| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 类受体蛋白激酶研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2 类受体蛋白诱导植物抗病的作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2.1 类受体蛋白激酶的磷酸化反应和抗病防御反应 | 第15页 |
| 1.2.2 类受体蛋白激酶的去磷酸化反应与抗病防御反应 | 第15-16页 |
| 1.3 植物磷酸化蛋白质组研究现状 | 第16-17页 |
| 1.4 棉花黄萎病的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.4.1 棉花黄萎病及其危害 | 第17页 |
| 1.4.2 棉花黄萎病的致病机制 | 第17-18页 |
| 1.4.3 棉花黄萎病的抗性机制 | 第18页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 黄萎病菌诱导的陆地棉不同抗性品种根部蛋白磷酸化分析 | 第20-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 供试菌株 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 材料准备 | 第20页 |
| 2.2.2 非标记定量蛋白质组学流程 | 第20-22页 |
| 2.2.2.1 蛋白质的裂解和定量 | 第20-21页 |
| 2.2.2.2 蛋白质的SDS-PAGE试验 | 第21页 |
| 2.2.2.3 蛋白质的酶解及肽段检测、脱盐 | 第21页 |
| 2.2.2.4 磷酸化肽段的富集 | 第21页 |
| 2.2.2.5 酶解产物的LCMS/MS分析 | 第21页 |
| 2.2.2.6 Maxquant的非标记分析 | 第21-22页 |
| 2.3 实验结果 | 第22-26页 |
| 2.3.1 黄萎病菌诱导的棉花根部蛋白的磷酸化分析 | 第22-23页 |
| 2.3.2 黄萎病菌诱导的棉花根部磷酸化蛋白的生物功能分类 | 第23-25页 |
| 2.3.3 差异磷酸化蛋白质的修饰特征分析 | 第25页 |
| 2.3.4 GhPR5K蛋白的初步分析 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 陆地棉GhPR5K基因的克隆及序列分析 | 第27-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 载体与菌株 | 第27页 |
| 3.1.3 酶及其他试剂耗材、试剂盒 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.2.2 总RNA的提取及反转录 | 第27-29页 |
| 3.2.3 目的基因的克隆 | 第29-30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-32页 |
| 3.3.1 RNA提取结果 | 第30-31页 |
| 3.3.2 GhPR5K基因的克隆 | 第31页 |
| 3.3.3 GhPR5K基因的结构分析 | 第31-32页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 GhPR5K基因在棉花中的功能验证 | 第33-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 4.1.2 酶、生化试剂及仪器耗材 | 第33页 |
| 4.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 4.2.1 VIGS研究GhPR5K基因的功能 | 第33-37页 |
| 4.2.2 超表达烟草研究GhPR5K基因的功能 | 第37-38页 |
| 4.3 实验结果 | 第38-42页 |
| 4.3.1 VIGS实验结果 | 第38-40页 |
| 4.3.2 超表达烟草实验结果 | 第40-42页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 GhPR5K基因在棉花中的抗病机制 | 第43-50页 |
| 5.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 5.1.2 生化试剂及仪器耗材 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 5.2.1 植物叶片过氧化氢积累检测 | 第43页 |
| 5.2.2 植物木质化检测 | 第43页 |
| 5.2.3 植物叶片台盼蓝染色 | 第43-44页 |
| 5.2.4 病原菌再分离实验 | 第44页 |
| 5.2.5 抗病相关基因的表达量测定 | 第44-45页 |
| 5.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 5.3.1 植物叶片过氧化氢积累情况 | 第45-46页 |
| 5.3.2 植物木质部染色情况 | 第46页 |
| 5.3.3 植物叶片台盼蓝染色情况 | 第46-47页 |
| 5.3.4 病原菌再分离实验结果 | 第47页 |
| 5.3.5 抗病相关基因的表达量测定 | 第47-48页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第六章 GhPR5K互作蛋白的筛选及相互作用验证 | 第50-61页 |
| 6.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第50页 |
| 6.1.2 菌株与质粒 | 第50页 |
| 6.1.3 工具酶及试剂盒 | 第50页 |
| 6.1.4 化学试剂 | 第50-52页 |
| 6.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 6.2.1 构建诱饵质粒 | 第52-53页 |
| 6.2.2 诱饵质粒转化酵母细胞 | 第53-54页 |
| 6.2.3 诱饵蛋白自激活及毒性检测 | 第54-55页 |
| 6.2.4 酵母细胞接合筛选互作蛋白 | 第55页 |
| 6.2.5 鉴定阳性克隆 | 第55页 |
| 6.2.6 互作蛋白的分析 | 第55-56页 |
| 6.3 实验结果 | 第56-59页 |
| 6.3.1 载体构建 | 第56页 |
| 6.3.2 诱饵蛋白的自激活实验和毒性检测结果 | 第56-57页 |
| 6.3.3 棉花GhPR5K互作蛋白的筛选 | 第57-58页 |
| 6.3.4 阳性克隆DNA提取和测序比对 | 第58-59页 |
| 6.3.6 互作蛋白的酵母回转实验验证 | 第59页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第七章 全文结论及展望 | 第61-62页 |
| 7.1 全文结论 | 第61页 |
| 7.2 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
