中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第13-38页 |
1.1 基因治疗 | 第13-23页 |
1.1.1 非病毒基因载体的分类 | 第13-16页 |
1.1.1.1 脂质体 | 第13-15页 |
1.1.1.2 阳离子聚合物 | 第15-16页 |
1.1.2 刺激敏感的纳米载体 | 第16-23页 |
1.1.2.1 酸敏感的纳米载体 | 第16-17页 |
1.1.2.2 酶敏感的纳米载体 | 第17-18页 |
1.1.2.3 还原敏感的纳米载体 | 第18-20页 |
1.1.2.4 ROS敏感的纳米载体 | 第20-23页 |
1.2 心脏缺血再灌注损伤 | 第23-25页 |
1.3 RNA干扰 | 第25-26页 |
1.4 课题设计 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-38页 |
第二章 联碲交联的聚乙烯亚胺用于肿瘤细胞ROS响应性DNA递送 | 第38-62页 |
2.1 引言 | 第38-39页 |
2.2 实验材料与设备 | 第39-40页 |
2.3 实验方法 | 第40-45页 |
2.3.1 PEI-TeTe和PEI-SeSe的合成(Scheme 2) | 第40-42页 |
2.3.1.1 联碲聚合物PEI-TeTe的合成 | 第41页 |
2.3.1.2 联硒聚合物PEI-SeSe的合成 | 第41-42页 |
2.3.2 聚合物ROS响应性研究 | 第42页 |
2.3.3 复合物的制备 | 第42页 |
2.3.4 粒径和Zeta电位 | 第42-43页 |
2.3.5 琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第43页 |
2.3.6 EB排阻实验 | 第43页 |
2.3.7 肝素钠置换实验 | 第43页 |
2.3.8 胞内动力学研究 | 第43-44页 |
2.3.9 体外转染 | 第44页 |
2.3.10 细胞毒性 | 第44-45页 |
2.3.11 体内转染 | 第45页 |
2.4. 结果与讨论 | 第45-58页 |
2.4.1 单体化学结构表征 | 第45-47页 |
2.4.2 聚合物ROS响应性研究 | 第47-48页 |
2.4.3 DNA的缩合和释放研究 | 第48-52页 |
2.4.4 胞内动力学研究 | 第52-55页 |
2.4.5 体外转染 | 第55-56页 |
2.4.6 细胞毒性 | 第56-57页 |
2.4.7 体内转染 | 第57-58页 |
2.5. 小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
第三章 心脏血管内皮细胞靶向的ROS响应性基因载体介导ICAM-1siRNA治疗心肌缺血再灌注损伤 | 第62-94页 |
3.1 引言 | 第62-63页 |
3.2 实验材料和设备 | 第63-64页 |
3.3 实验方法 | 第64-71页 |
3.3.1 PEI-TeTe (PT)的合成 | 第64-65页 |
3.3.2 RPPT的的合成 | 第65页 |
3.3.3 RPPT的ROS敏感性研究 | 第65页 |
3.3.4 复合物的制备 | 第65-66页 |
3.3.5 琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第66页 |
3.3.6 粒径和Zeta电位 | 第66页 |
3.3.7 细胞内动力学 | 第66-67页 |
3.3.8 体外转染 | 第67页 |
3.3.9 体内组织分布 | 第67-68页 |
3.3.10 体内转染 | 第68-69页 |
3.3.10.1 心脏缺血再灌注损伤模型的建立 | 第68页 |
3.3.10.2 Real time-PCR检测ICAM-1基因的表达 | 第68-69页 |
3.3.10.3 Western blot | 第69页 |
3.3.10.4 免疫荧光 | 第69页 |
3.3.11 心脏超声检测 | 第69-70页 |
3.3.12 心肌缺血面积检测 | 第70页 |
3.3.13 心脏组织坏死研究 | 第70页 |
3.3.14 RPPT/siICAM-1复合物抗心肌细胞凋亡研究 | 第70页 |
3.3.15 心脏纤维化研究 | 第70-71页 |
3.4 结果与讨论 | 第71-90页 |
3.4.1 载体ROS敏感性研究 | 第71页 |
3.4.2 siRNA的缩合和释放研究 | 第71-73页 |
3.4.3 RPPT/siRNA复合物的稳定性研究 | 第73页 |
3.4.4 胞内动力学研究 | 第73-75页 |
3.4.5 体外转染 | 第75-77页 |
3.4.6 RPPT的细胞毒性 | 第77-78页 |
3.4.7 体内组织分布 | 第78-79页 |
3.4.8 体内转染 | 第79-83页 |
3.4.9 抗炎效果研究 | 第83-86页 |
3.4.10 心肌缺血面积研究 | 第86页 |
3.4.11 心肌纤维化研究 | 第86-88页 |
3.4.12 RPPT/siICAM-1复合物抗心肌细胞凋亡研究 | 第88-89页 |
3.4.13 心脏组织坏死研究 | 第89页 |
3.4.14 心脏功能研究 | 第89-90页 |
3.5 小结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-94页 |
第五章 总结与展望 | 第94-95页 |
5.1 总结 | 第94页 |
5.2 展望 | 第94-95页 |
个人简历 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |