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褪黑素通过Septin7诱导内质网应激介导成骨细胞自噬和凋亡的相关性研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-16页
第一部分 :高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡第16-28页
    1 前言第16-18页
    2 材料与方法第18-22页
        2.1 实验材料第18-19页
            2.1.1 化学试剂第18页
            2.1.2 抗体第18页
            2.1.3 主要实验仪器第18页
            2.1.4 细胞株第18-19页
        2.2 实验方法第19-22页
            2.2.1 细胞复苏第19页
            2.2.2 细胞培养第19页
            2.2.3 细胞冻存第19页
            2.2.4 细胞计数第19页
            2.2.5 MTT法检测细胞增殖第19-20页
            2.2.6 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率第20页
            2.2.7 Hoechst33342染色观察细胞核内染色质凝集第20页
            2.2.8 Western blot检测蛋白表达第20-21页
            2.2.9 统计学方法第21-22页
    3 实验结果第22-26页
        3.1 高浓度褪黑素抑制成骨细胞增殖第22-23页
        3.2 高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡第23-24页
        3.3 高浓度褪黑素引起成骨细胞核内致密浓染,产生凋亡小体第24-25页
        3.4 高浓度褪黑素上调凋亡蛋白PARP-1表达第25-26页
    4 讨论第26-27页
    5 结论第27-28页
第二部分 :高浓度褪黑素诱导内质网应激介导成骨细胞自噬第28-39页
    1 前言第28-30页
    2 材料与方法第30-34页
        2.1 实验材料第30页
            2.1.1 化学试剂第30页
            2.1.2 抗体第30页
            2.1.3 主要实验仪器第30页
            2.1.4 细胞株第30页
        2.2 实验方法第30-34页
            2.2.1 细胞复苏第31页
            2.2.2 细胞培养第31页
            2.2.3 细胞冻存第31页
            2.2.4 细胞计数第31页
            2.2.5 MDC染色观察自噬体第31-32页
            2.2.6 Western blot检测蛋白表达第32-33页
            2.2.7 统计学分析第33-34页
    3 实验结果第34-37页
        3.1 高浓度褪黑素诱导成骨细胞内自噬体的产生第34页
        3.2 高浓度褪黑素上调自噬标志性蛋白LC3-II的表达第34-35页
        3.3 高浓度褪黑素上调内质网应激标志性蛋白GRP78和CHOP的表达第35-37页
    4 讨论第37-38页
    5 结论第38-39页
第三部分 :高浓度褪黑素通过septin7诱导内质网应激介导成骨细胞凋亡与自噬第39-50页
    1 前言第39-40页
    2 材料与方法第40-44页
        2.1 实验材料第40页
            2.1.1 化学试剂第40页
            2.1.2 抗体第40页
            2.1.3 主要实验仪器第40页
            2.1.4 细胞株第40页
        2.2 实验方法第40-44页
            2.2.1 细胞复苏第41页
            2.2.2 细胞培养第41页
            2.2.3 细胞冻存第41页
            2.2.4 细胞计数第41页
            2.2.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率第41-42页
            2.2.6 Ssptin7 siRNA转染第42页
            2.2.7 高表达质粒构建与回复实验第42页
            2.2.8 Western blot检测蛋白表达第42-43页
            2.2.9 统计学分析第43-44页
    3 实验结果第44-47页
        3.1 高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡与内质网应激和自噬的关系第44-45页
        3.2 Septin7与褪黑素诱导内质网应激的关系第45-47页
    4 讨论第47-49页
    5 结论第49-50页
本研究创新性的自我评价第50-51页
参考文献第51-59页
综述第59-70页
    参考文献第65-70页
攻读学位期间所取得的研究成果第70-71页
致谢第71-72页
个人简介第72页

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