中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-6页 |
中英文对照及英文缩写词表 | 第6-9页 |
一 引言 | 第9-18页 |
1.肿瘤细胞代谢重编程 | 第9-12页 |
1.1 代谢重编程 | 第9-10页 |
1.2 致癌基因与抑癌基因调节代谢重编程 | 第10-11页 |
1.3 关键代谢酶活性变化调节代谢重编程 | 第11-12页 |
2.M2型丙酮酸激酶——PKM2 | 第12-15页 |
2.1 PKM2与代谢重编程 | 第13-14页 |
2.2 PKM2酶活性的别构调节 | 第14页 |
2.3 PKM2酶活性的翻译后修饰调节 | 第14-15页 |
3.O-GlcNAc糖基化修饰 | 第15-17页 |
3.1 O-GlcNAc糖基转移酶与糖苷水解酶 | 第15-16页 |
3.2 O-GlcNAc糖基化与HBP途径 | 第16-17页 |
3.3 关键代谢酶的O-GlcNAc糖基化调节细胞代谢重编程 | 第17页 |
4.立题依据与研究思路 | 第17-18页 |
二 材料与方法 | 第18-27页 |
1.主要实验材料和试剂 | 第18-19页 |
1.1 细胞 | 第18页 |
1.2 抗体及试剂 | 第18-19页 |
2.实验仪器 | 第19-20页 |
3.实验方法 | 第20-27页 |
3.1 细胞培养 | 第20页 |
3.2 RT-PCR | 第20-21页 |
3.3 实时荧光定量PCR | 第21页 |
3.4 免疫印迹 | 第21-22页 |
3.5 葡萄糖消耗速率测定法 | 第22-23页 |
3.6 乳酸产生速率测定法 | 第23-24页 |
3.7 ATP浓度测定法 | 第24-25页 |
3.8 染色质免疫沉淀 | 第25-26页 |
3.9 免疫荧光 | 第26页 |
3.10 核蛋白与浆蛋白提取 | 第26页 |
3.11 图像采集及数据分析 | 第26-27页 |
三 实验结果 | 第27-34页 |
1.O-GlcNAc糖基化促进人乳腺癌MCF-7细胞的Warburg效应 | 第27-28页 |
2.O-GlcNAc糖基化促进Glut1和LDHA的表达 | 第28-29页 |
3.O-GlcNAc糖基化促进Myc基因的表达 | 第29-30页 |
4.O-GlcNAc糖基化促进组蛋白H3的磷酸化与乙酰化 | 第30-31页 |
5.O-GlcNAc糖基化促进PKM2的核易位 | 第31-33页 |
6.O-GlcNAc糖基化促进PKM2依赖的Myc基因的表达 | 第33-34页 |
四 讨论 | 第34-37页 |
1.O-GlcNAc糖基化可能是通过上调Glut1和LDHA的表达促进MCF-7细胞的Warburg效应 | 第34页 |
2.O-GlcNAc糖基化可能是通过促进组蛋白H3T11的磷酸化与K9的乙酰化从而上调Myc基因的表达 | 第34-35页 |
3.O-GlcNAc糖基化可能是通过促进PKM2的核易位从而促进PKM2依赖的Myc基因的表达 | 第35-37页 |
五 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43页 |