| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-27页 |
| 2.1 主要材料及试剂 | 第13-14页 |
| 2.2 主要设备和仪器 | 第14-15页 |
| 2.3 主要试剂的配制 | 第15-16页 |
| 2.4 主要实验方法 | 第16-26页 |
| 2.4.1 重组质粒(opn-shRNA)的构建及最佳opn-shRNA的筛选 | 第16-20页 |
| 2.4.2 脂肪组织特异性表达载体aP2-EGFP-SV40-Neo的构建与细胞转染预实验 | 第20-21页 |
| 2.4.3 脂肪组织特异性腺病毒Ad-aP2-opn-shRNA的制备 | 第21-22页 |
| 2.4.4 腺病毒Ad-aP2-opn-shRNA感染3T3-L1细胞预实验及脂肪组织特异性的验证 | 第22-23页 |
| 2.4.5 3T3-L1细胞的培养 | 第23-24页 |
| 2.4.6 Ad-aP2-opn-shRNA感染对3T3-L1细胞分化影响的实验 | 第24-25页 |
| 2.4.7 油红O染色法3T3-L1前脂肪细胞分化情况 | 第25页 |
| 2.4.8 Western blot检测iOPN及成熟BA特异性分子Makers表达情况. | 第25页 |
| 2.4.9 ELISA法检测细胞培养上清液中sOPN水平 | 第25-26页 |
| 2.5 数据处理及统计分析 | 第26-27页 |
| 第3章 实验结果 | 第27-40页 |
| 3.1 重组opn-shRNA质粒的构建及最佳opn-shRNA序列的筛选 | 第27-28页 |
| 3.1.1 成功构建针对opn基因的三条靶向干扰质粒opn-shRNA | 第27-28页 |
| 3.1.2 shRNA干扰序列(opn-shRNA)的筛选 | 第28页 |
| 3.2 脂肪组织特异性表达载体aP2-EGFP-SV40-Neo的构建与细胞转染预实验 | 第28-33页 |
| 3.3 脂肪组织特异性腺病毒Ad-aP2-opn-shRNA的制备及病毒滴度测定 | 第33-36页 |
| 3.4 腺病毒Ad-aP2-opn-shRNA感染3T3-L1细胞预实验 | 第36-37页 |
| 3.5 油红O染色法3T3-L1前脂肪细胞分化情况 | 第37页 |
| 3.6 腺病毒感染3T3-L1细胞后iOPN(胞内型OPN)蛋白的表达情况 | 第37-38页 |
| 3.7 细胞分化后成熟BA特异性分子Markers表达情况 | 第38页 |
| 3.8 ELISA法检测细胞培养上清液中sOPN水平 | 第38-40页 |
| 第4章 讨论 | 第40-43页 |
| 第5章 结论与展望 | 第43-44页 |
| 5.1 结论 | 第43页 |
| 5.2 下一步研究方向 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 综述 | 第49-55页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
