学分析第23-24页
        2.2.3 基因克隆和载体构建第24-30页
        2.2.4 黄瓜遗传转化及转基因验证第30-31页
        2.2.5 组织化学染色第31-32页
        2.2.6 霜霉病菌处理后生理生化指标的测定第32-34页
3 结果与分析第34-59页
    3.1 WRKY-like基因的获得与分析第34页
    3.2 WRKY-like基因的生物信息学分析第34-37页
        3.2.1 基因结构和序列分析第35页
        3.2.2 CsWRKY50蛋白的理化性质分析第35-36页
        3.2.3 CsWRKY50蛋白与其它物种WRKY蛋白的进化关系分析第36-37页
    3.3 CsWRKY50基因响应黄瓜霜霉病菌的诱导第37-38页
    3.4 CsWRKY50基因的克隆第38-43页
        3.4.1 CsWRKY50蛋白的亚细胞定位第39-40页
        3.4.2 CsWRKY50基因的表达模式分析第40-41页
        3.4.3 启动子顺时作用元件分析第41-43页
    3.5 CsWRKY50基因逆境胁迫下的表达模式第43-44页
    3.6 CsWRKY50基因过表达载体的构建及遗传转化第44-46页
        3.6.1 CsWRKY50基因过表达载体的构建第44-45页
        3.6.2 CsWRKY50基因的遗传转化第45页
        3.6.3 CsWRKY50转基因植株验证第45-46页
        3.6.4 CsWRKY50过表达株系表达量的分析第46页
    3.7 CsWRKY50增强了黄瓜霜霉病的抗性第46-50页
        3.7.1 转基因株系中CsWRKY50基因的时空表达分析第46-47页
        3.7.2 CsWRKY50过表达株系表型鉴定第47-48页
        3.7.3 霜霉病菌处理后CsWRKY50基因表达量的分析第48-49页
        3.7.4 CsWRKY50过表达株系中死亡细胞减少第49-50页
        3.7.5 WT和过表达株系中叶绿素含量的分析第50页
    3.8 霜霉病菌对WT及转基因植株抗氧系统的影响第50-56页
        3.8.1 CsWRKY50抑制了活性氧的积累第51页
        3.8.2 WT和过表达株系中抗氧化酶活性的分析第51-53页
        3.8.3 WT和过表达株系中抗性物质含量的分析第53-56页
    3.9 CsWRKY50调控相关防御基因的表达第56-59页
4 讨论第59-62页
    4.1 CsWRKY50可能结合W-box元件来提高转录调控第59页
    4.2 CsWRKY50的过表达增强了黄瓜对霜霉病的抗性第59-60页
    4.3 CsWRKY50诱导SA的合成和相关防御基因的表达第60-62页
5 结论第62-63页
6 参考文献第63-70页
7 附录第70-73页
8 致谢第73-74页
9 攻读学位期间发表论文情况第74页

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