| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 卵巢内部的自分泌/旁分泌作用 | 第15-17页 |
| 1.1.1 卵巢发育的调控机制 | 第15页 |
| 1.1.2 脊椎动物卵巢内部的自分泌/旁分泌作用研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.3 甲壳类卵巢内部的自分泌/旁分泌作用研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 TGF-β家族研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 TGF-β家族概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 TGF-β家族在卵巢中的自分泌/旁分泌作用研究 | 第18-19页 |
| 1.3 BMP研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 BMP家族概述 | 第19-20页 |
| 1.3.2 BMP家族的自分泌/旁分泌作用研究 | 第20-21页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 拟穴青蟹BMP7及其受体在卵巢发育过程中的功能探究 | 第23-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-28页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第25-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-43页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第28-29页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第29页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
| 2.2.4 SpBMP基因的克隆和测序 | 第30-36页 |
| 2.2.5 SpBMP序列分析 | 第36-37页 |
| 2.2.6 SpBMP基因在雌蟹中的表达谱分析 | 第37-38页 |
| 2.2.7 SpBMP基因在卵巢中的定位 | 第38-42页 |
| 2.2.8 体外基因沉默实验 | 第42-43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-52页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第43-44页 |
| 2.3.2 SpBMP基因cDNA的序列特征 | 第44-46页 |
| 2.3.3 SpBMP基因在不同组织和不同卵巢发育阶段的表达模式 | 第46-48页 |
| 2.3.4 SpBMP在卵巢内部中的定位 | 第48-50页 |
| 2.3.5 SpBMPRs体外干扰 | 第50-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-55页 |
| 2.5 小结 | 第55-56页 |
| 第三章 BMP7在拟穴青蟹卵母细胞成熟中的旁分泌作用机制研究 | 第56-74页 |
| 3.1 实验材料 | 第57页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第57页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第57页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-62页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第57-58页 |
| 3.2.2 卵母细胞和滤泡细胞的分离 | 第58页 |
| 3.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第58-59页 |
| 3.2.4 SpBMP7、SpBMPRs在卵母细胞和滤泡细胞中的半定量检测 | 第59页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第59页 |
| 3.2.6 离体实验:SpBMP7对卵母细胞成熟的作用 | 第59-60页 |
| 3.2.7 蛋白质印迹法(Western blotting) | 第60-61页 |
| 3.2.8 体外RNA干扰实验 | 第61页 |
| 3.2.9 数据分析 | 第61-62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-69页 |
| 3.3.1 卵母细胞和滤泡细胞组织学观察 | 第62页 |
| 3.3.2 SpBMP7、SpBMPRIB和SpBMPRII在卵巢内部的表达 | 第62-63页 |
| 3.3.3 SpBMP7对卵母细胞成熟的影响 | 第63-68页 |
| 3.3.4 干扰SpBMP7对卵母细胞成熟的影响 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-72页 |
| 3.5 小结 | 第72-74页 |
| 第四章 结语 | 第74-77页 |
| 4.1 主要研究成果 | 第74-75页 |
| 4.2 主要创新点 | 第75页 |
| 4.3 研究展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 在校期间参与的科研项目及成果 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
