摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-16页 |
第一部分 :高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡 | 第16-28页 |
1 前言 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-22页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 化学试剂 | 第18页 |
2.1.2 抗体 | 第18页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第18页 |
2.1.4 细胞株 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-22页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第19页 |
2.2.2 细胞培养 | 第19页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第19页 |
2.2.4 细胞计数 | 第19页 |
2.2.5 MTT法检测细胞增殖 | 第19-20页 |
2.2.6 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第20页 |
2.2.7 Hoechst33342染色观察细胞核内染色质凝集 | 第20页 |
2.2.8 Western blot检测蛋白表达 | 第20-21页 |
2.2.9 统计学方法 | 第21-22页 |
3 实验结果 | 第22-26页 |
3.1 高浓度褪黑素抑制成骨细胞增殖 | 第22-23页 |
3.2 高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡 | 第23-24页 |
3.3 高浓度褪黑素引起成骨细胞核内致密浓染,产生凋亡小体 | 第24-25页 |
3.4 高浓度褪黑素上调凋亡蛋白PARP-1表达 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
5 结论 | 第27-28页 |
第二部分 :高浓度褪黑素诱导内质网应激介导成骨细胞自噬 | 第28-39页 |
1 前言 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-34页 |
2.1 实验材料 | 第30页 |
2.1.1 化学试剂 | 第30页 |
2.1.2 抗体 | 第30页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第30页 |
2.1.4 细胞株 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-34页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第31页 |
2.2.2 细胞培养 | 第31页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第31页 |
2.2.4 细胞计数 | 第31页 |
2.2.5 MDC染色观察自噬体 | 第31-32页 |
2.2.6 Western blot检测蛋白表达 | 第32-33页 |
2.2.7 统计学分析 | 第33-34页 |
3 实验结果 | 第34-37页 |
3.1 高浓度褪黑素诱导成骨细胞内自噬体的产生 | 第34页 |
3.2 高浓度褪黑素上调自噬标志性蛋白LC3-II的表达 | 第34-35页 |
3.3 高浓度褪黑素上调内质网应激标志性蛋白GRP78和CHOP的表达 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
第三部分 :高浓度褪黑素通过septin7诱导内质网应激介导成骨细胞凋亡与自噬 | 第39-50页 |
1 前言 | 第39-40页 |
2 材料与方法 | 第40-44页 |
2.1 实验材料 | 第40页 |
2.1.1 化学试剂 | 第40页 |
2.1.2 抗体 | 第40页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第40页 |
2.1.4 细胞株 | 第40页 |
2.2 实验方法 | 第40-44页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第41页 |
2.2.2 细胞培养 | 第41页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第41页 |
2.2.4 细胞计数 | 第41页 |
2.2.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第41-42页 |
2.2.6 Ssptin7 siRNA转染 | 第42页 |
2.2.7 高表达质粒构建与回复实验 | 第42页 |
2.2.8 Western blot检测蛋白表达 | 第42-43页 |
2.2.9 统计学分析 | 第43-44页 |
3 实验结果 | 第44-47页 |
3.1 高浓度褪黑素诱导成骨细胞凋亡与内质网应激和自噬的关系 | 第44-45页 |
3.2 Septin7与褪黑素诱导内质网应激的关系 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
本研究创新性的自我评价 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
综述 | 第59-70页 |
参考文献 | 第65-70页 |
攻读学位期间所取得的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简介 | 第72页 |