| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| 1.1 卵母细胞成熟 | 第10-15页 |
| 1.1.1 细胞核成熟 | 第10页 |
| 1.1.2 细胞质成熟 | 第10页 |
| 1.1.3 胞质成熟时细胞器的变化 | 第10-14页 |
| 1.1.4 胞质成熟时细胞骨架的变化 | 第14-15页 |
| 1.2 CNP对卵母细胞成熟的影响 | 第15-18页 |
| 1.2.1 C型钠肽简介 | 第15-16页 |
| 1.2.2 CNP对卵母细胞减数分裂阻滞的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.3 CNP在卵母细胞体外成熟中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 母源基因Mater、Zar1和Dnmt1概述 | 第18-20页 |
| 1.4 颗粒细胞扩展相关基因HAS2、PTX3和PTGS2概述 | 第20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.6 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 CNP预处理对绵羊卵母细胞减数分裂阻滞及发育能力的影响 | 第22-33页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 液体配制 | 第23-26页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第26页 |
| 2.1.5 耗材 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 卵母细胞收集 | 第26-27页 |
| 2.2.2 C型钠肽预处理及卵母细胞核相检测 | 第27-28页 |
| 2.2.3 卵母细胞体外成熟、孤雌激活及体外胚胎培养 | 第28页 |
| 2.2.4 囊胚细胞数鉴定 | 第28页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第28-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-30页 |
| 2.3.1 CNP预处理对绵羊卵母细胞减数分裂阻滞的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.2 CNP预处理对绵羊孤雌胚胎发育的影响 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 2.5 结论 | 第32-33页 |
| 3 C型钠肽预处理对绵羊卵母细胞成熟前后母源基因Dnmt1,Zar1和Mater表达的影响 | 第33-49页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 液体配制 | 第34页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.5 耗材 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-42页 |
| 3.2.1 卵母细胞的收集 | 第35页 |
| 3.2.2 C型钠肽预处理及卵母细胞体外成熟 | 第35页 |
| 3.2.3 PCR引物的设计与合成 | 第35-36页 |
| 3.2.4 卵母细胞RNA提取及实时荧光定量PCR | 第36-41页 |
| 3.2.5 统计分析 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-47页 |
| 3.3.1 β-actin,Dnmt1,Zar1和Mater标准曲线状况 | 第42页 |
| 3.3.2 Dnmt1,Zar1,Mater和β-actin扩增曲线分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 Dnmt1,Zar1,Mater和β-actin溶解曲线分析 | 第43-44页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR产物特异性检测 | 第44-45页 |
| 3.3.5 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对Dnmt1表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.6 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对Zar1表达的影响 | 第46页 |
| 3.3.7 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对Mater表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 结论 | 第48-49页 |
| 4 CNP预处理对绵羊卵母细胞成熟前后卵丘细胞扩展相关基因PTGS2、HAS2和PTX3表达的影响 | 第49-59页 |
| 4.1 材料 | 第49-50页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 4.1.3 液体配制 | 第49-50页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第50页 |
| 4.1.5 耗材 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-53页 |
| 4.2.1 卵母细胞的收集 | 第50页 |
| 4.2.2 C型钠肽预处理及卵母细胞体外成熟 | 第50页 |
| 4.2.3 PCR引物的设计与合成 | 第50-51页 |
| 4.2.4 卵母细胞RNA提取及实时荧光定量PCR | 第51-53页 |
| 4.2.5 统计分析 | 第53页 |
| 4.3 结果 | 第53-58页 |
| 4.3.1 β-actin、PTGS2、HAS2和PTX3标准曲线状况 | 第53-54页 |
| 4.3.2 β-actin、PTGS2、HAS2和PTX3扩增曲线分析 | 第54-55页 |
| 4.3.3 β-actin、PTGS2、HAS2和PTX3溶解曲线分析 | 第55页 |
| 4.3.4 实时荧光定量PCR产物特异性检测 | 第55-56页 |
| 4.3.5 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对PTGS2表达的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.6 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对HAS2表达的影响 | 第57页 |
| 4.3.7 卵母细胞成熟过程中CNP预处理对PTX3表达的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-59页 |
| 4.5 结论 | 第59页 |
| 5 总结 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
