致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 硫氧还蛋白系统的研究与利用现状 | 第11-15页 |
·硫氧还蛋白 | 第11-12页 |
·硫氧还蛋白还原酶 | 第12-13页 |
·硫氧还蛋白系统 | 第13-14页 |
·食物蛋白中引起的过敏 | 第14页 |
·本研究的内容与目的 | 第14-15页 |
2 黑曲霉硫氧还蛋白的基因克隆、表达及保守位点活性分析 | 第15-21页 |
·材料与方法 | 第15-17页 |
·菌种 | 第15页 |
·化学试剂和载体 | 第15页 |
·AnTrx的克隆及其三个突变基因的构建 | 第15-16页 |
·AnTrx及其点突变基因的异源表达及分离纯化 | 第16-17页 |
·AnTrx及其三个突变蛋白的酶活测定 | 第17页 |
·结果与分析 | 第17-19页 |
·AnTrx及其三个点突变基因的表达与分离纯化 | 第17-18页 |
·AnTrx及其点突变子的二硫键还原酶活性 | 第18-19页 |
·讨论 | 第19-21页 |
3 黑曲霉硫氧还蛋白还原酶的基因克隆、表达及酶活特征 | 第21-25页 |
·材料与方法 | 第21-22页 |
·菌种、试剂及载体 | 第21页 |
·AnTrxR的克隆 | 第21-22页 |
·AnTrxR的异源表达及分离纯化 | 第22页 |
·AnTrxR全酶的重构 | 第22页 |
·AnTrxR的活性测定 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-24页 |
·基因AnTrxR的表达及分离纯化 | 第22-23页 |
·AnTrxR全酶的酶活测定 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-25页 |
4 黑曲酶AnTrx系统的酶活特征及处理食物过敏原的应用潜力 | 第25-34页 |
·材料与方法 | 第26-28页 |
·材料 | 第26页 |
·融合基因的构建 | 第26页 |
·AnTrxR的异源表达及分离纯化 | 第26页 |
·融合蛋白全酶的重构 | 第26页 |
·AnTrx及其四个融合蛋白的酶活测定 | 第26页 |
·酶动力学测定与分析 | 第26-27页 |
·最适反应温度和热稳定性测定 | 第27-28页 |
·麦醇溶蛋白的还原 | 第28页 |
·结果 | 第28-32页 |
·融合蛋白的表达和纯化 | 第28-29页 |
·AnTrx及其融合蛋白中AnTrx部分的活性比较 | 第29页 |
·融合蛋白与亲本蛋白的酶动力学参数比较 | 第29-31页 |
·AnTrx系统的最适反应温度和热稳定性 | 第31页 |
·麦醇溶蛋白的还原 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
5 问题与展望 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
SUMMARY | 第39-42页 |
附录:在读期间学术成果 | 第42页 |