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拟南芥miRNAs及转录因子MYB96对离体苗再生的调控作用研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-22页
缩略词第22-23页
第一章 文献综述第23-61页
   ·植物离体器官发生第23-32页
     ·植物离体器官发生的研究过程第23-24页
     ·植物细胞全能性第24页
     ·植物细胞全能性的提出第24-25页
     ·离体植株再生途径第25-27页
       ·体细胞胚发生途径第25-26页
       ·离体器官发生途径第26-27页
     ·模式植物拟南芥离体器官发生第27页
     ·离体器官发生相关基因的鉴别第27-31页
     ·植物激素对离体器官发生的影响第31-32页
     ·表观遗传对离体器官发生和愈伤组织形成的影响第32页
   ·植物干细胞第32-43页
     ·植物茎尖分生组织(SAM)的形成及组织学特征第33-34页
     ·植物茎尖生长点干细胞维持第34-37页
     ·植物生根尖分生组织(RAM)的形成与特征第37页
     ·植物根尖生长点干细胞的维持第37-38页
     ·植物干细胞的分化和器官发生第38-39页
     ·植物器官的形态建成第39-40页
     ·植物激素在干细胞维持与分化中的作用第40-42页
     ·植物干细胞的表观遗传学研究第42-43页
   ·MYB转录因子第43-51页
     ·MYB转录因子成员及分类第43-44页
     ·R2R3-MYB转录因子的作用第44-51页
       ·调节植物细胞的命运和身份确定第44-45页
       ·R2R3-MYB蛋白对拟南芥的发育的调控第45-47页
       ·R2R3-MYB参与拟南芥根发育的调控第47-49页
       ·参与对植物激素的应答第49页
       ·参与调控植物逆境胁迫第49-51页
   ·MicroRNA第51-58页
     ·MiRNA的生物合成第51-52页
     ·植物miRNA的作用机制第52-53页
     ·miRNAs在拟南芥发育中的功能第53-56页
     ·MiRNAs功能的研究方法第56页
     ·MiRNA表达检测技术进展第56-58页
       ·Northern杂交第56-57页
       ·基因芯片第57页
       ·原位杂交第57页
       ·半定量RT-PCR第57-58页
         ·实时定量PCR第58页
   ·研究目的及立题意义第58-61页
第二章 拟南芥miRNAs在离体苗再生和细胞增殖中的功能研究第61-109页
 前言第61页
 1 实验材料第61-65页
 2 实验方法第65-82页
 3 结果与分析第82-105页
   ·拟南芥胚性与非胚性愈伤组织的获得第82-83页
   ·拟南芥胚性与非胚性愈伤组织的组织学特征第83-84页
   ·胚性愈伤组织C1与非胚性愈伤组织C2miRNAs表达谱分析第84-86页
     ·C1和C2的RNA提取及质量检测第84-85页
     ·芯片检测结果第85页
     ·C1和C2中的miRNAs表达差异比较分析第85-86页
   ·芯片结果的验证第86-87页
   ·候选miRNAs的靶基因在C1和C2中的表达模式第87-89页
   ·miRNAs在愈伤组织形成、离体苗及根再生过程中的表达模式第89-92页
     ·miRNAs在CIM、SIM及RIM培养早期的表达模式第89-90页
     ·miRNAs在CIM及SIM延长培养过程中的表达模式第90-91页
     ·pmiR859-miR774::GUS转基因植株的GUS表达模式分析第91-92页
   ·在C1中高表达的miRNAs在植株体内的表达模式第92-93页
   ·候选miRNAs对拟南芥离体苗再生的影响第93-95页
   ·过表达miR160a抑制离体苗的再生第95页
   ·mARF10显著提高离体苗的再生能力第95-97页
   ·ARF10在离体苗再生中的表达模式第97-98页
   ·ARF10影响离体苗再生能力的可能机制第98-102页
     ·离体苗再生相关基因在体内的表达模式第98-100页
     ·离体苗再生相关基因在体外根培养物中的表达模式第100-102页
   ·候选miRNAs对体外细胞增殖的影响第102-104页
   ·MiRNAs在体外细胞增殖过程中的表达模式第104-105页
 4 讨论第105-109页
第三章 生长素受体基因TIR1对离体苗再生的作用第109-121页
 前言第109页
 1 实验材料第109页
 2 实验方法第109-111页
 3 结果与分析第111-118页
   ·TIR1在体外培养条件下的表达模式第111-112页
   ·TIR1在不同的培养基上的表达模式第112-113页
   ·TIR1在植株体内的时空表达模式第113-114页
   ·TIR1对体外离体苗再生的影响第114-115页
   ·延长CIM培养不能恢复tir1-1离体苗再生能力的降低第115-116页
   ·TIR1对体外细胞增殖的影响第116-117页
   ·TIR1影响离体苗再生的可能机制第117-118页
 4 讨论第118-121页
第四章 拟南芥MYB96转录因子调控体外细胞增殖及离体苗再生第121-148页
 前言第121页
 1 实验材料第121-122页
 2 实验方法第122-127页
 3 实验结果第127-146页
   ·MYB96过表达系及敲除系的分离及表型第127-128页
   ·MYB96在体外培养过程中的表达模式第128-129页
   ·MYB96在愈伤组织形成过程中的表达模式第129-131页
   ·MYB96在体外离体苗再生中的表达模式第131-132页
   ·MYB96对体外细胞增殖的作用第132-133页
   ·MYB96对体外离体苗再生的作用第133-134页
   ·MYB96对体外离体根再生的作用第134-135页
   ·MYB96影响体外细胞增殖、离体苗和根再生的可能机制第135-143页
     ·细胞增殖相关基因在Col-0、myb96-1d和myb96-1中表达分析第135-139页
       ·细胞分裂标记基因CYCB1;1的表达变化第135-137页
       ·DR5的表达变化第137-139页
     ·离体苗再生相关基因在Col-0、myb96-1d和myb96-1表达分析第139-140页
     ·myb96-1d离体根再生能力下降的可能原因第140-143页
       ·RT-PCR分析第140页
       ·MYB96高表达影响根分生组织的维持第140-143页
   ·与MYB96直接结合的下游目标基因的发掘第143-146页
     ·ChIP分析第143-144页
     ·ChIP-sequence分析第144-146页
 4 讨论第146-148页
第五章 MYB96调控干旱条件下的侧根发育第148-175页
 前言第148页
 1 实验材料第148-149页
 2 实验方法第149-153页
 3 实验结果第153-172页
   ·MYB96突变体表型分析第153-154页
   ·MYB96的表达模式分析第154-158页
     ·亚细胞定位第154-155页
     ·时空表达模式分析第155-156页
     ·非生物胁迫对拟南芥MYB96表达的影响第156-157页
     ·各种植物激素对拟南芥MYB96的表达的影响第157-158页
   ·MYB96调控ABA介导的拟南芥干旱胁迫耐受性第158-163页
     ·过表达MYB96能够提高逆南芥的干旱耐受性第158-159页
     ·回复验证第159-160页
     ·myb96-1d和myb96-1叶片气孔对ABA处理的响应第160-161页
     ·MYB96通过ABA依赖途径中的RD22调控拟南芥干旱胁迫耐受第161-163页
   ·ABA处理对myb96-1d和myb96-1发芽率的影响第163-164页
   ·MYB96调控侧根发育第164-172页
     ·ABA处理对myb96-1d和myb96-1侧根发育的影响第164-165页
     ·IAA在根组织中特异性的诱导MYB96的表达第165-167页
     ·侧根发生或发育相关基因在myb96-1d和myb96-1中的表达模式第167-168页
     ·外源生长素处理条件下上述候选基因的表达变化情况第168-169页
     ·MYB96介导的ABA信号通过GH3整合进入了生长素信号途径第169-170页
     ·myb96-1d侧根减少的表型不能够被外源生长素完全恢复第170-172页
 4 讨论第172-175页
论文创新点第175-177页
参考文献第177-198页
附表1 本研究中用到的部分引物(5’-3’)第198-200页
附图1 ARF10对KT和2-IP的响应第200-201页
研究生期间发表的论文情况第201-203页
致谢第203-205页
学位论文评阅及答辩情况表第205页

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