缩略词对照表 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-21页 |
1.1 研究目的和意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究进展 | 第12-19页 |
1.2.1 黄瓜霜霉病的研究进展 | 第12-14页 |
1.2.2 黄瓜霜霉病的抗病机制 | 第14-16页 |
1.2.3 其他物种霜霉病的抗性研究进展 | 第16-17页 |
1.2.4 WRKY转录因子研究进展 | 第17-19页 |
1.3 主要实验内容及技术路线 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 试验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株及质粒 | 第21页 |
2.1.3 试验试剂及设备 | 第21-22页 |
2.1.4 PCR引物 | 第22页 |
2.1.5 黄瓜遗传转化组织培养基 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22-34页 |
2.2.1 材料种植 | 第22-23页 |
2.2.2 CsWRKY50基因的生物信息学分析 | 第23-24页 |
2.2.3 基因克隆和载体构建 | 第24-30页 |
2.2.4 黄瓜遗传转化及转基因验证 | 第30-31页 |
2.2.5 组织化学染色 | 第31-32页 |
2.2.6 霜霉病菌处理后生理生化指标的测定 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-59页 |
3.1 WRKY-like基因的获得与分析 | 第34页 |
3.2 WRKY-like基因的生物信息学分析 | 第34-37页 |
3.2.1 基因结构和序列分析 | 第35页 |
3.2.2 CsWRKY50蛋白的理化性质分析 | 第35-36页 |
3.2.3 CsWRKY50蛋白与其它物种WRKY蛋白的进化关系分析 | 第36-37页 |
3.3 CsWRKY50基因响应黄瓜霜霉病菌的诱导 | 第37-38页 |
3.4 CsWRKY50基因的克隆 | 第38-43页 |
3.4.1 CsWRKY50蛋白的亚细胞定位 | 第39-40页 |
3.4.2 CsWRKY50基因的表达模式分析 | 第40-41页 |
3.4.3 启动子顺时作用元件分析 | 第41-43页 |
3.5 CsWRKY50基因逆境胁迫下的表达模式 | 第43-44页 |
3.6 CsWRKY50基因过表达载体的构建及遗传转化 | 第44-46页 |
3.6.1 CsWRKY50基因过表达载体的构建 | 第44-45页 |
3.6.2 CsWRKY50基因的遗传转化 | 第45页 |
3.6.3 CsWRKY50转基因植株验证 | 第45-46页 |
3.6.4 CsWRKY50过表达株系表达量的分析 | 第46页 |
3.7 CsWRKY50增强了黄瓜霜霉病的抗性 | 第46-50页 |
3.7.1 转基因株系中CsWRKY50基因的时空表达分析 | 第46-47页 |
3.7.2 CsWRKY50过表达株系表型鉴定 | 第47-48页 |
3.7.3 霜霉病菌处理后CsWRKY50基因表达量的分析 | 第48-49页 |
3.7.4 CsWRKY50过表达株系中死亡细胞减少 | 第49-50页 |
3.7.5 WT和过表达株系中叶绿素含量的分析 | 第50页 |
3.8 霜霉病菌对WT及转基因植株抗氧系统的影响 | 第50-56页 |
3.8.1 CsWRKY50抑制了活性氧的积累 | 第51页 |
3.8.2 WT和过表达株系中抗氧化酶活性的分析 | 第51-53页 |
3.8.3 WT和过表达株系中抗性物质含量的分析 | 第53-56页 |
3.9 CsWRKY50调控相关防御基因的表达 | 第56-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
4.1 CsWRKY50可能结合W-box元件来提高转录调控 | 第59页 |
4.2 CsWRKY50的过表达增强了黄瓜对霜霉病的抗性 | 第59-60页 |
4.3 CsWRKY50诱导SA的合成和相关防御基因的表达 | 第60-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
6 参考文献 | 第63-70页 |
7 附录 | 第70-73页 |
8 致谢 | 第73-74页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第74页 |