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黑曲霉硫氧还蛋白体系基因的克隆、鉴定、融合及其在食品工程中的应用

致谢第1-9页
摘要第9-11页
1 硫氧还蛋白系统的研究与利用现状第11-15页
   ·硫氧还蛋白第11-12页
   ·硫氧还蛋白还原酶第12-13页
   ·硫氧还蛋白系统第13-14页
   ·食物蛋白中引起的过敏第14页
   ·本研究的内容与目的第14-15页
2 黑曲霉硫氧还蛋白的基因克隆、表达及保守位点活性分析第15-21页
   ·材料与方法第15-17页
     ·菌种第15页
     ·化学试剂和载体第15页
     ·AnTrx的克隆及其三个突变基因的构建第15-16页
     ·AnTrx及其点突变基因的异源表达及分离纯化第16-17页
     ·AnTrx及其三个突变蛋白的酶活测定第17页
   ·结果与分析第17-19页
     ·AnTrx及其三个点突变基因的表达与分离纯化第17-18页
     ·AnTrx及其点突变子的二硫键还原酶活性第18-19页
   ·讨论第19-21页
3 黑曲霉硫氧还蛋白还原酶的基因克隆、表达及酶活特征第21-25页
   ·材料与方法第21-22页
     ·菌种、试剂及载体第21页
     ·AnTrxR的克隆第21-22页
     ·AnTrxR的异源表达及分离纯化第22页
     ·AnTrxR全酶的重构第22页
     ·AnTrxR的活性测定第22页
   ·结果与分析第22-24页
     ·基因AnTrxR的表达及分离纯化第22-23页
     ·AnTrxR全酶的酶活测定第23-24页
   ·讨论第24-25页
4 黑曲酶AnTrx系统的酶活特征及处理食物过敏原的应用潜力第25-34页
   ·材料与方法第26-28页
     ·材料第26页
     ·融合基因的构建第26页
     ·AnTrxR的异源表达及分离纯化第26页
     ·融合蛋白全酶的重构第26页
     ·AnTrx及其四个融合蛋白的酶活测定第26页
     ·酶动力学测定与分析第26-27页
     ·最适反应温度和热稳定性测定第27-28页
     ·麦醇溶蛋白的还原第28页
   ·结果第28-32页
     ·融合蛋白的表达和纯化第28-29页
     ·AnTrx及其融合蛋白中AnTrx部分的活性比较第29页
     ·融合蛋白与亲本蛋白的酶动力学参数比较第29-31页
     ·AnTrx系统的最适反应温度和热稳定性第31页
     ·麦醇溶蛋白的还原第31-32页
   ·讨论第32-34页
5 问题与展望第34-35页
参考文献第35-39页
SUMMARY第39-42页
附录:在读期间学术成果第42页

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