| 摘要 | 第7-9页 |
| 英文缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 花色苷合成调控机制研究概况 | 第10-12页 |
| 1.1.1 花色苷代谢通路 | 第10页 |
| 1.1.2 花色苷结构与性质 | 第10-11页 |
| 1.1.3 转录因子在花色苷合成调控中研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 VIGS研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 VIGS原理 | 第12-13页 |
| 1.2.2 VIGS应用 | 第13-15页 |
| 1.2.3 VIGS载体 | 第15-16页 |
| 1.3 酵母双杂交技术 | 第16-18页 |
| 1.3.1 酵母双杂交原理 | 第16页 |
| 1.3.2 酵母双杂交应用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 酵母双杂交优缺点 | 第17-18页 |
| 1.4 酵母单杂交技术 | 第18-20页 |
| 1.4.1 酵母单杂交原理 | 第18-19页 |
| 1.4.2 酵母单杂交应用 | 第19页 |
| 1.4.3 酵母单杂交优缺点 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 葡萄VvmybA1VIGS功能分析 | 第21-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株、载体及主要生化试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第21-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 葡萄VvmybA1片段的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.2 克隆载体的构建 | 第25页 |
| 2.2.3 pTRV2-mybA1重组载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.4 农杆菌感受态的制备与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.5 农杆菌侵染 | 第28页 |
| 2.2.6 葡萄果实mybA1基因沉默分析 | 第28-30页 |
| 2.2.7 实时荧光定量(qRT-PCR)分析 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.3.1 VvmybA1基因片段克隆 | 第31页 |
| 2.3.2 pTRV2-mybA1表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 pTRV2-mybA1侵染红地球 | 第32-33页 |
| 2.3.4 pTRV2-mybA1侵染极早蜜 | 第33-34页 |
| 2.3.5 极早蜜葡萄果实总花色苷含量的测定 | 第34-35页 |
| 2.3.6 实时荧光定量分析 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 葡萄mybA1与DFR、UFGT蛋白互作分析 | 第38-52页 |
| 3.1 试验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 3.1.2 试剂配制 | 第38-39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 mybA1与DFR、UFGT生物信息学分析 | 第39页 |
| 3.2.2 mybA1与DFR、UFGT基因片段引物设计及PCR扩增 | 第39-41页 |
| 3.2.3 PCR扩增产物的回收 | 第41页 |
| 3.2.4 克隆载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.5 酵母载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.6 mybA1与DFR、UFGT的相互作用 | 第43-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.3.1 生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 克隆载体的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.3 酵母重组质粒的构建与鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.4 VvmybA1、VvUFGT、VvDFR转录激活功能分析及毒性检测 | 第48-49页 |
| 3.3.5 蛋白互作分析 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 mybA1与DFR、UFGT启动子作用分析 | 第52-60页 |
| 4.1 试验材料 | 第52页 |
| 4.2 试验方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 DFR、UFGT启动子分析 | 第52页 |
| 4.2.2 酵母单杂交载体的构建 | 第52-53页 |
| 4.2.3 诱饵元件载体单酶切 | 第53页 |
| 4.2.4 酵母感受态制备 | 第53-54页 |
| 4.2.5 酵母细胞中的转化和自激活分析 | 第54页 |
| 4.2.6 诱饵菌株感受态制备 | 第54-55页 |
| 4.2.7 酵母单杂交验证转化 | 第55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-58页 |
| 4.3.1 DFR、UFGT启动子分析 | 第55-56页 |
| 4.3.2 诱饵载体自激活分析 | 第56-57页 |
| 4.3.3 酵母单杂交分析 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| Abstract | 第70-71页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
