| 缩略词表 | 第3-4页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 AD的主要病理特点 | 第12-14页 |
| 1.1 老年斑 | 第12-13页 |
| 1.2 神经元纤维缠结 | 第13页 |
| 1.3 神经元丢失 | 第13-14页 |
| 1.4 突触丢失 | 第14页 |
| 2 AD的主要发病机制 | 第14-17页 |
| 2.1 Aβ 学说 | 第14-15页 |
| 2.2 Tau蛋白学说 | 第15页 |
| 2.3 氧化应激学说 | 第15-16页 |
| 2.4 神经炎症学说 | 第16-17页 |
| 2.5 胆碱能学说 | 第17页 |
| 3 AD中蛋白质异常折叠与聚集的研究进展 | 第17-18页 |
| 3.1 AD中蛋白质异常折叠与聚集的主要特点 | 第17页 |
| 3.2 机体防止蛋白质异常折叠与聚集的主要方法 | 第17-18页 |
| 3.3 热休克蛋白在防止蛋白质异常折叠与聚集的主要作用 | 第18页 |
| 4 热休克蛋白HSP70的研究进展及其与疾病的关系 | 第18-20页 |
| 4.1 热休克蛋白HSP70的基本结构 | 第18-19页 |
| 4.2 热休克蛋白HSP70的主要生物功能 | 第19页 |
| 4.3 热休克蛋白HSP70与疾病的关系 | 第19-20页 |
| 5 热休克蛋白HSP70与AD的关系 | 第20-21页 |
| 5.1 热休克蛋白HSP70与Aβ 的关系 | 第20页 |
| 5.2 热休克蛋白HSP70与Tau蛋白的关系 | 第20页 |
| 5.3 热休克蛋白HSP70与氧化应激的关系 | 第20-21页 |
| 5.4 热休克蛋白HSP70与炎症的关系 | 第21页 |
| 6 治疗痴呆症的古方和验方研究进展 | 第21-23页 |
| 7 课题的提出 | 第23-24页 |
| 第二章 构建可筛选HSP70启动子激活剂的细胞模型 | 第24-42页 |
| 1 前言 | 第24-25页 |
| 2 材料和试剂 | 第25-28页 |
| 2.1 试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 材料 | 第26页 |
| 2.3 菌株与载体 | 第26页 |
| 2.4 溶液的配制 | 第26-27页 |
| 2.5 主要仪器与设备 | 第27-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-35页 |
| 3.1 克隆HSPA1A Promoter基因 | 第28-30页 |
| 3.2 构建HSP70-p EGFP重组载体 | 第30-31页 |
| 3.3 构建pGL3-HSP70重组载体 | 第31-33页 |
| 3.4 构建基于pHSP70-EGFP重组载体的细胞筛选模型 | 第33-34页 |
| 3.5 构建基于pGL3-HSP70重组载体的细胞筛选模型 | 第34-35页 |
| 3.6 验证筛选HSP70启动子激活剂的细胞模型 | 第35页 |
| 4 结果 | 第35-40页 |
| 4.1 HSPA1A Promoter基因片段克隆结果 | 第35-36页 |
| 4.2 pHSP70-EGFP重组载体构建结果 | 第36-37页 |
| 4.3 pGL3-HSP70重组载体构建结果 | 第37-39页 |
| 4.4 筛选HSP70启动子激活剂的细胞模型构建结果 | 第39-40页 |
| 5 结论与讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 筛选HSP70启动子的激活剂 | 第42-55页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料 | 第42-43页 |
| 2.1 试剂 | 第42-43页 |
| 2.2 细胞 | 第43页 |
| 2.3 材料 | 第43页 |
| 2.4 培养液的配制 | 第43页 |
| 2.5 主要仪器与设备 | 第43页 |
| 3 实验方法 | 第43-44页 |
| 3.1 确定待筛选的单味药 | 第43-44页 |
| 3.2 制备单味药水煎液 | 第44页 |
| 3.3 MTT法确定单味药水煎液对HEK 293T细胞无明显毒性浓度范围 | 第44页 |
| 3.4 定性筛选HSP70激活剂 | 第44页 |
| 3.5 定量筛选HSP70激活剂 | 第44页 |
| 4 结果 | 第44-54页 |
| 4.1 待筛选单味药物的确定 | 第44-46页 |
| 4.2 单味药水煎液对HEK 293T细胞无明显毒性浓度范围确定 | 第46-47页 |
| 4.3 HSP70启动子激活剂的定性筛选 | 第47-48页 |
| 4.4 HSP70启动子激活剂的定量筛选 | 第48-54页 |
| 5 结论与讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 HSP70启动子激活剂对AD细胞损伤模型的保护作用研究 | 第55-65页 |
| 1 引言 | 第55页 |
| 2 材料和试剂 | 第55-56页 |
| 2.1 试剂 | 第55页 |
| 2.2 材料 | 第55-56页 |
| 2.3 细胞 | 第56页 |
| 2.4 溶液的配制 | 第56页 |
| 2.5 主要仪器与设备 | 第56页 |
| 3 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.1 PC12细胞的培养 | 第56-57页 |
| 3.2 Aβ_(25-35)的老化处理 | 第57页 |
| 3.3 MTT检测不同浓度的Aβ_(25-35)对PC12细胞的抑制作用 | 第57页 |
| 3.4 MTT检测HSP70激活剂水煎液对PC12细胞的抑制作用 | 第57页 |
| 3.5 MTT检测HSP70激活剂水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤模型的作用 | 第57页 |
| 3.6 LDH检测HSP70激活剂水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤模型的作用 | 第57页 |
| 3.7 黄芩水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞的活性氧的影响 | 第57页 |
| 3.8 Hoechst33258定性检测黄芩水煎液对H_2O_2所致PC12细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
| 3.9 AnnexinV/PI定量检测黄芩水煎液对H_2O_2所致PC12细胞凋亡的影响 | 第58页 |
| 4 实验结果 | 第58-64页 |
| 4.1 Aβ_(25-35)抑制PC12细胞生长的最佳浓度 | 第58页 |
| 4.2 HSP70启动子激活剂水煎液对PC12细胞无明显毒性浓度范围 | 第58-59页 |
| 4.3 HSP70启动子激活剂水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞毒性的抑制作用 | 第59-60页 |
| 4.4 HSP70启动子激活剂水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞膜结构破坏的抑制作用 | 第60-61页 |
| 4.5 黄芩水煎液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞内活性氧的调节 | 第61-62页 |
| 4.6 黄芩水煎液对H_2O_2所致PC12细胞凋亡的抑制作用定性结果 | 第62-63页 |
| 4.7 黄芩水煎液对H_2O_2所致PC12细胞凋亡的抑制作用定量结果 | 第63-64页 |
| 5 结论与讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 全文总结 | 第65-66页 |
| 1 主要结论 | 第65页 |
| 2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 攻读硕士学位期间已发表的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
