| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| ·甘露聚糖 | 第11页 |
| ·甘露聚糖酶 | 第11-18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的来源及其性质 | 第11-13页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分类 | 第13-14页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分离纯化及作用机理 | 第14页 |
| ·β-甘露聚糖酶的应用 | 第14-16页 |
| ·产β-甘露聚糖酶微生物的诱变育种 | 第16-17页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分子生物学研究 | 第17-18页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 内生类芽孢杆菌 CH-3β-甘露聚糖酶基因的克隆、表达及结构生物学分析 | 第19-39页 |
| ·材料与方法 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 的液体培养及总 DNA 的提取 | 第20页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因片段的克隆 | 第20-21页 |
| ·TAIL-PCR 扩增β-甘露聚糖酶全长基因及序列分析 | 第21-22页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 MANA 蛋白分子高级结构的预测 | 第22-23页 |
| ·目的基因与表达载体 pET-32a(+)连接及基因工程菌的构建 | 第23-26页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 manA 基因在 E.coli BL 21 中的诱导表达 | 第26页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶的 SDS-PAGE 电泳分析 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-36页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 manA 基因片段的克隆 | 第27-28页 |
| ·侧翼未知序列的分离及鉴定 | 第28-29页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 manA 全长基因的克隆和序列分析 | 第29页 |
| ·Paenibacillus sp. CH-3 MANA 蛋白三维结构分析 | 第29-35页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 重组β-甘露聚糖酶发酵条件的优化及酶学性质研究 | 第39-51页 |
| ·材料和方法 | 第39-44页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39-40页 |
| ·β-甘露聚糖酶活力的测定 | 第40-41页 |
| ·基因工程菌产酶培养条件的优化试验 | 第41-42页 |
| ·温度、诱导物浓度、诱导时间对基因工程菌产酶的影响 | 第42-43页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶粗酶性质的测定 | 第43页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶发酵罐扩大试验 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·基因工程菌产酶培养条件的优化 | 第44-45页 |
| ·温度、诱导物浓度、诱导时间对基因工程菌产酶的影响 | 第45页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶粗酶的酶学特性 | 第45-48页 |
| ·重组β-甘露聚糖酶发酵罐放大试验 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 内生枯草芽孢杆菌 HD-1β-甘露聚糖酶基因的克隆及结构生物学分析 | 第51-57页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·枯草芽孢杆菌 HD-1 总 DNA 的提取 | 第51页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因的克隆 | 第51页 |
| ·Bacillus subtilis HD-1 manB 基因的序列分析 | 第51-52页 |
| ·Bacillus subtilis HD-1 MANB 蛋白分子高级结构的预测 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·Bacillus subtilis HD-1 manB 基因的克隆 | 第52页 |
| ·Bacillus subtilis HD-1 manB 基因序列分析 | 第52-54页 |
| ·Bacillus subtilis HD-1 MANB 蛋白三维结构分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-68页 |
